164533. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tuberaktinomicin-N antibiotikum előállítására

15 164533 16 jük, majd 0,4 liter metanolt adunk hozzá és 5 C° hőmérsékleten éjjelen át állni hagyjuk. A kivált terméket szűréssel elkülönítjük metanollal mossuk és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 395 g tuberaktinomicin-N-hidrokloridot kapunk, amelynek tisztasága 71,0%. Hozam: 72,8%. 5. példa: 10 A 2. példában leírt módon folytatjuk le a fermentációt és így 20 liter, 2200 7/ml tuberaktinomicin-N antibiotikumot tartalmazó fermentlevet állítunk elő. E fermentlé pH-értékét kénsawal 2,0-ra állítjuk be, majd kis mennyiségű szűrési 15 segédanyag hozzáadásával leszűrjük. A szűrlet pH-értékét 5,5-re állítjuk és 16,5 g „Eriochrome violet" színezéket adunk hozzá, majd az elegyet 1,5 óra hosszat keverjük, a csapadékot ülepítjük és leszűrjük, vízzel mossuk és megszárítjuk. 20 Az jgy kapott száraz színezék-sót 135 liter oldószerelegyben (80% aceton és 20% metanol) szuszpendáljuk, majd 50%-os metanolos trimetilamin-szulfát-oldatot adunk részletekben hozzá 25 mindaddig, míg további tuberaktinomicin-N-szulfát már nem válik ki az elegyből. A reakcióelegyet azután 1,5 óra hosszat keverjük, a kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük és a színezék teljes eltávolítása céljából acetonnal és metanollal 30 alaposan mossuk. Az így kapott terméket azután az éppen szükséges legkisebb mennyiségű vízben oldjuk és metanol hozzáadása útján a tuberaktinomicin-N-szulfátot ismét kicsapjuk. Ily módon 3,09 g poralakú nyers terméket kapunk, amelynek 35 tisztasága 79%. Hozam: 63%. 6. példa: 7,5 g tuberaktinomicin-N-hidrokloridot, amelyet az előző példákban leírt eljárással állítottunk elő, 75 ml desztillált vízben oldunk, és az* oldatot 20 ml/óra átáramoltatási sebességgel egy Amberlite 40 IRA-411 ioncserélő gyantával töltött és előzőleg szulfát-ciklusba hozott ioncserélő gyantával töltött oszlopon vezetjük át. 10 ml-es frakciókat fogunk fel, a tuberaktinomicin-N hatóanyagot tartalmazó 3-31. frakciót egyesítjük és vákuumban bepároljuk. Ily módon 200 mg/ml tuberaktinomicin-N antibiotikumot tartalmazó kondenzátumot kapunk, ehhez négyszeres térfogatú metanolt adunk, a kivált terméket szűréssel elkülönítjük és megszárítjuk. 6,17 g tuberaktinomicin-N-hidrokloridot kapunk, amelynek tisztasága 80,2%. Hozam: 92%. 7. példa: 100 mg tuberaktinomicin-N-hidrokloridot, amelyet az 1. példában leírt módon állítottunk elő, 5 ml oldószerelegyben, éspedig n-butanol, piridin, ecetsav és víz 15:10:3:12 arányú elegyében oldunk, majd ezt az oldatot egy cellulózporral töltött és előzőleg ugyanilyen oldószereleggyel kezelt 1 cm átmérőjű 130 cm hosszú oszlopra visszük: 10 ml/óra átáramoltatási sebességgel eluálunk ugyanezzel az oldószereleggyel és 3 ml-es eluátum-frakciókat fogunk fel. A hatóanyagot a 39-46. frakció tartalmazza. Ezeket a frakciókat egyesítjük és vákuumban 1 ml térfogatra bepároljuk. A koncentrátumhoz 5 ml metanolt adunk, majd a kivált tuberaktinomicin-N-szulfátot elkülönítjük. Hozam: 60 mg. Szabadalmi igénypont: Eljárás az új tuberaktinomicin-N antibiotikum előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces griseoverticillatus var. tuberacticus N6 130 mikroorganizmus-törzset (deponálva a hivatalos japán „Fermentation Research Institute of the Industrial Technological Agency" intézetnél FERM P-619 szám alatt) szénforrást és nitrogénforrást, továbbá célszerűen szervetlen sókat tartalmazó tápközegben tenyésztjük, majd a kapott fermentléből a termelt antibiotikumot elkülönítjük. 3 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 756148-Zrínyi Nyomda