162905. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-(9adenil)-2,3-dihidroxi-vajsav és D-etiro izomerjének előállítáásra
162905 pon folyatjuk át. Ezután az oszlopot 2 liter vízzel mossuk, majd 2 liter 1 n ecetsavval eluáljuk és az eluátumot 50 ml-re bepároljuk. A bepárolt oldatot 3,6X150 cm-es méretű, Amberlite CG— 120 gyantával töltött oszlopon kromatográfiaijuk 50 C°-on. (Oldószer: 3,25 és 4,25 pH-jú nátriumcitrát-puffer oldat, átfolyási sebesség: 480 ml/ óra. A 6300—7280 ml közti frakciókat gyűjtjük össze. A frakciót ismét Amberlite IR—120 gyantán adszorbeáljuk és vizes ammóniumhidroxidoldattal eluáljuk. A betöményített eluátumhoz 70%-os etanolt adunk, s így 0,495 g lentiniacinnátriumsó hemihidrátot, pontosabban 4-(9-adenil-D-(eritro-2,3-dihidroxi-vajsavas nátriumsóhemihidrátot kristályosítunk ki az elegyből. A színtelen világos lemezek 70%-os vizes etanolból történt kétszeri átkristályosítás és szárítás után 266—268 C°-on bomlanak. A szárítást vákuumban kb. 45 C°-on P2 0 5 felett végeztük. [a\l° = +45,5° (c = 1, vízben) A nátriumsó vízben oldódik, etanolban gyengén oldódik, kloroformban, petroléterben vagy más szokásos szerves oldószerben oldhatatlan. 2. A fenti nátriumsóból önmagában ismert módszerekkel az alábbi kristályos anyagokat állítottuk elő: Szabad sav-formájú lentinacin: Op.: 261—263 C°. (Forró vízből történt átkristályosítás után; az anyag víziben gyengén oldódik). Lentinacin-metilészter: Op.: 218—221 C°, színtelen tűk. (Metanolból történt átkristályosítás után). Lentinacin-metilészter-hidroklorid: Op.: 193— 196 C°, színtelen tűk. (Etanol-aceton elegyből történt átkristályosítás után). 2. példa 540 mg adenint feloldunk 60 ml dimetilformamidban, majd az oldathoz 210 mg nátriumhidridet adunk (62,5%-os olajos szuszpenzió formájában) és az elegyet két órán keresztül 70 C°on keverjük. Ezután 700 mg 2,3-O-izopropilidén-D-eritronsav-laktont adunk részletekben az elegyhez, majd 15 órán keresztül 140 +5 C°-on keverjük. Ezután a dimetilformamidot vákuumbepárlással eltávolítjuk az elegyből, a maradékhoz 10 ml 10%-os sósavat adunk és az elegyet 30 percen keresztül 60—80 C°-on melegítjük, majd vákuumban bepároljuk. A párlási maradékhoz 20 ml vizet adunk és 5%-os vizes ammóniumhidroxid-oldattal semlegesítjük. Az oldatot ezután 50 ml H+-formájú Amberlite IR—120 gyantával töltött oszlopon folyatjuk keresztül, majd az oszlopot 5%-os vizes ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. Az eluátumból az oldószert vákuumbepárlássial eltávolítjuk, a párlási maradékhoz kevés vizet aduink és a maradék oldhatatlan adenint szűréssel elkülönítjük. A szürlethez kis mennyiségű nátrium-nidrogénkarbonátot, majd annyi etanolt adunk, hogy a nyers 4-(9-adenil)-D-eritro-2,3-dihidroxi-vajsavas nátriumsó kiikristályosodjon. A terméket vákuumban történő melegítéssel szárítjuk meg. Ilyen módon enyhén sárgásbarna kristályos anyag formájában 470 mg 225—229 C°-on bomló ter-5 méket kapunk. Az anyagot többször átkristályosítva 80%-os vizes etanolból 266—268 C°-on bomló színtelen pikkelyes anyagot állíthatunk elő. 10 3. példa 7.1 g adenin, 254 g nátriumhidrid (62,7%-os olajos szuszpenzió formájában) és 250 ml dimetilformamid elegyét 1,5 órán keresztül 80—85 15 C0 -om melegítjük. A kapott elegyhez hozzáadunk 7,9 g 2,3-O-izopropilidén-D^eritronsavlaktont, majd az elegyet keverés közben 12 órán keresztül 140 + 3 C°-on melegítjük. Ezután az oldószert elpárologtatjuk, a párlási maradékot 20 40 ml vízben oldjuk és a maradék oldhatatlan anyagot szűréssel elkülönítjük. A szűrletet a 2. példában ismertetett módon H+-formájú Amberlite IR—120 gyantával kezeljük, az eluátumot betöményítjük, majd 170—175 C°-on bomló 4-25 (9-adenil)-D-eritro-2,3-izopropilidén-dioxi-vajsavat kikristályosítjuk. A kristályos terméket híg vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban oldjuk, az oldatot elszíntelenítjük és 3%-os hangyasavval kezeljük. Tisz-30 títás után színtelen prizmák formájában 2,0 g 222—224 C°-an bomló savat kapunk. Infravörös spektrum: TMJ ° 3400, 3320, 3180, 1680, 1620,1230, 1210, 1170, 1070 cm-' 35 Ultraibolya spektrum: maximum: 263 mfi (vízben) Magmágneses rezonancia-spektrum: (D2O, NaOD) = 1,89 (s, 1H), 1,95 (s, 1H), 5,70 (q, 2H), 40 5,15 (m, 2H), 8,40 (s, 2H), 5,15 (m, 2H), 8,40 (s, 3H), 8,65 (s, 3H). 100 mg fentiekben kapott kristályos anyagot 30 percen keresztül 10%-os sósavval 60—70 C°-on melegítünk. Ezután az elegy pH-ját 10%-45 os nátriumhidroxid-oldattal 3,5-re állítjuk be, majd a kivált kristályos anyagot szűréssel elkülönítjük. A kristályokat vizes nátrium-Jhidrogénkarbonátoldatbain oldjuk, majd az oldathoz anynyi etanolt adunk, hogy a 4-(9-adenil)-D-eritro-50 2,3-dihidroxi-vajsavas nátriumsó hemihidrát kikristályosodjoin. A termék olvadáspontja 263—265 C° (bomlás közben). Termelés: 80 mg. 55 4. példa 2.2 g adenint 65 ml dimetilformamidban szuszpendálunk, majd a szuszpenzióhoz 375 mg nátriumhidridet adunk, és az elegyet 45 percen ke-60 resztül 60 C°-on keverjük. Ezután 2,16 g 2,3-0-etilidén-D-eritromsav-laktont adunk a szuszpenzióhoz és az elegyet nitrogén atmoszférában 8 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A fenti idő leteltével az elegyet szűrjük, á 65 szürletből a dimetilformamidot vákuumbepár-4
