162334. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rabelomicin és dehidrorabelomicin antibiotikumok előálítására

7 162334 8 szirupot kapunk. Ebből a szirupból 100 g-ot eloszlatunk 3:1:4 térfogatarányú metanol-víz-hexán oldószerrendszer két rétege között. Az elosztást hat darab 500 ml-es választótölcsérben végezzük, tölcsérenként 200 ml felső' és 200 ml alsó* oldószerréteget véve. 12 átvitelt végzünk. A Staphylococcus aureus 209P-vel végzett papírkorongo-. agar-diffuziós próbával felderített biológiailag aktív frakciókat egyesítjük, az oldószert elpárologtatjuk, és a maradékot vízzel telített etilacetáttal ismét extraháljuk. Az etilacetátov kivonatot vízmentes nátriumszulfáton megszárítjuk, és bepároljuk. így 30 g száraz maradékot kapunk. 6. példa Az 5. példában kapott maradékból 10 g-ot 20 ml metanolban oldunk. Az oldatot felöntjük egy mintegy 40 g DEAE-cellulózt tartalmazó, 3,8 cm átmérőjű és 45 cm magas, metanollal átitatott oszlopra. A kifejlesztést metanollal végezzük, és 20 ml-es frakciókat gyűjtünk. A Staphylococcus aureus 209P-vel végzett papírkorongos agar-diffuziós próbával félderített biológiailag aktív frakciókat egyesítjük, é* bepárolva 1 g maradékot kapunk. 7. példa A 6. példában kapott 1 g maradékot metanolban oldva felkenjük 1000 ju rétegvastagságú, 20 x 20 cm nagyságú kovasavgél lemezekre alulról 2 cm magasságban. A lemezeket 10% metanolt tartalmazó benzolal kifejlesztjük. Az Rf=0,5-nél sárga sávként jelentkező rabelomicint lekaparjuk a lemezről és a szilikagélből acetonnal eluáljtik. Az acetonos "eluátumot bepároljuk, és a száraz maradékot kevés metil-10 15 20 25 30 alkoholban oldva a fent leírt módon kovasavgéllemezeken ismét kromatografáljuk. A kovasavgél lemezekről származó biológiailag aktív frakciókat benzol és metanol elegyéből kristályosítjuk. A rabelomicin sárga tűk alakjában kristályosodik. Hozam kb. 70 mg. Olvadáspontja 193 C. 5. példa A dehidrorabelomicin a következőképpen készül: Rabelomicint feloldunk tömény kénsavban, vizet adunk az oldathoz, és etilacetáttal extraháljuk. Az oldószert eltávolítjva nyers dehidrorabelomicint kapunk, és ezt kovasavgélen való kromatografálással és etilacetátból való átkristályosítással tisztítjuk. A sötétzöld termék 204,5-205,0 C*-on olvad. Hozam 100%. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) képletű rabelomicin és annak (II) képletű dehidratált származéka előállítására azzal jellemezve, hogy Streptomyces olivaceus ATCC 21549 mikroorganizmust tenyésztünk süllyesztett aerób körülmények között asszimilálható szénhidrátot és szerves nitrogénforrást tartalmazó vizes táptalajban, majd az így kapott (I) képletű terméket adott esetben (II) képletű termékké dehidratáljuk. és az (I) vagy (II) képletű terméket elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítás! módi;i azzal jellemezve, hogy az (I) képletű termék dehidratálását ásványi savval végezzük. 2 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 740110, OTH, Budapest