164664. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás tiokolhicin glükozid-származékainak előállításáraa - antimitotikus vegyületek,

3 164664 4 közegben, szerves oldószer, például dioxán jelenlétében valósíthatjuk meg. Az acetilezett glükozidokat szerves oldószerben vagy oldószerkeverékben, így metanolban vagy metilénkloridban kondenzáljuk diazometánnal. A kondenzálás után a vegyületeket bázissal kezeljük, majd a reagálatlan tiokolhicint elkülönítjük. A 3-glükóz-2-il-3-demetil-tiokolhicint és a 2-glükóz-2-il-2-demetil-tiokolhicint tartalmazó keverék elkülönítése után a termékeket előnyösen alkalmas oldószerrel vagy oldószerkeverékkel végzett kromatográfiával vagy kristályosítással választjuk szét. A tiokolhicin bórtribromiddal történő demetilezése a találmány szerinti eljárás egyik különösen meglepő lépése. Ismeretes ugyanis, hogy a tiokolhicint ónkloriddal 1. helyzetben, alumíniumkloriddal 2. helyzetben lehet demetilezni. Nem volt ismert eljárás a tiokolhicin 3. helyzetben történő szelektív demetilezésére, azaz olyan 3. helyzetű demetilezésére, amely során a 2. vagy 3. helyzetű metilcsoport érintetlen marad. Azt találtuk, hogy tiokolhicint bórtribromiddal reagáltatva főképpen az 1. helyzetbe metilezett 2,3-bisz-demetil-száramazék keletkezik. Az 1. helyzetben metilezett izomer keletkezésének az az előnye, hogy a szóbanforgó metoxicsoport sztérikusan gátolja a 2. helyzetű fenolos hidroxilcsoport reakcióját s így elsősorban a 3. helyzetű hidroxilcsoport glükozileződik. A kromatográfiás elemzés szerint a reakcióban keletkező 3. és 2. helyzetben glükozilezett izomérek aránya 1:2, míg a három szabad hidroxilcsoportot tartalmazó vegyület glükozilezése esetén 20% 3. helyzetben glükozilezett termék és 80% 2. helyzetben glükozilezett termék keletkezik. A találmány szerinti eljárás további előnye tehát, hogy az eljárás során kapott keverék viszonylag több 3. helyzetben glükozilezett vegyületet — tiokolhikozidot - tartalmaz. A találmány szerinti eljárás további előnye, hogy a demetilezés során az acetamidcsoport változatlan marad. A találmány szerinti eljárással előállítható (I) általános képletű 2-glükóz-2-il-2-demetil-tiokolhicin figyelemre méltó antimitotikus hatással rendelkezik, éppen ezért myeloid leukémia, bőrrák, a nyelőcső és a gasztrointesztinális traktus tumorjai és általában rák kezelésére használatos gyógyászati kompozíciókban alkalmazható. A gyógyászati kompozíciókat orális vagy transzkután úton juttathatjuk a szervezetbe. A kompozíciókat adott esetben ampullákba vagy többszöri felhasználásra szánt üvegekbe csomagolható injektálható oldatokká vagy szuszpenziókká alakíthatjuk, felhasználás előtt feloldandó steril porokat, tablettákat, drazsékat, szóróporokat vagy krémeket készíthetünk belőlük. A különböző formájú készítményeket önmagukban ismert eljárásokkal állíthatjuk elő. A találmány szerinti eljárással előállítható 2-glükóz-2-il-2-demetil-tiokolhicin, 0-1,2-biszdemetil-tiokolhicin, a 2,3-bisz-demetil-tiokolhicin új vegyületek és új a 2-tetraketoglükóz-2-il-2,3-bisz-5 demetil-tiokolhicin, 3-tetraketoglükóz-2-il-2,3-biszdemetil-tiokolhicin és a 2-tetraketoglükóz-2-il-l,2-bisz-demetil-tiokolhicin elegye is. A találmány szerinti eljárást —az oltalmi kör korlátozása nélkül — az alábbi példán mutatjuk 10 be. Példa 15 3-glükóz-2-ü-3-demetü-tiokolhicin és 2-glükóz-2-il-2-demetil-tiokolhicin A. lépés: 1,2-bisz-demetil-tiokolhicin és 2,3-bisz-demetil-tiokolhicin keveréke 20 12,45 g tiokolhicint feloldunk 125 ml metilénkloridban, majd az elegyhez —5 C°-on 25 perc alatt 8,7 ml bórtribromid 125 ml metilénkloridban készített oldatát adjuk. Az elegyet ezután 25 felmelegítjük 25 C°-ra, 3 órán keresztül ezen a hőmérsékleten keverjük, majd jegesvizet adunk hozzá és újabb 10 percig keverjük. Végül az elegyet vizes nátriumklorid-oldatba öntjük, a vizes fázist 30% etanolt tartalmazó metÜénkloriddal 30 extraháljuk, a szerves extraktumokat egyesítjük, nátriumklorid-oldattal mossuk, megszárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A kapott 13 g súlyú párlási maradékot -amely 1,2-bisz-demetütiokolhicin és 2,3-bisz-demetil-tiokolhicin keveré-35 kéből áll - további tisztítás nélkül használjuk fel a következő lépésben. A párlási maradékot kromatográfiával vizsgálva megállapítható hogy az körülbelül 10% 1,2-biszdemetil-tiokolhicint és 50% 2,3-bisz-demetil-tio-40 kolhicint tartalmaz. B. lépés: 2-tetraketoglükóz-2-il-2,3-bisz-demetil-tiokolhicin, 3-tetraketoglükóz-2-il-2,3-bisz-demetil-tiokolhicin és 2-45 -tetraketoglükóz-2-ü-l,2-bisz-demetil-tiokolhicin keveréke 13 g 1,2-bisz-demetil-tiokolhicint és 2,3-biszdemetil-tiokolhicint tartalmazó, „A" lépés szerint 50 előállított keveréket feloldunk 250 ml víz és 125 ml dioxán elegyében, az elegyet lehűtjük +5 C°-ra, 56 ml trietilamint, majd lassan 74 g acetobrómglükózt tartalmazó 125 ml dioxánt adunk hozzá. Az adagolás után az elegyet 16 55 órán keresztül 20 C°-on nitrogén atmoszférában keverjük, majd vizes nátriumklorid-oldatba öntjük, metÜénkloriddal extraháljuk és a szerves fázist vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. Az extraktumot megszárítva és vákuumban szárazra 60 párolva 2-tetraketoglükóz-2-il-2,3-bisz-demetil-tiokolhicint, 3-tetraketoglükóz-2-il-2,3-bisz-demetil-tiokolhicint és 2-tetraketoglükóz-2-il-l,2-bisz-demetil-tiokolhicint tartalmazó párlási maradékot kapunk. A párlási maradékot feldolgozás nélkül alkalmazzuk 65 a következő lépésben. 2