163515. lajstromszámú szabadalom • Izoflavon-származékokat tartalmazó takarmányadalék és eljárás annak előállítására
j 163515 7-izopropoxi-izoflavon hatásmóddal kapcsolatos vizsgálatok: Az anabolikus hatást Eisenberg és Gordan klasszikus módszerével vizsgálták (Eisenberg E., Gordan G. S. J., J. Pharmacol. 99. 38. 1950). A vizsgálatok szerint a kezelt állatok musculus levator ani súlya p < 0,01 Student szignifikanciával növekedett, de nem növekedett a vesicula seminalis súlya. Az állatok kipreparált rekeszizom súlya p < 0,05 szignifikanciával nőtt. A kísérletek során az anyag adagolása 30 mg/tskg dózisban történt 5 héten keresztül perorálisan a táppal homogenizálva, előtte golyósmalomban történő koncentrátum őrléssel. A vizsgálatokra 100—120 g-os hím Wistar patkányok kerültek, melyeket előzetesen kasztráltak, és a műtéti sebzés gyógyulása után 10 nappal kerültek az állatok kísérletre. A patkányok napi 12 g egységesített tápot kaptak a kontrollokkal azonos módon. Az állatok a kísérleti idő 5-ik hetének végén kerültek leölésre. A nitrogén retenciós vizsgálat ugyancsak patkányokkal, öt héten keresztül 30 mg/tskg perorális bevitellel történt. A nitrogén retenció p < 0,05 szignifikanciával fokozódott. Az anabolikus hatást S35 jelzett methionin perorális bevitellel vizsgálták, egyidejű 7-izopropoxi-izoflavon adagolással. E vizsgálatok szerint megállapítható volt, hogy a kezelt állatok fokozottabban építették be izomszövetükbe a jelzett methionint. A patkány úszó teszten először 50 mg/tskg dózisban nőstényállatokon, majd 5 mg/tskg dozírozásban hím állatokon vizsgálták az úszó teljesítményt. (Perorális adagolás) Az állatok 3 g/100 g testsúlyteherrel 29 °C-os vízben kimerülésig úsztak. A bevitt tápanyag (egységesített) a kontrollal azonos volt. Mind a kontroll, mind a kezelt állatok naponta teljes kimerülésig úsztak, a kísérlet teljes időtartama 45 nap volt. Végeredményben (a 45. napon) a teljes kimerülésig történő úsztatás időkülönbsége a kontroll és a kezelt állatok között 33 perc volt, azaz a kontrollok maximális úszási teljesítményének átlaga 166 percről 196 percre fokozódott a 45. napra, míg a kezelt állatoké 162 percről 225 percre növekedett. Szignifikancia: p <0,01. A további kísérletek során a 7-izopropoxi-izoflavon hatását részben szteroid anabolikum hatással hasonlítottuk össze, részben pedig vizsgáltuk annak antikatabolikus hatását Cortison egyidejű adagolásával. A kísérletekben Anabolint (Methandrestenolone) 0,03 mg/100 g testsúly 10 napig és Adresont (Cortison-Organon) 3 mg/100 g testsúly, ugyancsak 10 napig perorálisan adagoltunk. A 7-izopropoxi-izoflavon adagolása a teljes kísérleti időszakra (31 nap) kiterjedt. Az adagolás itt perorálisan 3,3 mg/100 g testsúly volt. A kísérletek alapján megállapítható volt, hogy a 7--izopropoxi-izofiavon az Anabolin hatásával párhuzamusan gátolta a Cortisonnal kevert állatoknál megfigyelhető testsúlycsökkenést, mellékvese atrófiát, musculus levator ani súlycsökkenést és nitrogén-ürítés fokozódását. Nem befolyásolta a 7-izopropoxi-izoflavon kezelés a nem kasztrált állatok vesicula seminalis súlyát sem, míg az Anabolin szignifikánsan növelte azt. Előkísérleteink alapján a 7-izopropoxi-izoflavon gátolja