164621. lajstromszámú szabadalom • Difenilamin-származékot tartalmazó kártevőirtószer és eljárás a hatóanyag előállítására
19 164621 20 súly/súly arányban összekeverjük. 100 g John-Innes-féle mag-komposztot cserépbe helyezünk, a felületre 8 gyapotmagot teszünk, majd a magvak fölé 100 g talajt rétegezünk. Ezt háromszor megismételjük. A palántákon kialakuló betegséget 13 nap múlva értékeljük. A kapott eredményeket a kezeletlen magvak esetében kapott értékekkel összehasonlítjuk és a betegség visszaszorításának mértékét kiszámítjuk. Az értékelést az előző két példában közölt skála alapján adjuk meg. Az eredményeket a VI. táblázatban adjuk meg. VII. táblázat Vegyület száma (I. táblázat) Értékelés 8 13 16 27 10 VI. táblázat Vegyület száma (I. táblázat) Értékelés 6 2 8 3 15 2 31 1 10. példa 15 20 25 30 Pythium ultimum tenyészetet 2%-os ferde maláta agart tartalmazó kémcsőben 20 C°-on tartunk. A teszt-vegyület kipróbálása előtt 13—17 nappal a tenyészet 0,285 literes üvegben levő, 400 g 5%-os 35 kukoricalisztből és John-Innes-féle komposztból álló talajba visszük át. A mintákat vattadugóval lezárjuk és inokulálás előtt autoklávban 2 órán át sterilezzük. A teszt-vegyület kipróbálása előtt. 2 nappal a magokat és a talajt előkészítjük. A 40 talajt oly módon készítjük elő, hogy a kukoricalisztet John-Innes-féle komposzttal 2 vödör kukoricaliszt + 3,5 vödör komposzt arányban összekeverjük. A magokat oly módon készítjük elő, hogy 25 g borsót 25% teszt-vegyületet tartalmazó 45 kaolinos készítménnyel (porított hatóanyag esetében) vagy 12,5% hatóanyagtartalmú kaolinos készítménnyel (folyékony hatóanyag esetében) összekeverjük 500 ppm súly/súly arányban (azaz 25 g magra 50 mg 25%-os készítményt juttatunk). 50 A teszt-során kb. 100 g vegyes talajt cserépbe helyezünk, a felületre 10 magot teszünk és a magok fölé kb. 100 g talajt rétegezünk. összesen 6 párhuzamos meghatározást végzünk. 55 A cserepeket melegházban 16-20 C°-on tartjuk. 10 nap elteltével a kicsírázott magok számát feljegyezzük és 17 nap múlva az adott esetben jelenlevő gyökereket kiszedjük és egészséges valanint beteg példányokra szétválogatjuk. A fenti 60 eredményeket a kezeletlen valamint Thiram és Drazoxalon szerekkel kezelt magoknál tapasztalt értékekkel összehasonlítjuk. Az eredményeket a VII. táblázat tartalmazza, az értékelést az előző három példában foglaltak szerint végezzük el. 65 11. példa: Ebben a példában az (1) általános képletű vegyületeknek Verticillium albo-atrum ellen kifejtett szisztemikus hatását ismertetjük. A tesztvegyületet lOOppm/súlyrész talaj mennyiségben John-Innes-féle komposztba visszük. A talajt a teszt-vegyülettel golyósmalomban 20 percen át alaposan összekeverjük, majd 2 napon át állni hagyjuk. 4 db, 3,8 cm átmérőjű, elmozdítható, steril John-Innes-féle komposzttal félig töltött műanyag cserépbe 6-10 gyapotmagot helyezünk. A gyapotmagokat a teszt-vegyületet tartalmazó talajjal fedjük. A magokat 30 C°-on 3-4 héten át inkubáljuk. Verticillium albo-atrum spóra-szuszpenziót készítünk és steril vízzel kétszer mossuk. A spóra szuszpenzió koncentrációját 10° spóra/ml értékre állítjuk be. A cserepekben levő gyapotnövények számát cserepenként 4-re ritkítjuk. Az egyik cserepet félretesszük, ez szolgál a teszt-vegyület fitotoxicitásának megállapítására. A másik három cserépben levő növényekbe 2,54 cm-rel a talaj szintje fölött a szár edényszövetébe steril fecskendővel 0,1 ml spóraszuszpenziót fecskendezünk be. Az értékelést 1 hét múlva végezzük el. A szemmel is észrevehető hervadásos tüneteket és az edényszöveten fellépő barna rozsdásodást megfigyeljük és az egészséges növények számát feljegyezzük. Az értékelést 0—3-ig terjedő skála alapján végezzük el, ahol 3 = a Vericillium albo-atrum növekedésének jó gátlása és 0 = a betegséget nem gátolja észrevehető mértékben a kezeletlen kontrollhoz viszonyítva. Az eredményeket a VIII. táblázatban adjuk meg. VIII. táblázat Vegyület száma (I. táblázat) Értékelés 12 16 23 2 2 3 12. példa: Az (1) általános képletű vegyületek az alábbi in vitro teszt szerint a növényi bakteriális és gombás betegségek széles skálája ellen hatásosak. 10