164880. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-amiláz és proteáz tartalmú fermentlé előállítására bacillus subtilis törzzsel való fermentációval
164880 /. táblázat Táptalaj Keményítő Laktóz Tejsavópor Szójaliszt Enzimtermelési jelege % % % % csúcsérték jelege a-Amiláz Proteáz SKB E/ml PUK/ml BS-40 4,8 _ _. 1,0 297 160 BS-40/3 -— 4,8 1,0 331 196 BS-40/1 — — 7,0 1,0 342 172 BS-40/2 -— 10,0 1,0 391 146 BS-214 — 5,54 — 1,0 240 297 BS-48 4,8 --2,0 263 232 BS-48/3 -— 4,8 2,0 468 233 BS-48/1 — — 7,0 2,0 559 275 BS-48/2 — — 10,0 2,0 544 260 BS-215 — 5,54 — 2,0 248 451 Hőfok: 37 °C. Keverő fordulatszáma: 550-600/perc. Levegő: 1 liter/táptalaj liter/perc. 25 Fermentor: 10 liter űrtartalmú üvegfermentor. Táptalaj: 6 liter (összetétel a táblázat szerint). A kísérleteket háromszor megismételtük, kettős 30 párhuzamosokkal. A termelési csúcsértéket a tenyésztés 24. órájában kaptuk. Az I. táblázatban összefoglalt eredmények alapján megállapítható, hogy tejsavópor alkalmazásával az 35 a-amiláz termelés emelkedik; ez az emelkedés fehérjeforrásként 2% szójalisztet alkalmazva, sokkal kifejezettebb, mint 1% szójaliszt alkalmazásával. Az a-amiláz termelés szintje 7% tejsavópor alkalmazásával volt a legmagasabb, a kontroll keményítős 40 táptalajhoz képest 100% terméshozam növekedés volt tapasztalható. Ha a maximális a-amiláz termelést biztosító 7% tejsavóporral ekvivalens mennyiségű laktózt adtunk a táptalajhoz, az a-amiláz termelés a keményítő kontroll táptalajhoz képest nem növeke- 45 dett. Ezzel igazolni tudtuk azt, hogy a tejsavópor nem laktóz tartalmánál fogva emelte az a-amiláz termelést. 2. A BS-48/1 jelű táptalajon üvegfermentorokban kapott eredményeket 1000 literes és 20m3 -es 50 fermentorokban is reprodukáltuk. A fermentorok lapátkeverőjének fordulatszáma 220 volt percenként, a tenyészeteken percenként és táptalaj literenként 1 liter steril levegőt áramoltattunk át, a hőmérséklet 37 °C volt. Az a-amiláz aktivitás a tenyésztés 21-24. 55 órájában 1000 literes fermentorban 600 SKB E/ml, a proteáz aktivitás 300 PUK/ml, 20m3 -es fermentorban az a-amiláz aktivitás 450-500 SKB E/ml, proteáz aktivitás 180-250 PUK/ml volt. 60 3. Kísérleteket végeztünk különböző Bacillus subtilis törzsekkel is a tejsavópor a-amiláz-termelést fokozó hatásának megállapítására. A következő eredményeket kaptuk, az 1. példában megadott körülmények között: 65 Táptalaj: Táptalaj: BS-48 BS-48/1 a-amiláz termelés Bacillus subtilis SKB E/ml Bacillus subtilis BSr-IV/1963 (ipari) 255 442 Bacillius subtilis BPL-6 Chinoin (ipari) 147 223 Bacillus subtilis ATCC 6633 (nem ip.) 0,7 1,9 Bacillus subtilis W23Natl.(nemip.) Res. C. Canada 0,2 0,7 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a-amiláz és proteáz tartalmú fermentlé előállítására Bacillus subtilis törzzsel való fermentációval, komplex fehérjét, szervetlen nitrogénfonást, szénforrást, valamint anorganikus sókat tartalmazó táptalajon, azzal jellemezve, hogy Bacillus subtilis törzsként Bacillus subtilis BS-IV/1963 jelűMNCs63 letétszámú törzset, komplex fehérjeként 0,5—3,0% szójalisztet vagy kukoricalekvárt, szénforrásként 4—10 súly% tejsavóport alkalmazunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy komplex fehérjeként 1,5-2,5% szójalisztet, vagy kukoricalekvárt alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szénforrásként 5,5-7,5% tejsavóport alkalmazunk. 4. Az 1 igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentációt 37 °C-on végezzük el. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 0697 OKISZ Labor
