164882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino- 3-szubsztituált -tiometil- cefalosporánsav- származékok előállítására
164882 11 12 110 ml eluátum tartalmazza a reakcióterméket. Ezt vákuumban óvatosan 30 ml térfogatra pároljuk be, aktívszénnel derítjük, majd vákuumban 10 ml-re pároljuk be. így színtelen kristályos anyag alakjában nyerjük a 7-[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-3--(2-metil-l,3,4-oxadiazol-5-il-tio)-metíl-cef-3-em-4--karbonsavat, mely 183°-on bomlik (vákuumban megolvad). Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rf52A=0,10, Rf101 =0,36 és Rf,, 0 =0,05 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). Ultraibolya abszorpciós spektrumban (vízben) ^max= 270 nm ( e=34 200). Az optikai forgatóképesség [afi0 =-l-3 o +2° (c=0,54, 0,1 mólos nátriumhidrogénkar rjonátol datban). 6. példa 8,13 g 7-[(para-arrdnopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat oldunk 30°-on 6,7 pH-jú 5,7%-os foszfátpufferoldatban. Ezután 4,61 g szilárd 5-merkaptoT3-metil-l,2,4-triazolt adunk hozzá és a pH-t 3 ml 20%-os foszforsawal 6,5-re állítjuk, eközben az összes anyag oldatba megy. Ezután 6 órán át keverjük 60°-on nitrogénatmoszférában. 0°-ra történő lehűtés után, intenzív keverés közben 4 liter 0°-os metanolba folyatjuk. Egy fél órán át 0°-on keverjük, és a kikristályosodó foszfátot leszűrjük. A szűrletet először vákuumban kb. 800 ml-re pároljuk be, majd a víz eltávolítása céljából összesen 3 liter abszolút etanol kapillárison át történő folyamatos adagolása közben ugyancsak vákuumban, 400 ml térfogatra pároljuk be. Végül 800 ml etilacetátot adunk az elegyhez, egy órán át 0°-on állni hagyjuk, szűrjük, a szűredéket etilacetáttal mossuk, így egy, még foszfáttartalmú nyersterméket kapunk (10,37 g). Ezt 25 ml vízben oldjuk és egy 750 ml Sephadex® G 10-zel töltött oszlopon (oszlopátmérő 4,5 cm) szűrjük át. Az első 360 ml eluátumot eldobjuk, az ezt követő 250 ml eluátum tartalmazza a reakcióterméket. Ezt vákuumban óvatosan kb. 30 ml térfogatúra pároljuk be, eközben a reakciótermék közel tiszta alakban kikristályosodik. A kristályos anyagot százszoros menyiségű vízben szuszpendáljuk, a pH-t 1 n sósav hozzáadásával 2,0-re állítjuk, így oldatot kapunk, amelyet kevés aktívszénnel kezelünk. Az így nyert színtelen oldatot, amely a hidrokloridot tartalmazza, vákuumban kis térfogatra pároljuk be és a hidrokloridot etanol és éter fokozatos hozzáadásával kicsapjuk. A hidroklorid színtelen, vízben oldható por. A bázist úgy állítjuk elő, hogy a hidroklorid vizes oldatánk pH-ját 1 n ammóniumhidroxidoldattal 7,5-re állítjuk és vákuumban kis térfogatra pároljuk be. így színtelen, tűs kristályú anyag alakjában nyerjük a 7-[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-3-(3-metil-l,2-4-triazol-5-il-tio)-metií-cef-3-em-4-karbonsavat, amely 210 °-on bomlik (vákuumban megolvad). Vékonyr,étegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rfs2A=0,15,Rfioi=0,36 és Rf,,0 =0,06 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). Ultraibolya abszorpciós spektrumban (0,01 n sósavban) Xmax=263 nm ( e=30 700). Az optikai forgatóképesség [a]2 "=+70° ±1° (c=0,98 0,05 n sósavban). u 