164204. lajstromszámú szabadalom • Eljárás terpén-keverékek gyártására
5 164204 6 zett termékre számítva) a két hasznos frakció (1. és 2.), körülbelül 30% a desztillációs maradék. A nem-oxigénezett szubsztrát visszavezetésére szükség nincs, mivel annak mennyisége gyakorlatilag elhanyagolható. 1. példa: 5 l-es, mechanikus keverővel, sűrített levegőt bevezető csővel, hűtőkígyóval és ellenőrző hőmérővel felszerelt reaktorba 1500 g «- és 'ß-pinén-keveréket (la-pinén tartalom 80%) és körülbelül 1% dibenzoilperoxidot töltöttünk. A szuszpenziót keverés és sűrített levegő-bevezetés közben 75—85 C°-ra melegítettük. A levegő bevezetést, keverést és melegítést 30—50 órán át folytattuk. A kb. 1200 g súlyú oxidációs termék sűrű. narancssárga színű olaj, melynek tulajdonságai az alábbiak: n2l D •== 1,4928 fajsúly21 20 = 0,9917 savszám = 21 peroxidszám: 10 konverzió: 99%. Az oxidációs termék 10 g-ját oszlopon kromatografáltuk '(az oszlop átmérője 6,4 cm. az oszlop magassága 14,2 cím volt). Szilárd adszorbensként 200 g 3-as minőségű, alumíniumoxidot eluáló oldószerelegyként 1% metanol tartalmú benzol-ímetanol elegyet használtunk. Az oszlopon átfolyt első 200 ml oldószer elegyet elvetettük, az ezután átfolyt 3000 ml oldószerelegyből pedig az oldószer elpárologtatása után 8 g, sárga színű, és I-nél kisebb savszámú olajat kaptunk. 50 g ilyen olajat 14 Hgmm nyomáson vákuumdesztiílációnák vetettünk alá. A fentiekben már említett négy frakciót nyertük az alábbi menynyiségben: 1. frakció: 5 g, 2. frakció: 15 g, 3. frakció: 10 g, 4. frakció: 3 g. 2. példa: Az 1. kiviteli példát ismételtük meg azzal a különbséggel, hogy a kromatográfiás oszlopon végzett tisztítás helyett lúgos mosást hajtottunk végre a következő módon: Az oxidációs termék 200 g-ját körülbelül 150 ml 5%-os nátriumhidroxid-oldattal kezeltük választótölcsérben. Erőteljes keverés után a két fázist elválasztottuk, és a vizes fázist elvetettük. A szerves fázist körülbelül 300 ml etiléterben vettük fel a választótölcsérben, a maradék vizes fázist eleresztettük, majd a szerves fázist vízzel mostuk, vízmentes nátriumszulfáton szárítottuk, majd végül a dietilétert csökkentett nyomáson elpárologtattuk. A savszám, mely a kezelés előtt 21 volt, a fenti vizes mosás után l-re csökkent. A mosást ezen kívül súlycsökkenés kíséri, mely az eredeti súlyra vonatkoztatva 5—7%-ot tesz ki. Nátriumhidrogénkarbonát-oldattal végzett hasonló kezelés után az eredeti súlyra számított súlycsökkenés 4—6%. A terpén-frakciókon farmakológiai és kémiai vizsgálatokat végeztünk. 1. frakció: Egéren, intraperitoneális úton vizsgált toxicitása LD5o=173 mg/kg testsúlynak felel meg. Azt találtuk, hogy terpen természetű anyagaínak pozitív bakteriosztatikus aktivitása van, Staphylococcus aureus-ra gyakorolt minimális inhibíciós koncentrációja (M.I.C.) csupán 50 mikrogramm/ml. Ilyen aktivitása miatt az 1. frakció önmagáiban vagy egyéb aktív anyagokkal — közelebbről antibiotikumokkal — együtt fertőző betegségek, különösen a légzőutak fertőző betegségei gyógykezelésére használható, mely utóbbiakkal szemben kimondott topizmust mutat. 2. frakció: E frakció tekintetében a jelenleg előrehaladott állapotban levő klinikai és farmakológiai vizsgálatok két, gyógyászati alkalmazás szempontjából rendkívül érdekes tulajdonságot mutattak ki, nevezetesen: a) antibakteriális hatást. A Staphylococcus aureusra gyakorolt minimális inhibíciós koncentráció 750 mikrograimm/ml. E saját bakteriosztatikus aktivitás, valamint azon egyidejű tulajdonság következtében, hogy a légzőszerveken keresztül eltávozik, a 2, frakció erőteljes antiszeptikus és fertőtlenítő hatást fejt ki a légzőszervekre, b) szinergetikus hatást antibiotikumokkal. In vitro és in vivo végzett vizsgálatok azt mutatták, hogy e frakciónak antibiotikumokkal — különösen tetraciklin típusú antibiotikumokkal — végzett társítása útján az antibiotikumok aktivitása jelentősen megnő. „Jelzett" antibiotikumok segítségével kimutattuk, hogy a 2. frakcióval való társítás révén az antibiotikumok sejthártyákon keresztül történő áramlása serkenthető. Ennek a hatásnak következtében az antibiotikumok emésztőrendszeri felszívódása, valamint szöveteken keresztüli átáramlása megnő, felhalmozódásuk és áthatolásuk elárasztja a baktériumokat, aminek gyógyászati előnye nyilvánvaló. Kimutattuk, hogy ezen 2. frakcióval társított antibiotikumokkal szemben a baktériumok ellenállóképessége csökken, A végzett farmakológiai vizsgálatok a következő eredményekkel jártak: Az 50%-os elhullást okozó halálos dózis — az egéren, intraperítoneálisan 443 mikrogramm/kgnak adódott. A 2. terpén-frakció antibiotikumoknál mind baktériumokkal, mind néhány szövettel szemben citopermeabilizáló szerként hat. Ennek rendkívüli jelentősége van a tüdő és a genitálisurináris traktus tekintetében, a légzőszervi, urológiai és nőgyógyászati-^patológiai antibiotikumos terápia vonatkozásában. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
