163599. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív hexa -, hepta és oktapeptidek előállítására
163599 polimerekkel, például oxipolizselatinnal, karboximetilcellulózzal, dextránnal, polifenolokkal, polialkoholokkal, vagy aminosav-polimerekkel vagy -kopolimerekkel — előnyösen nagymennyiségű aaminosav-csoportot, például glutaminsav- vagy aszparaginsav-csoportot nem terminális helyzetben tartalmazó aminosav-polimerekkel vagy -kopolimerekkel — egyesítjük. A nyújtott hatású készítmények előállításához különösen előnyösen használhatjuk fel az (I) általános képletű peptidek fémkomplexeit. A fémkomplexek előállítása során az (I) általános képletű vegyületeket biológiai körülmények között nehezen oldható fémsókkal, fémhidroxidokkal, illetőleg fémoxidokkal reagáltatjuk. Nehezen oldódó fémsóként rendszerint fémfoszfátokat, fémpirofoszfátokat és fém-polifoszfátokat alkalmazunk. A komplexképzéshez fémként a periódusos rendszer alcsoportelemeit, így kobaltot, nikkelt, rezet, vasat — célszerűen cinket —, valamint a periódusos rendszer kelátképző főcsoportelemeit, így a magnéziumot vagy alumíniumot használhatjuk fel. A fémkomplexeket önmagában ismert módon állítjuk elő. A fémkomplexek előállítása során például az (I) általános képletű peptideket vizes közegben reagáltatjuk a nehezen oldódó fémsókkal, fémhidroxidokkal vagy fémoxidokkal. Eljárhatunk úgy is, hogy az (I) általános képletű peptid és valamely oldható só vizes oldatához lúgos anyagot adunk, és így kicsapjuk az oldhatatlan peptid-fémhidroxid komplexet. Egy másik eljárásváltozat szerint az (I) általános képletű peptidet, az oldható fémsót, és egy oldható sót vizes, célszerűen lúgos közegbe adagoljuk. A beadagolás során az oldhatatlan peptid—fémsó komplex magában a reakcióközegben képződik. A komplexet a fenti eljárásokkal kapott szuszpenzió formájában is felhasználhatjuk, injekciós készítmények előállítására azonban a komplexet elkülönítjük a vizes közegből, majd megfelelő közegben szuszpendáljuk. Az (I) általános képletű peptideket, sóikat, származékaikat és komplexeiket előnyösen injiciálható oldatok, emulziók vagy szuszpenziók formájában adjuk be. A fenti vegyületeket a szokásos segédanyagok felhasználásával orálisan beadható készítmények, kúpok vagy permetek formájában is kikészíthetjük. A gyógyászati készítmények a gyógyszerformától függően dózis-egységenként előnyösen 1 mg—1 g hatóanyagot tartalmazhatnak. Az (I) általános képletű vegyületek pszichofarmakológiai hatását a következőképpen vizsgáltuk: 140—160 g testsúlyú hím fehér patkányokat úgynevezett ingadobozba helyeztünk. Feltételes reflex keltésére 5 másodpercig működő jelzőcsengőt használtunk. A feltétlen ingert áramütéssel váltottuk ki. A doboz alján vezetett dróton keresztül az áramütés az állatok lábát érte. Az állatok reagálása után a feltétlen ingerkeltést megszüntettük. Az ingerkeltést mindennap — 60 másodperces szünetekkel — addig ismételtük, amíg az állatok három egymást követő napon át 80%-os vagy nagyobb reakciókiesést nem mutattak. A reakciókiesés megszűnését 8 napon át, hasonló körülmények között vizsgáltuk, azzal a különbséggel, hogy a feltétlen ingerkeltést megszüntettük. 10 15 20 25 40 45 50 55 60 65 A vegyületek pszichofarmakológiai hatáserősségét az egyes állatoknál a kísérlet első, illetőleg második szakaszában tapasztalt reakciókiesések számával jellemeztük. A vizsgálandó vegyületeket szubkután injekció formájában adtuk be. Az első injekciót a feltétlen ingerkeltés megszüntetésének napján adtuk be, majd naponta egy injekcióval folytattuk a kezelést. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. Amennyiben az optikai konfigurációt nem tüntetjük fel, úgy az L-konfigurációjú vegyületet értjük. A példákban a következő rövidítéseket használjuk: a) A védőcsoportok rövidítései: Z BOC tBu Me NP N2H 8 benziloxikarbonil terc-butoxikarbonil terc-butil metil p-nitrofenil hidrazid tritil b) Az aminosavak neveinek rövidítései: Ser Met Glu 30 Gin His Pile Arg Lys 35 Trp Gly szeril metionil glutamil glutamini! hisztidil fénilalanil arginil lizil triptofil alicil c) Egyéb rövidítések: DCCI diciklohexilkarbodiimid DCHA diciklohexilamin A kiindulási anyagok előállítása A.l. példa Boc-Met-Glu- (O tBu) -N2 H s előállítása 24,9 g (100 mmól) Boc-Met-OH-t (a diciklohexilamin-sóból előállított termék) 300 ml tisztított metilénkloridban oldunk, és az oldathoz 26,75 g H-Glu-(OtBu)-OEt.HQ-tadunk.A kapott elegyet 0 C°-ra hűtjük, majd 14 ml trietilamint adunk hozzá. Az elegyet -5 C°-ra hűtjük, 20,6 g DCCI-t adunk hozzá, és a szuszpenziót 20 órán át 0 C°-on keverjük. A kivált diciklohexilkarbamidot és trietilamin-hidrokloridot kiszűrjük és mossuk. A metilénkloridos oldatot 0,1 n sósavoldattal, vízzel, 5%-os nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, magnéziumszulfát fölött szárítjuk, a metilénkloridot vákuumban lepároljuk, és a maradékot 40:60 arányú etilacetát-petroléter elegyből kristályosítjuk. 95—98 C°-on olvadó terméket kapunk, [a]g" = -18° (c=l, etanolban), Rf =0,74 (9:1 arányú benzol-etanol elegyben). 4,6 g fenti módon kapott dipeptidet 25 ml etanolban oldunk, az oldatot 0 C°-ra hűtjük, majd 1 ml hidrazinhidrátot adunk hozzá. Az elegyet 18 órán
