164816. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyarozs-alkaloidok, főként ergokriptin és ergokornin fermentációs előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bedientes napja 1972. VII. 21. (Rl-470) Közzététel napia 1973. XI. 28. Megjelent 1975. VII. 31. 164816 Nemzetközi osztályozás: C 07 d 43/20, C 12 d 13/00 Feltaláló-Wack Géza mikrobiológus 45%, Nagy Lajos mikrobiológus 10%. Székely Dénes vegyész 10%, Szolnoki József vegyész 10%, dr. Udvardy-Nagy Istvánná orvos 15%, Zsóka Istvánné biológus 10%, Budapest. Tulajdonos Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., Budapest Eljárás anyarozs alkaloidok, főként ergokriptin és ergokornín fermentációs előállítására 1 A találmány tárgya eljárás anyarozs alkaloidok, főként ergokriptin és ergokornin fermentációs előállítására. Az elvi jelentőségű szaprofita alkaloidtermelési kísérletek után elsőként a klasszikus anyarozsalkaloidok alapvázát képező lizergsavamid fermentációs előállítását sikerült iparilag is alkalmazható módon megoldani (149.096 és 151.785 számú magyar szabadalmi leírások). Az eljárások kidolgozását döntően két körülmény segítette elő: a lizergsavamidot termelő, fűféléről származó Claviceps paspali rendkívül kedvező tenyésztési tulajdonságokkal rendelkezik rozseredetű Claviceps fajokhoz képest, másrészt a termék lizergsavamid vízoldékony. így a folyamat során a gombasejtből a táptalajba kiválasztva a folyadékban dúsulhat lel. A lizergsavamid eljárások tapasztalatai alapján létrejött az első hasznos alkaloidot eredményező fermentációs eljárás a szintén vízoldékony ergometrin előállítására (152.683 számú magyar szabadalmi leírás). Az eljárásban alkalmazott törzs a fent említett Claviceps paspali faj egy újabb képviselője. Kevéssel ezután ergometrin termelésére méretnövelhető, megfelelő alkaloidszintű fermentációs eljárás került kidolgozásra, mely már a szabadföldi anyarozsalkaloid termesztés jellemző törzsét a rozsparazita Claviceps purpureát alkalmazza (153.739 számú magyar szabadalmi leírás). Nagyszámú irodalmi adat ellenére ma is reprodukciós bizonytalanságot mutatnak azok az anyarozsalkaloid fermentációk, melyek Claviceps purpureát alkalmaznak és a vízben rosszul oldódó peptid-típusu alkaloidok - mint az ergotoxin csoport tagjai, vagy az 35 164816 10 15 20 25 30 ergotamin - előállítására irányulnak. A peptid-típusu alkaloidok három aminosavból álló ciklikus oldallánca bonyolultabbá teszi a bioszintézis folyamatát, e mellett a vízben rosszul oldódó alkaloidok a sejtekben halmozódnak fel, ami hátrányos mind az alkaloid képződése, mind az alkaloidnak a fermentléből történő kinyerése szempontjából. A peptid-típusu alkaloidok bioszintézisét kedvezően befolyásolja, ha a fermentáció teljes ideje alatt biztosítják a tenyészet nitrogén ellátottságát. Korábbi eljárások e célra jól felhasználható aminosavat, mint például aszparagjnt (1.007.949 számú NSZK-beli szabadalmi leírás), vagy természetes eredetű, komplex nitrogénforrást, mint élesztőkivonatot, peptont, zöldségkivonatot (1.120.128 számú NSZK-beli szabadalmi leírás) adagolnak a táptalajhoz, leggyakrabban 1%-nyi mennyiségben. Ezen anyagok alkalmazása azzal a veszéllyel jár, hogy egyidejűleg felgyorsítják a gomba növekedését, a gyorsan növő tenyészet pedig nem, vagy kevéssé képes olyan anyagcseretermékek képzésére, amelyekhez az anyarozsalkaloid is tartozik, és amelyekre általánosan jellemző, hogy az un. szekunder anyagcsere idején, tehát gátolt, lassított növekedés során képződnek. A gombasejtekben felhalmozódó peptid-típusu alkaloidok kinyerésekor szükségszerűen kivonatolják a sejtek lipoid és pigmentanyagának egy részét is, ezek az alkaloidokhoz hasonló oldhatóságot és megoszlást mutatva az alkaloidok tisztítását rendkívül megnehezítik. A fermentáció során képződő pigmentanyagok mennyiségének csökkentésére a korábbi