163708. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-1,2,3-benzotriazin jelenlétében
163708 11 amidos oldatát adjuk, az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet vízzel elegyítjük. A kivált csapadékot etüacetátban oldjuk, és az oldatot a 2a) példában leírt módon kezeljük. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük. 5,5 g (78 %) terméket kapunk, op.: 171—173 C°, [«]£ = -6,49° (c=2, dimetilformamidban). Elemzés C38 H 17 N 3 O 10 képlet alapján (M = 705,8): számított: C = 64,66%, H = 6,71%, N = 5,69%, talált: C=64,2 %, H=6,9 %, N=6,l %. A kiindulási anyag előállítása: Z-Gln(Mbh)-OH 250 ml jégecetban 28 g Z-Gln-OH-t és 24 g 4,4'-dimetoxibenzhidrolt oldunk. Az oldathoz szobahőmérsékleten 0,5 ml tömény kénsavoldatot adunk. Az elegyet éjszakán át állni hagyjuk, majd 750 ml vízbe öntjük. A kivált olajos termék gyorsan kristályosodik. A kristályokat kiszűrjük, és meleg etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, a csapadékot kiszűrjük, és tetrahidrofurán-petroléteres átcsapassal tisztítjuk. 45,8 g (90%) terméket kapunk, op.: 117— 120 C°, [a]|?= -6,75° (c=2, dimetilformamidban). Z-Gl(Mbh).OMe 5,1 g Z-Gln(Mbh)-OH-t tetrahidrofuránban oldunk, és az oldathoz szobahőmérsékleten a sárga színeződés állandósulásáig éteres diazometán-oldatot csepegtetünk. A diazometán fölöslegét néhány csepp jégecettel elbontjuk. Az oldószert vákuumban lepároljuk, és a maradékot petroléterrel eldörzsöljük. 5,2g(100%)terméket kapunk, op.: 146—150 C°, [O£]D = — 10,8° (c=2, dimetilformamidban). HCl.H-Gln(Mbh)-OMe 56 g Z-Gln(Mbh)-OMe-t kevés dimetilformamidot tartalmazó metanolban oldunk. Az oldatot Pdkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük, miközben az elegy pH-ját automata titrálóberendezésből adagolt metanolos sósavoldattal 4,5 értéken tartjuk. A hidrogénezés befejeződésekor a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk és semleges A12 0 3 oszlopon (Woelm, I. aktivitási fok) kromaíografáljuk. 34,5 g (76 %) terméket kapunk, op.: 182—183 C°, [a]f,2= +21,4° (c=2, metanolban). b) Z-Val-Glu(OBut )-Gln(Mbh)-OMe 4 g Z-Glu(OBut)-Gln(Mbh)-OMe-t metanol-dimetilformamid elegyben, Pd-katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. Az elegy pH-ját automata titrálóberendezésből adagolt 1 n metanolos sósavoldattal 4,5 értéken tartjuk. A reakció befejeződésekor a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban betöményítjük. A maradékot petroléterrel és éterrel eldörzsöljük, és finom vákuumban szárítjuk, maradékot, 1,4 g Z-valint és 0,92 g HOOBT-t 17 ml dimetilformamidban oldjuk, és az oldathoz 0 C°-on, keverés közben 0,73 ml N-etilmorfolint, és 1,25 g DCC dimetilformamiddal készített, hideg oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, és 1 órán át 12 szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot nátriumhidrogénkarbonát-oldattal kétszer eldörzsöljük, majd vízzel mossuk. 4,35 g (95,3%) 189—190 C°-on 5 olvadó terméket kapunk. A terméket tisztítás céljából alkoholban felforraljuk, majd az elegyet lehűtjük. 3,85 g (84,4%) 200—204 C°-on olvadó terméket kapunk. [a]D =-9,45° (c=2, dimetilformamidban). 10 Elemzés C43 H B8 N40 41 képlet alapján (M = 804,95): számított: C=64,16%, H=7,01%, N=6,96%, talált: C=64,0 %, H=7,0 %, N=6,9 %. 15 7. példa Z-Pro-Lys(Boc) -Gly-NH-Mbh előállítása 20 a) Z-Lys(Boc)-Gly-NH-Mbh 200—200 ml dimetilformamidban 56,2 g (0,1 mól) Z-Lys(Boc)-OH.DCHA-t, illetve 34 g (0,1 mól) H-Gly-NH-Mbh.HCl-t oldunk, és az oldatokat egyesítjük. Az elegyet lehűtjük, a kivált csapadékot ki-25 szűrjük, és a szűrlethez 16,3 g (0,1 mól) HOOBT-t adunk. Az oldathoz 0 C°-on 22 g DCC dimetilforamiddal készített oldatát adjuk, és az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet 30 vákuumban bepároljuk. A maradékot meleg etilacetát és nátriumhidrogénkarbonát-oldat között megosztjuk. Az etilacetátos oldatot 2 n citromsavoldattal, nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és bepá-35 roljuk. A maradékot etilacetát-petroléter elegyből átkristályosítjuk. 54,2 g (82%) terméket kapunk, op.: 125—127 C°, [a]f,2 = +5,4° (c=2, metanolban). Elemzés C36 H 46 N 4 0 8 képlet alapján (M=662,8): 40 számított: C=65,24%, H = 7,00%, N=8,45%, talált: C=65,l %, H=6,8 %, N=8,2 %. b) H-Lys(Boc)-Gly-NH-Mbh.HCl 54,2 g Z-Lys(Boc)-Gly-NH-Mbh metanolos 45 szuszpenzióját Pd-katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A hidrogénezés során a szuszpenzió pH-ját automata titrálóberendezésből adagolt 1 n metanolos sósavoldattal 5 értéken tartjuk. A katalizátort kiszűrjük, és az oldatot bepároljuk. A maradékot 50 éterrel eldörzsöljük. 45,1 g (97,5 %) terméket kapunk, op.: 196 C°, [ajl2 = +16,75° (c=2, metanolban). A termék tapasztalati képlete: GägH^QNiOg (M = =565,1). 55 c) Z-Pw-Lys(Boc) -Gly-NH-Mbh 2,5 g (10 mmól) Z-Pro és 1,63 g (10 mmól) HOOBT 30 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0 C°-on 2,2 g DCC kevés dimetilformamiddal készített, 0 C°-ra hűtött oldatát adjuk. Az ele-60 gyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd 5,65 g (10 mmól) finoman elporított H-Lys(Boc)-Gly-NH-Mbh.HCl-t és 1,3 ml (10 mmól) N-etilmorfolint adunk hozzá. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a 65 kivált csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet bepárol-6