7. példa 8,13 g 7-[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat oldunk 30°-on 6,7 pH-jú 5,7%-os foszfátpufferoldatban. Ezután 5,28 g szilárd 5-merkapto-3-metil-l,2-4-tiadiazolt adunk hozzá és a pH-t 10%-os dikáliumhidrogénfoszfátoldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk, enyhe melegítés közben az összes anyag oldatba megy. Ezután az oldatot 6 órán át 60 -on nitrogénatmoszférában keverjük és 0°-ra történő lehűtés után erős keverés közben 4 liter 0°-os metanolhoz folyatjuk. Egy fél órán át keverjük 0°-on, majd a kikristályosodó foszfátot leszűrjük. A szűrletet vákuumban először 800 ml-re pároljuk be, majd a víz eltávolítása céljából összesen 3 liter abszolút etanol kapillárison át történő folyamatos hozzáadása közben, ugyancsak vákuumban 400 ml végtérfogatra pároljuk be. Végül 800 ml etilacetátot adunk az elegyhez, egy órán át 0°-on állni hagyjuk, szűrjük, a szűredéket etilacetáttal mossuk, és így egy, még foszfáttartalmú nyersterméket kapunk (9,86 g). Ezt 25 ml vízben oldjuk, 50 ml kloroformot adunk hozzá, és jól összerázzuk. Rövid idő múlva kristályos anyag kezd kiválni. A nyers, kristályos anyagot 100 ml 2 :1 térfogatarányú metanol-víz elegyben oldjuk, Norit-tal összekeverjük, Hyflo-rétegen átszűrjük és a szűrletet vákuumban amorf részecskék kiválásáig pároljuk be. Ezután az elegyet 25°-ra melegítjük, 50 ml kloroformot adunk hozzá és jól összerázzuk, most azonnal kristályképződés indul meg. A reakcióelegyet vákuumban kb. 50 ml-re pároljuk be és 2 órán át 0°-on állni hagyjuk. Ezután a kristályos anyagot szűrjük, kevés 80%-os etanollal, majd abszolút etanollal mossuk és magas vákuumban szárítjuk. Kitermelés: 4,63 g. így színtelen, tűs kristályú anyag alakjában nyerjük a 7-[(para-aninopiridinium)-acetilamino]-3--(3-metil-l,2,4-tiadiazol-5-ü-tio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat, amely 172°-on bomlik (vákuumban megolvad). A kristályos anyag 0,5 mól kloroformot tartalmaz, igen erős kötésben. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rf52A=0,14, Rf69 (etilacetát-ecetsav-víz 60:20: 20)=0,21, Rf!oi=0,41 és Rfi1( ,=0,10 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). Ultraibolya abszorpciós spektrumban (metanol-víz 2 :1 elegyben) Xmax =273 nm (e=34 500). Az optikai forgatóképesség [a]20 =4-26° ± 1° (c=l,14 metanol-víz 2 :1 elegyben. 8. példa 0,9 g 7-brómacetilamino-3-(l-metil-tetrazol-5-il-tio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat 0,35 ml N,N-diizopropiletilamin hozzáadása közben oldunk 5 ml metanolban. Ezután 0,42 g 4-terc-amiloxikarbonilamino-piridin 1,4 ml metanolos oldatát adjuk hozzá, majd az oldatot 14 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet szűrjük, majd vákuumban be pároljuk, így habot kapunk. Ezt 10 ml etanolban oldjuk, majd gyorsan 150 ml abszolút étert adunk hozzá, így színtelen pelyhes csapadékot kapunk. Ezt fél órán át hagyjuk állni szobahőmérsékleten, majd szűrjük, éterrel mossuk, és nagy vákuumban szárítjuk. A maradékot tízszeres menyiségű 19:1 térfogatarányú kloroform-etanol elegyben oldjuk, szűrjük, és gyorsan 50 térfogatrész étert adunk hozzá. így 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
