163599. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív hexa -, hepta és oktapeptidek előállítására
163599 17 44, 476, (1961)]. Ily módon 68% hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet; op.: 185—189 C°; [a]f,3 = = -25° (c=2, metanolban). 3. Boc-Met-Glu-(OtBu)-His-N2 H 3 előállítása Az 1. bekezdés szerinti módon előállított 3,7 g Boc-Met-Glu-(OtBu)-His-OMe észtert 70 ml metanolban oldunk és az oldathoz 3,7 ml hidrazin-hidrátot adunk. A reakcióelegyet 5 óra hosszat keverjük, majd az oldószert elpárologtatjuk. A maradékként kapott nyers terméket közvetlenül felhasználjuk a következő reakciólépésben. A kapott termék Rf -értéke amilalkohol, izopropanol és víz 10:4:5 elegyében (szilikagél-lemezen) 0,39. 4. Boc-Met-Gln-His-N2 H s előállítása Boc-Met-Gln-His-OH metilészterét a 3. szakaszban leírt módon a megfelelő hidraziddá alakítjuk át. A kapott termék Rr értéke amilalkohol, izopropanol és víz 10:4:5 elegyében (szilikagél-lemezen) 0,14. 5. H-Met-Glu-His-D-Phe-Lys-Trp-Gly-OH,acetát előállítása 4 millimól Boc-Met-Glu-(OtBu)-His-N2 H 3 -at 10 ml dimetilformamidban oldunk. Az oldatot 0 C° hőmérsékletre hűtjük és 12 mól-ekvivalens frissen előállított tetrahidrofurános sósavoldatot adunk hozzá. Az elegyet tovább hűtjük —20 C-ra, majd ezen a hőmérsékleten 0,6 ml (4,4 millimól) izoamilnitritet adunk hozzá és az elegyet 7 percig keverjük. Ezután 4 millimól H-D-Phe-(Boc)-Lys-Trp-Gly-OH peptidet (Rf szilikagél-lemezen, butanol, ecetsav és víz 4:1:1 arányú elegyében 0,12) adunk hozzá. Az elegyet azután az 1. példa A) szakaszában leírt módon dolgozzuk fel tovább. Az így kapott védett heptapeptidet azután az 1. példa B) szakaszában leírt módon mentesítjük a védőcsoportoktól, majd a kapott trifluorecetsavas sót — ugyancsak a leírt eljárással — ecetsavas sóvá alakítjuk át. Ily módon a kiinduló hidrazidra számítva 62% hozammal kapjuk a cím szerinti acetátot. Rf -érték butanol, piridin, ecetsav és víz 4:0,75:0,25: : 1 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,33. 6. H-Met-Gln-His-D-Phe-Lys-Trp-Gly-OH.acetát előállítása 4 millimól Boc-Met-Gln-His-N2 H 3 -at az előző szakaszban leírttal egyező módon a megfelelő aziddá alakítunk, majd ezt a H-D-Phe-(Boc)-Lys-Trp-Gly-OH pepiiddel kondenzáljuk és a kapott termék védőcsoportjait trifluorecetsavval való kezelés útján eltávolítjuk, végül pedig az így kapott trifluorecetsavas sót a megfelelő acetáttá alakítjuk át, az 1. példa megfelelő szakaszaiban leírt eljárás szerint. így a kiinduló hidrazidra számítva 58%-os hozammal kapjuk a cím szerinti acetátot. Rf -érték butanol, piridin, ecetsav és víz 4:0,75:0,25:1 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,22. 12. példa a) lg ditritil-His-D-Phe-Arg-Trp-OMe észtert, amelyet a B. példa 1. bekezdése szerint állítottunk elő, 25 ml metanolban oldunk, az oldatot 0 C°-ra hűtjük és 4 óra hosszat ammónia-gázt buborékolta-18 tunk az oldaton keresztül. A képződött csapadékot azután szűréssel elkülönítjük, majd metanol és éter 8:2 arányú elegyéből átkristályosítjuk. 0,74 g ditritil-His-D-Phe-Arg-Trp-NH2-t kapunk, amely 5 bomlás közben 182 C°-on olvad. Rr érték benzol és etanol 8:2 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,37. b) 1 g ditritil-His-D-Phe-Arg-Trp-OMe észtert, amelyeta B.példa 1. bekezdése szerint állítottunk elő, 25 ml metanolban oldunk, az oldatot —20 C°-ra 10 hűtjük, dimetilamint vezetünk a lehűtött oldatba és a reakcióelegyet 20 óra hosszat állni hagyjuk. Ezután szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni és 1 óra hosszat keverjük. A metanolt vákuumban elpárologtatjuk, a maradékot éterrel elkeverjük, majd le-15 szűrjük és megszárítjuk. 0,90 g ditritil-Hid-D-Phe-Arg-Trp-N(CH3 ) 2 -t kapunk, amelynek R f -értéke benzol és etanol 8:2 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,45. c) A fenti módon kapott amid, illetőleg dimetil-20 amid tritil-csoportjainak az E. példában leírt módon történő lehasítása után a kapott amidok elemzési adatai: Rf His Phe Arg NH3 1. H-His-D-Phe-25 -Arg-Trp-NH2 0,29 0,95 0,99 1,02 0,99 2. H-His-D-Phe-Arg-Trp-N(CH3 ) 2 0,30 0,95 1,01 1,02 (A fenti Rf -értékek meghatározása butanol-piridin-30 »ecetsav-víz 4:0,75:0,25:1 arányú elegyében, szilikagél-lemezen történt.) d)0,99g Boc-Met-Glu-(OtBu)-N2 H 3 -at, amelyet az A.l. példa szerinti módon állítottunk elő, az 1. példa A) bekezdésében leírttal egyező módon 35 aziddá alakítunk át. A kapott azid-oldatot hozzáadjuk 2 millimól H-His-D-Phe-Arg-Trp-NH2 10 ml dimetilformamiddal készített oldatához, majd 6—9 pH-értékig trietilamint adunk az elegyhez. A reakcióelegyet 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat kever-40 jük, majd az 1. példa A) bekezdésében leírt módon dolgozzuk fel tovább. 0,75 g Boc-Met-Glu-(OtBu)-His-D-Phe-Arg-Trp-NH2 -t kapunk, amelynek Rfértéke butanol, piridin, ecetsav és víz 4:0,75:0,25:1 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,74. 45 A fenti módon kapott védett peptid-amid védőcsoportjait az 1. példa B) bekezdésében leírt módon lehasítjuk: így 71%-os hozammal kapjuk a H-Met-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-NH2 -t, amelynek Rf-értéke butanol, piridin, ecetsav és víz 4:0,75:0,25:1 ará-50 nyú elegyében, szilikagél-lemezen 0,26. e) Az előző bekezdésben leírttal egyező módon Boc-Met-Glu-(OtBu)-N2 H 3 -at aziddá alakítjuk át, majd ezt a C. példa 2. bekezdésében leírt módon előállított H-His-D-Phe-Arg-Trp-N(CH3 ) 2 -vel kap-55 csoljuk és így 65%-os hozammal kapjuk a H-Met-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-N(CH3 ) 2 -t, amelynek Rfértéke butanol, piridin, ecetsav és víz 4:0,75:0,25:1 arányú elegyében, szilikagél-lemezen 0,26. 60 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű hexa-, hepta-és oktapeptideknek X-(L vagy D)-Met-L-Glu-(vagy L-Gln)-L-His-D-65 -Phe-L-Arg-(vagy L-Lys)-L-Trp-Y (I) 9
