162941. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[D-(alfa-amino-alfa-fenilacetamido)]-3-4-metil-1,3-oxazol-2-Il-tiometil) -cef-3-ém-4-karbonsav előállítására
7 162941 8 „Dean Stark gyűjtőbe". A melegítést megszüntetjük és 1 liter acetont adunk az elegyhez, majd a sűrű szuszpenziót lehűtjük és 30 percen át sós-jeges fürdőben keverjük. A terméket leszűrjük, bőséges mennyiségű acetonnal alaposan mossuk és levegőn szárítjuk. A kitermelés: 191 g, op.:252° (bomlik), [a]22D C o = + 207°(C = l%H2 O). 4-metil-1,3-oxazol-2-il-tiol (2-merkapto-4-metil-1,3-oxazol) (lásd A reakcióegyenlet) 87,6 g (0,6 mól) káliumtioxianát 2 liter abszolút etilalkoholos oldatához (melegítéssel oldva) keverés közben 90 ml koncentrált sóval oldatot adunk szobahőmérsékleten. Az elegyet jégfürdőben hirtelen lehűtjük, azután enyhén szívatva szűrjük. A szűrlethez 44,4 g (0,6 mól) acetükarbinolt adunk és az oldatot 24 órán át forraljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a szilárd maradékot 500 ml forró vízben feloldjuk. Hűtésre 33,3 g termék kristályosodik ki, melynek olvadáspontja 148-150°. Ha az anyalúgot 0°-ra hűtjük, 6,9 g 147-149°-on olvadó második generációt kapunk. A szűrletet szárazra párolva és a maradékot 3:1 arányú víz-etilalkohol elegyből csontszenes derítés mellett átkristályosítva 7,9 g harmadik generációjú terméket kapunk, amely 146-149°-on olvad. Általában a tiol további tisztítása szükségtelen, azonban víz^etilalkohol 3:1 arányú elegyéből átkristályosítható és az így nyert anyag 150-152°-on olvad (irodalmi op.: 150—152°: ezen tiol előállítására szolgáló módszer megegyezik a CK. Bradsher és W.J. Jones jr.: J.Org. Chem. 32, 2079 (1967)-ben leírt módszerrel). 7-amino-3-(4-metil-l ,3-oxazol-2-il-tiometil)-cef-3-fém-4-karbonsav (II képletű vegyület) 13,6 g (0,06 mól) 7-ACA-t 250 ml 0,1 mólos foszfátpuff érhez adunk, melynek pH-ja: 6,4, majd keverés közben 8,4 g (0,10 mól) nátriumhidrogénkarbonátot adunk hozzá. Ezután 5 g (0,055 mól) 2-merkapto-4-metil-l,3-oxazolt adunk az elegyhez és 6 órán át 55°-on keverjük nitrogénatmoszférában. A reakció ideje alatt a termék kikristályosodik, majd a 6 órán át történő melegítési periódus után a sűrű szuszpenziót 22°-ra hűtjük, és a terméket a 7-amino-3-(4-metil-l,3-oxazol-2-il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsavat leszűrjük, hideg vízzel, majd acetonnal mossuk és levegőn szárítjuk. Kitermelés: 4,8 g, op.:210° (bomlik). Az infravörös és mágneses magrezonancia spektrum teljesen megegyezik a várt kémiai szerkezettel. Analízis: C12 Hi 3 0 4 S 2 -re számítva: számított: C=44,06 H=4,05 N=12,84 % talált: C=43,71 H=4,22 N=12,98 % (Karl-Fischer módszere szerinti meghatározással 1,6% vizet találtunk). 7-(D-a-amino-a-fenilacetamido)-3--(4-metil-l,3-oxazol-2-il-tiometü)-cef-3-ém-4-karbonsav (I) 10 4,06 g (0,015 mól) finoman porított D-a-(l-karbometoxi-propen- 2-il-amino-fenilecetsav-nátriumsó 40 ml acetonitrülel készült szuszpenziójához 2 csepp NjN'-dimetilbenzilamint adunk és a sűrű szuszpenziót -10°-ra hűtjük, majd hozzáadunk 1,6 g 15 (0,015 mól) klórhangyasav-etilésztert és 15 perc múlva 14,8 g (0,015 mól) 7-amino-3-(4-metil-l,3-oxazol-2-il-tiometii)-cef-3-ém-4-karbonsav 2,1 ml (0,015 mól) trietilaminnal, 20 ml vízzel és 20 ml acetonitrillel készített jéghideg oldatát heves keve-20 rés közben egy adagban. A reakcióelegy hőmérsékletét 30 perc alatt 0°-ra hagyjuk emelkedni és azután az oldatot nátriumkloriddal telítjük. A szerves fázist elkülönítjük, 20 ml vizet adunk hozzá és az acetonitril fő tömegét vákuumban 20°-on 25 eltávolítjuk. Ezután 6 ml 90 %-os hangyasav és 50 ml metil-izobutil-keton oldatát adjuk a reakcióelegyhez és néhány percig rázogatjuk, majd 0°-ra hűtjük és 2 órán át keverjük. A keletkezett csapadékot leszűrjük és úgy kristályosítjuk, hogy 50 ml 30 10 %-os foszforsavban szuszpendáljuk, az oldhatatlan anyagot leszűrjük és a szűrletet 1 g aktívszénnel („DarkoKB") 10 percig keverjük, újból szűrjük és a szűrlet pH-ját szilárd nátriurnhidrogénkarbonát hozzáadásával 3,5-re állítjuk be. Kitermelés: 540 mg 35 7-amino-(D-a-amino-a-fenilacetamido)-3-(4-metü-l,3-oxazol-2-il-tiometil)- cef-3-ém-4-karbonsav, amely kb. 150°-on bomlik. Az infravörös spektrum a várt kémiai szerkezettel egyezik. Analízis: C2 oH2oN 4 0 5 S2.H 2 0-ra számítva^ 40 számított: C 50,10 H 4,45 N 11,69 H2 o'3,9% talált: C 50,77 H 3,12 N 11,41 H2 0 4,5% A 7-[D-(a-fenilacetamido)]-3-(4-metil-l,3-oxazol-2-il-tiometil)- trietilarninnal, 20 ml vízzel és 20 ml 45 acetonitrillel készített jéghideg oldatát heves majd táptalajjal való hígítás után a következő minimum inhibitor koncentrációkat (M.I.C.) mutatta mcg/ml-ben a feltüntetett mikroorganizmusokkal szemben, mely adatokat egy éjjelen át 37°-on 50 történő inkubálás után határoztunk meg. Az eredményeket négy ismert. vegyülettel összehasonlítva adjuk meg. 55 2. példa: 7-[D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-(4-metil-l,3 -oxazol-2- il-tiometil)-cef-3-ém-4-karbonsav (0,8 mól) ikerionos alakjának vizes szuszpenziójához keverés 60 közben szobahőmérsékleten addig adagolunk 1 n nátriumhidroxid-oldatot, amig tiszta oldatot nyerünk (pH: 10,8). Ezt az oldatot azonnal liofilizáljuk és így nyers szilárd 7-[D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-(4-metil-l,3-oxazol-2- il-tiometil)-cef-3-ém-65 4-karbonsav-nátriumsót nyerünk. 4
