163786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-aszparagil-3'-szuofonil-L-tirozil-L-metionil- glicil-L-triptofil-L-metionil-1- aszparagil-L-fenilalamin-amid előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI «ÍRÁS &©jelériti& Hapja: WW. VII. 17. <SÍÍ-4M) Ajfterifcai ÍJgyésttii ÄHamok-beli elsőbbsége: 1968. Vit. 18. (745 688) Közzététel napja: 1973. V. 28. Megjelent: 1075. VI. 30. 163786 Nenízetközi osztályozás: freltaialőfe: Ondetti líiguel A. vegyész, North Brunswick, Shéeha» John f. vegyész, Middlesex, Plufieec Joisip vegyész, East Bfuttjswiök, New Jersey, Afflnerikai Egyesült Álianjok Tulajdonos: É. R. Söuífefe and Sons, Inc. cég, New York, Amerikai BgyeBült Állaöiok Eljárás L-aszparagil-3'-szulfonil-L-tirozil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid előállítására 1 A találmány tárgya eljárás az új L-aszparagil-3'-szulfonü-L-tirozil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid előállítására. Ivy és Oldberg 1928-ban (Amer. J. Physiol. 86, 599) a "kolecisztokinin" elnevezést javasolták a bélnyálkahártya nyers kivonatában jelenlevő, kísérleti kutyáknál az epehólyag összehúzódását kiváltó anyag elnevezésére. Harper és Raper 15 évvel később [J. Physiol. 102, 115 (1943)] pankreoziminként azonosították azt az ugyanebben a kivonatban levő anyagot, amely stimulálja a hasnyálmirigy-enzim leadását. A Karolinska Institute-ban Mutt és Joyses [Acta Chem. Scand. 18, 1408 (1964)] által végzett izolálás után kitűnt, hogy mindkét biológiai hatást ugyanaz a vegyület fejti ki, és ezt elnevezték kolecisztokinin-pankreoziminnek. A hortoon egy szulfonil-L-tirozil-csoportot tartalmazó polipeptid. A hormon véghelyzetű szulfonált lánca szintetizálására irányuló kísérleteink során felismertük, hogy a találmány szerinti eljárással előállítható L-aszparagil-3'-szulfonil-L-tirozil-L-metionil-glicil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid epehólyagot összehúzó hatású, és ennélfogva felhasználható diagnosztikai célokra az epehólyag röntgenvizsgálata során a kolecisztokininhez hasonló módon. Állatkísérletekben például kutyáknak és macskáknak intravénásán vagy szubkután egyetlen adagban 0,008 — 0,012 mg/kg test-2 súly adható be. Parenterális alkalmazásra a vegyületet alkalmas módon befecskendezhető készítménnyé alakítjuk. Az új szulfonált polipeptid a peptidkémia szo-5 kásos módszereivel állítható elő. A szulfonálás hidegen tömény kénsavval végezhető. A reakcióidő 24—72 óra, a hőmérséklet 20 C° alatt van, előnyösen 0 C° alatt. A következőkben példaképpen ismertetjük az 10 új vegyületnek ismert kiindulási anyagokból való előállítási eljárását. A peptidlánc felépítése aminosavakból vagy peptidekből bármely más, szokásos módon is történhet. 15 Példa 100 mg terc-butiloxikarbonil-L-aszparagil-L-tirozín-hidrazidot [készül a J. Am. Chem. Soe. 92, 198 (1970) közlemény szerint] feloldunk 4 ml 20 dimetilformamidban, és az oldatot szilárd széndioxid-aceton fürdőben — 20 C°-ra hűtve hozzáadunk 0,12 ml tömény sósavat. A fürdő hőmérsékletét —15 C°-ra hagyjuk emelkedni, majd hozzáadunk 0,125 ml 14%-os vizes nátriumnitrit-ol-25 datot. 5 perc múlva a fürdő hőmérsékletét —25 C°-ra csökkentjük, és hozzáadunk 0,26 ml N-etilpiperidint, majd 180 mg L-metionil-glicil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanil-amid-trifluoracetátot [készült a J. Med. Chem. 13, 351 30 (1970) közlemény szerint] 1 ml dimetilformamid-163786 1