a patkányokon a kísérleti lathyrismus kifejlődését (aminopropionitril adagolás), a Winzler szerint meghatározott seromucoid tartalomra ugyanakkor nem látszik hatást kifejteni. Hatása az E-vitamin hatással nincs összefüggésben, 5 és nyulakon kiváltott E-avitaminózisra nincs kivédő hatással. A 7-izopropoxi-izoflavon adagolása hatására hím patkányokon az anabolikus tulajdonságnak megfelelően szignifikánsan csökken az oxigénfelvétel, de alig vagy 10 nem változik az R/Q hányados. (Respirációs quotiens) Ennél a kísérletnél az állatok 0,3 mg/100 g testsúly 7-izopropoxi-izoflavont kaptak adagolt takarmányban homogénen bekeverve. 4 hetes kezelés után került sor a vizsgálatra. Az oxigén fogyasztást Schollander mód-15 szerével mérték. Az oxigénfogyasztás értékei a nemzetközi irodalomnak megfelelően 02 ml/óra/dm 2 testfelületegységben került megadásra. A kontrolinál az induló érték 263, 4 hét után pedig 265 volt, a kezelt állatoknál ezzel szemben az induló 290-es értékek 210-re csökken-20 tek. A kísérletek mind kontrollos, mind önkontrollos módszerrel folytak. Az oxigénfelvétel csökkenésének szignifikanciája: p < 0,001, illetve p <0,01. 7-izopropoxi-izoflavon felszívódási és ártalmassági 25 vizsgálatok A C14 -el jelzett molekula felszívódása perorális adagolásban elég gyors. Az ürülés perorális adagolás után kb. felerészben a vizelettel, felerészben pedig a faecessel 30 történik. Az ürítés más anyagokhoz viszonyítva kissé elhúzódó, ez utóbbi jelenség feltehetően az anyag erős lipoid oldékonyságával állhat összefüggésben. Kezelés befejezése után 48 órával még számos szervben radiográfiásán kimutatható aktivitás mutatkozik. Az egy-35 idejűén tríciummal is jelzett molekula vizsgálata alapján a visszamaradt termék azonban már metabolit. Akut toxicitási vizsgálatban 4 g/tskg perorális adagolás esetén 48 órás megfigyelési idővel elhullás nincs, sem egéren, sem patkányon, sem kutyán. Ennél ma-40 gasabb dozírozás már nem kivitelezhető. Subcutan 3,5 g/tskg felső adagolási határ esetén patkánynál ugyancsak nem okozott az anyag elhullást. Infantilis egér uterus teszten sem subcutan, sem perorálisan ösztrogén hatás nem mutatkozott. 45 1 hónapos subacut vizsgálatokban 200 mg/tskg és 500 mg/tskg napi perorális adagolás esetén sem egéren, sem patkányon kimutatható kóros elváltozás nem volt. Féléves patkányon történt krónikus toxikológiai vizsgálat alapján megállapítható (hím és nőstény állatok, 50 napi 200 mg/tskg és 500 mg/tskg perorális adagolás), hogy a 7-izopropoxi-izoflavon sem laboratóriumi paraméterekben, sem szövettani vizsgálatok alapján észrevehető elváltozást a súlynövekedést kivéve nem mutattott (10—15%). [55 Kutyákon ugyancsak a féléves krónikus toxikológiai vizsgálat szerint jelentős (15%-ot meghaladó) súlygyarapodáson kívül semmiféle laboratóriumi vizsgálatokkal, és szövettanilag kimutatható egyéb hatás nem mutatkozott. A súlyban jelentősen megnövekedett állatok 60 vitalitása, fürgesége ugyancsak nem változott. A dozírozás napi 20 mg/tskg és 100 mg/tskg 7-izopropoxi-izoflavon perorális adagolásával történt. (A normál dozírozás 1 mg/tskg.) A reprodukciós készség vizsgálata szerint a kezelt 65 patkány háremekben (egy hím, tíz nőstény) a fogamzás 4
