164094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az EM-49 antibiotikum és összetevői előállítására
15 164094 16 Az EM-49 SMF antibiotikum az ultraibolya spektrumban végabszorpciót mutat. Infravörös spektruma a 9. ábrán látható. Elemi összetétele (%); C 50,46; H 6,47; N 11,69. Semlegesítési egyenérték: 584. 1200 molekulasúlyra számítva összetétele a CS oH 76 N, 0 O 2 4 empirikus képletnek felel meg. 2,012 mg antibiotikumot 6n sósavval 110°-on 17 óra hosszat hidrolizálva az aminosavelemzés a következő anyagok jelenlétét mutatja: Mikroorganizmus 2,4-diaminovajsav 1,74 mikromól NU, OH 1,01 mikromól treonin nyomokban szerin 0,84 mikromól glutaminsav nyomokban alanin 0,51 mikromól valin 0,82 mikromól leucin 0,45 mikromól tirozin nyomokban fenilalanin 0,47 mikromól A kristályos EM-49-SMF-reineckát olvadáspontja 198-200° (bomlás közben). Ultraibolya spektrumában: *max = 240nm(El% = 450) Xmax= 315iim(E 1 *p3S0) Vízben oldhatatlan, acetonban és metanolban oldódik. 35 13. példa: 40 Többféle mikroorganizmussal végzett kétszeres kémcsőhigításos próbák az alábbi eredményeket szolgáltatták. Ebben a vizsgálatban az EM-49 antibiotikumot hidroklorid alakban használtuk, és 45 tisztasága azonos volt a 6. példában leírt világos sárgásbarna poréval. Legkisebb gátló koncentráció (ag/ml) 10 15 20 Staphylococcus aureus FDA 209P 4,7 Streptococcus pyogenes C 203 0,6 Escherichia coli ATCC 10536 0,8 Escherichia coli SC 8294* 0,6 Pseudomonas aeruginosa SC 8329x 2,4 Candida albicans SC 5314x 12,5 Candida crusei SC 2616X 6,3 Saccharomyces cerevisiae SC lóOO*- 2,4 Aspergillus niger SC 2828x 50,0 Fusarium bulbigenum SC 5273x 25,0 Trichophyton mentagrophytes SC 2637x 6,3 Trichomonas vaginalis SC SSóO51 37,5 *• A Squibb Culture Collection gyűjteményéből származó mikroorganizmusok. 14. példa: In vivo kísérletekben egerekbe intraperitoneálisan Streptococcus pyogenes C 203 100 LDS0 25 adagját injektáltuk, és azt találtuk, hogy amikor két részletben, a fertőzés után 1 órával, majd 5 órával összesen 120 mg/kg EM-49 antibiotikumot szubkután beadtunk, az egerek 50%-a életben maradt. Az antibiotikumot nem kapott kontrollcso-30 portban valamennyi egér elpusztult. 15. példa: Hasonlóképpen, amikor egerekbe Escherichia coli SC 8294 mikroorganizmus 500LD50 adagját 5% disznógyomor-váladékban szuszpendálva intraperitoneálisan befecskendeztük, a fertőzés után 1 órával szubkután injekció alakjában 50 mg/kg EM-49 antibiotikum-hidrokloridot kapott egerek 50%-a életben maradt. Az antibiotikumot nem kapott állatok közül egy sem maradt életben. 16. példa: Az alább felsorolt mikroorganizmusok ellen kétszeres hígítással végzett kémcsőpróbák eredményei a következők: Mikroorganizmus legkisebb gátló koncentráció Mg/ml EM-49 a ß y 5 SMF Staphylococcus auereus 209P 12,5 6,3 3,1 2,4 75 Sterptococcus pyogenes C 203 1,6 0,8 0,4 0,4 3,1 Escherichia coli SC 2927 0,6 0,6 0,6 0,4 1,6 Escherichia coli SC 8294 0,4 0,3 0,3 0,3 12,5 Pseudomonas aeruginosa SC 8329 0,8 0,8 0,4 1,2 >100,0 Candida albicans SC 5314 9,4 9,4 6,3 4,7 >25,0 Trichomonas vaginalis SC 8560 >50,0 25,0 37,5 25,0
