164059. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítására
9 164059 10 [(IV) általános képletű vegyületből, Rí = H, R2 = Mbh, Ac = Z = benziloxi-karbonilcsoport Előállítás az a) eljárásváltozat szerint. a) Z-Gln-His-Pro-NH-Mbh 6,30 g (10 mmól) Z-His-Pro-NH~Mbh-H2 0-t [(II) általános-képletű termék] feloldunk 100 ml metanolban, az oldathoz keverés Pd(OH)2/BaS0 4 katalizátort adunk, majd hidrogént vezetünk keresztül az elegyen. A hidrogén-bevezetés közben az elegy pH-ját önműködő titráló berendezés segítségével 0,93 n metanolos sósav-oldattal 4,0 értéken tartjuk. A hidrálás befejeztéig az elegy 17 ml 0,93 n metanolos sósav-oldatot fogyaszt. Ezután a katalizátort leszívatással eltávolítjuk, a szűrletet bepároljuk, a párlási maradékot 30 ml dimetilformamidban feloldjuk. Az oldathoz hozzáadunk 2,04 ml (15,8 mmól) N-etil-morfolint, 2,7 g (20 mmól) 1-hidroxi-benzotriazolt és 2,8 g (10 mmól) Z-Gln-OH-t [(I) általános képletű vegyület, R = H]. Az elegyet 0 C°-ra hűtjük, 2,1 g diciklohexil-karbodiimid 5 ml dimetilformamidban készült oldatát adjuk hozzá, 1 órán keresztül 0 C°-on, 1 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, a kivált csapadékot leszívatással eltávolítjuk és a szűrletet bepároljuk. A párlási maradékot kevés dimetilformamidot tartalmazó etilacetáttal és 2 n nátriumkarbonát-oldattal extraháljuk, az etilacetátos fázist nátriumklorid-oldattal kirázzuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük, majd tetrahidrofurán-éter elegyből átcsapjuk. Ilyen módon a fenti terméket kapjuk. Hozam: 4,15 g (56%). [a]p° = -33,5° (c=l, dimetilacetamidban). Elemzés a C39 H 45 N 7 O 8 -0,5H 2 O (M: 748,8) képlet alapján: számított: C% 62,52: H% 6,19: N% 13,1: talált: C% 62,6 : H% 6,2 : N% 12,9. b) L-Piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid 1 g (1,34 mmól) Z-Gln-His-Pro-NH-Mbh-t és 0,5 ml anizolt 5 ml triíluorecetsavban 1,5—2 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forralunk. A kapott elegyet a szokásos módon dolgozzuk fel. Hozam: 366 mg (72%). A kapott termék a vékonyrétegkromatográfiás elemzés szerint L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid. 4. példa: L-Piroglutamil-L-hisztidil-I^prolin-amid előállítása Boc-Gln-His-Pro-NH-Mbh-ból (Boc = terc-butiloxi-karbonil) Előállítás az a) eljárásváltozat szerint. a) Boc-Gln-His-Pro-NH-Mbh 5,75 g (9,13 mmól) Z-His-Pro-NH-Mbh-H 20 [(II) általános képletű termék] 100 ml metanolban 5 készített oldatához kevés Pd(OH)2 /BaS0 4 katalizátort adunk, majd az elegyen hidrogéngázt vezetünk keresztül. Az elegy pH-ját a gázbevezetés közben önműködő titráló berendezés segítségével 0,93 n metanolos sósav-oldattal 4,0 értéken tartjuk. A 10 hidrálás befejeztéig az elegy 15,5 ml (14,4 mmól) 0,93 n' metanolos sósav-oldatot fogyaszt. A katalizátort leszívatással eltávolítjuk, a szűrletet bepároljuk. A párlási maradékot 20 ml dimetilformamidban oldjuk, az oldathoz 1,85 ml (14,4 15 mmól) N-etilmorfolint és 3,5 g Boc-Gln-ONp-t adunk, majd 3 napon keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A dimetilformamidot nagyvákuumban történő desztillációval eltávolítjuk, a párlási maradékot etilacetáttal és 2 n nátriumkarbonát-20 oldattal extraháljuk. Az etilacetátos fázist 2 n nátriumkarbonátoldattal, majd kétszer vízzel kirázzuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük. Hozam: 5,55 g (86%). A terméket tisztítás céljából 25 tetrahidrofurán eluálószerrel bázisos alumíniumoxidon kromatografálhatjuk. lb) L-Piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid 30 563,6 mg (0,799 mmól) Boc-Gln-His-Pro-NHMbh-t és 0,5 ml anizolt 5 ml triíluorecetsavban 1 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forralunk. Az elegyet szokásos módon dolgozzuk fel. Hozam: 225 mg (74%). A termék a vékonyrétegkromatog-35 ráfiás elemzés szerint L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid. 5. példa: 40 Ciklizálás fenol-tartalmú trifluor-ecetsawal 1,2 g Z-Gln(Mbh)-His-Pro-NH2 -t és 1 g fenolt oldunk 9 ml triíluorecetsavban, majd az oldatot 45 másfél órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Éterrel vákuumban kétszer desztillálást végzünk, majd a maradék 100 ml vízzel készített oldatát éterrel háromszor extraháljuk. A vizes oldatot hidroxil-formájú, erősen bázikus ioncserélő oszlopra 50 visszük, vízzel mossuk, és a szűrletet fagyasztva szárítjuk. Ilyen módon 350 mg (77%) Lpiroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amidot kapunk: [a]^: -59,8° (c = 1, vízben). 55 Szabadalmi igénypont: Uj eljárás L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítására, azzal jellemezve, hogy 60 a) valamely (I) áltlános képletű vegyületet — amely képletben R hidrogénatomot, 4,4'-dimetoxi-benzhidril-, 2,4-dimetoxi-benzil-, 2,4,6-dimetoxi-benzil- vagy 65 xantil-csoportot jelent, míg 5
