164403. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rovarok metamorfózisát szabályozó szteroid hormonok előállítására

11 164403 12 6. példa: Muriszteron-tetraacetát A 2. példa szerinti eljárással előállított muriszteron 300 mg-ját 4 ml vízmentes piridinben oldjuk, 2 ml ecetsavanhidridet adunk az oldathoz, majd 24 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután a reakeióelegyet fölös menynyiségű vízben oldjuk. A kivált terméket szárítás után szilikagél (0,06—0,2 mm-es szemcsenagyság) oszlopon kromatografáljuk (eluálóelegy = 98 : 2 arányú kloroform-metanol). Az eluátumok bepárlása után kapott desztillációs maradékot etilacetát-^hexán 1 : 1 arányú elegyéből kikristályosítjuk, amikor egy 236—238 C°-os olvadáspontú terméket kapunk. Ennek infravörös spektrumában (KBr) 3600— 3300; 1740; 1720; 1680 és 1250 em^-es hullámhosszúságnál jellemző sávokat találunk. Amint azt az előbbiekben kifejtettük, a fent említett és a találmány szerinti eljárással előállított kristályos (T) termék legfontosabb tulajdonsága inszekticid (rovarölő) hatása és ebből következően, védő hatása a mezőgazdasági kultúrák iránt. A kristályos (T) termék rovarölő és az ültetvényeket védő hatását 0,1—0,2%os oldatát használva a gyakorlatban bizonyítottuk. A védőhatás a kártevő rovarok több osztályával, mint a Lepidopterák (különösen a Pieris brassicae és a Bombix móri), a Coleopter ák (különösen a Doriphora decemlineata) és másokkal szemben mutatott toxikus hatásával függ össze. A találmány szempontjából lényeges továbbá, hogy ezek a hormonok inszekticid hatással rendelkeznek, külön-külön, és a Kaladana növényből extrakciós 'eljárással történő kinyerésük révén előállított nyers teljes kristályos termékként is. Ügy találtuk, hogy a találmány szerinti hormonok nemcsak részt vesznek szabályozó faktorként a rovarok biológiai ciklusa során, hanem megfelelő formában és dózisban adagolva speciális hatásuk van a rovarok kültakarócseréjére, így tulajdonképpen egy széles spektrumú biológiai típusú inszekticid hatásról van szó. Bár már eddig is ismerték, hogy az ilyen hormonok befolyásolják a rovarok kültakarócseréjét, meg kell jegyezni, hogy ezek az ismeretek mindössze tudományos felfedezést vagy különlegességet jelentettek, és e hormonok ipari előállítása inszektieidként való alkalmazásra gazdasági szempontból nem bírt jelentőséggel. A találmány szerint azonkívül, hogy előnyösen megoldjuk a hormonok ipari előállításának problémáját, megállapítottuk, hogy meglepő módon a Kaladana növényből nyert nyers, vagy már csak kis mértékben tisztított extraktum (azaz a már említett teljes kristályos termék) is jelentős inszekticid hatással rendelkezik, mely hatást az alábbiakban leírt kísérletekkel igazoltuk. Ügy találtuk, hogy növényeket legalább 0,1% teljes kristályos anyagot tartalmazó oldatokkal kezelve kiváló eredményeket kaptunk, a következő rovarokkal szemben: a) Doriphora decemlineata i(fedelesszárnyú ro-5 var Coleopter), b) Pieris brassicae és Mamestra brassicae (Lepidoptera), c) Bombyx móri i(selyemhernyó). A Coleopter és Lepidoptera fajokkal végzett 10 vizsgálatokat a következőképpen folytattuk le: A tesztnövényeket (káposzta vagy padlizsán) nyílt területen tenyésztettük, megóvva azokat minden fertőzéstől, majd a tenyészetet mesterségesen . fertőztük meg a vizsgálandó kártevő-15 vei. Speciálisan elkerített területet alkalmaztunk erre a célra (3X1X1,5 m), melyet egy fából készült kerettel szegélyeztünk és sűrűszövésű nylon-hálóval takartunk le. A területeket különálló kamrákra választottuk szét, melyek 20 egymással nem álltak összeköttetésben. Lepidoptera vizsgálata esetén minden kamrába 5 db „Jesi" fajtájú káposztapalántát ültettünk át, míg Coleoptera esetén az átültetést kamránként 4 db „long violet" padlizsán palán-25 tával végeztük. A vizsgálat időszakában az összes palánta a teljes vegetatív növekedési szakaszban volt. A vizsgálandó hormonokat teljes kristályos alakjukként használtuk, vízzel és acetonnal ké-30 szített oldatukként, a kísérleteket 0,1 és 0,2% hatóanyagot tartalmazó oldatokkal végeztük. Doriphora decemlmeata-ra mutatott hatás vizsgálatát augusztus első tíz napjában végeztük, a vizsgálandó anyagot 500 ml-es dugattyús porlasztóberendezéssel két órával alkonyat előtt permetezve. A következő nap este a kamrába .(kivéve a kontroll kamrát) minden növényre 30 lárvát vittünk fel (összesen 120 lárvát, mivel minden oldatra négy kamrát használunk). A lárvák hossza maximálisan 4—5 mm volt, és mivel kezeletlen padlizsánföldről gyűjtöttük azokat, teljes táplálkozási aktivitással rendelkeztek. 45 A fertőzést úgy végeztük, hogy a fertőzött vetésterületeken a fertőzött leveleket összegyűjtöttük, és letakartuk velük a zárt térben nevelt palántákat. Ily módon elkerültük a kártevők mindenfajta mechanikus károsodását. 50 Megfigyeléseink szerint a lárváknak a szabad .vetésterületről a növekedő palántákra történő áttelepülése az előző levelek fonnyadása következtében megy végbe. Mindenekelőtt megállapítható volt, hogy a kezeletlen kontrollkamrák-55 ban a lárvák áttelepülése 24 óra alatt teljessé vált, míg a kezelt részekben a lárvák az eredeti leveleken maradtak, még azoknak fonnyadása ellenére is. 60 Két nap múlva a lárvák elhagyták az elszáradt levelet, és a kezelt növényen való rövid tartózkodás után attól a lehető legmesszebb eltávolodtak, keresve a menekülés útját, és áthatoltak a borító háló falán. 65 Négy nap múlva megszámoltuk az élő lárvá-35 6