163222. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tejoltó enzim előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Szolgálati találmány A bejelentés napja: 1971. III. 10, (BI—3Ö9) Közzététel napja: 1972. XI. 28. Megjelent: 1975. XI. 29. 163222 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 13/10 i' • ,< Feltalálók: Aradi Csabáné vegyésztechnikus, (4%), Avar Berta laboráns, (3%), Horváth Ferencné vegyésztechnikus, (4%), Marossy Katalin oki. vegyész, (26%), Pintér László oki. vegyész, (6%), Dr. Pólya Kálmán biokémikus, (23%), Székely Barnáné vegyésztechnikus, (4%), Végh József né oki. agrármérnök, (30%), Debrecen Tulajdonos : BIOGAL Gyógyszergyár, Debrecen Eljárás tejoltó enzim előállítására 1 A találmány tárgya eljárás tej oltó enzim előállítására 11 722 számú Bacillus subtilis komplex táptalajon történő fermentálásával, majd a termelt enzim szilárd formában való kinyerésére. A borjúgyomorból előállított oltóenzim, is- 5 mert néven rennin vagy chymosin fontos tejipari alapanyag. Ipari előállítása eddig leginkább borjúgyomorból történt. A mikrobiológiai szintézis útján nyert enzimkészítmények kevésbé ismertek, azokkal szemben is fontos követelményként 10 támasztja a felhasználó ipar, hogy a borjú eredetű oltóenzimhez közelálló tejalvasztó enzimaktivitást mutassanak, ne rendelkezzenek jelentékeny proteolitikus aktivitással. A magas proteolitikus aktivitás a felhasználás 15 során nem kívánatos hatást fejt ki, pl. a sajtgyártásnál a sajt nyúlósodásához vezet. [EDELSTEN, D. ROYAL VETERINARY AND AGRICULTURAL UNIVERSITY YEARBOOK COPENHAGEN 1969)]. 20 Több eljárás ismeretes az oltóenzim mikrobiológiai szintézissel való előállítására. A 155 623 számú magyar szabadalom Mucor miehei fajjal szintetizál. KEI ARIMA és társai [Applied Microbiology 1968. 16 (11) 1727—1783,, Biochim. 25 Biophys. Acta. 1969. 171 (1) 138—144.] a Mucor pusillus varietas Lindt mikroorganizmussal termelt rennin tisztítását és kristályosítását oldották meg. Ismeretesek olyan eljárások is, melyek bioszintézishez baktériumfajok alkalmazását ír- 30 ják le, pl. B. brevis, B. cereus, B. mesentericus, B. subtilis. (SRINIVASAN R. A.: 16 th International Dairy Congress 1962. B. 401—409 and 506—512) [KRUEGER W. KRENKEL K: Nahrung 1968. 12 (2) 149—155.] EDELSTEN, D. SARINAS, J., (Applied Microbiology 1968. 248—255.) egy Endothia parasitica törzs rennin termeléséről számol be. Az ismert szakirodalomból megállapítható, hogy megfelelő feltételek mellett igen sok mikroorganizmus-faj képes rennin típusú enzimek bioszintetizálására. Süllyesztett kultúrában legeredményesebben a baktériumfajok alkalmazhatók, mivel ezek technológiai igénytelenségük, rendkívül nagy szaporodóképességük következtében ideális alanyai a süllyesztett tenyésztésnek. A mikrobiológiai szintézis megoldások közül a süllyesztett tenyésztés a legkorszerűbb módszer, melynek különleges nélkülözhetetlen előnye, hogy a fermentáció során végbemenő folyamatok a tenyésztési feltételekkel befolyásolhatók. A pontosan meghatározott és alkalmazott tenyésztési feltételek: pH, optimális hőmérséklet, táptalaj-összetétel, levegőztetési viszonyok lehetővé teszik, hogy olyan fermentlevet állítsunk elő, melyből tejalvasztó aktivitást mutató enzimpreparátum nyerhető. Ez irányú vizsgálataink során megállapítható, 163222