162292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proteolitikus enzimek előállítására

9 162292 10 A törzsbe tartozó baktériumok spórátlanok, ill. több spórával rendelkeznek, s így egyik morfológiai csoportba sem oszthatók be. A legvalószínűbb, az, hogy e törzs az alkáliki)s baktériumokhoz tartozik, e baktériumok a Bacillus II. ; csoportjában kapnak helyet (Bergey szerint). Vegetatív pálcák: 0,3-O,5M X 2-5M gyakran hosszú láncokban, szálasak, végük enyhén hegyes és legömbölyített. Gram-negatív. 7,3-as pH-ju agar-agar táptalajon a növekedés kevésbé sarjadzó, mint 9,7-es pH-ju tápagaron. Maximális növekedési hó'mérséklet 5 7 C°. Csak nitrát nitrogénforrást tartalmazó 9,7-es pH-ju glukóz vagy mannitagaron jól nőnek. Keményítő- hidrolízis: pozitív, mérsékelt hidrolizis-zóna. Az alábbi jellemzők közösek az I-IV. sz. fajba tartozó fajtákban: zselatin-hidrolízis: pozitív; kazein- hidrolízis: pozitív, növekedés ferde glükóz-agar táptalajon: ugyanúgy vagy erősebben, mint agar-agaron; növekedés ferde szójabab-agar táptalajon: nagyobb és elmosódottabb, mint agar-agar táptalajon. g Növekedés tirozinos agáron: ugyanolyan, mint agar-agar táptalajon. Folyékony táptalaj: közepes zavarosság, bőséges üledékkel. A táptalajon hártya egyáltalán nem képződik, vagy ha képződik, vékony és törékeny. 10 NaCl tartalmú folyékony táptalaj: jó növekedés 5%-os NaCl-koncentrációnál. 7%-osnál növekedés Acetilmetilkarbinol-termelés: negatív. Nitrátok redukciója nitritekké: pozitív. Anaerob növekedés glükóztartalmu folyékony táptalajon: 15 pH 7,8-on vagy nagyobb pH-nál 14 napig vizsgálva a tenyészetet csak gyenge vagy semmilyen növekedés tapasztalható. (A közeg pH-ját oltás előtt- 9-re állítjuk be.) A feltalálók által végzett rendszertani vizsgálatok alapján a Bacillus-nem I. táblázatban felsorolt tagjait az alábbi II. 20- táblázatban foglaltak szerint lehet osztályozni. 11. táblázat Faj: Változat: Törzs: 1 a C 300. C 301. C 360. C 372. C 374 1 b C 302. C 334 c C 323. C 339. C 352. C 369 d . , C304. C311.C336 II C 335. C 341 III a C 326. C 342 III b C 347.C 350 III c d C 337, C 340 III c d C 338, C 343, C 346, C 348, C 349 III e C 324.C 355 ' III f C353 IV a C 303, C 354, C 357, C 366, C 367, C 371, C 375.C 378 IV b C 351. C 356. C 364. C 376. C 377. C 411 IV c C 358. C 410 V C 365. C 412 VI a C373 VI b C 325. C 413 VII C370 Az idézett törzseket a baktériumok formájának, külső megjelenésének, és a telepek színének megfigyelésére agar-agar táptalajon tenyésztettük, néhányukat azonban glükóz- 70 nitrát-agáron vagy mannitnitrát-agaron növesztettük. E megfigyeléseket azonban nem ismertetjük részletesen, minthogy e megfigyelések fontossága esetleg vita tárgyát képezheti. Az alábbi III. sz. táblázat a baktériumok különböző tulajdondságait foglalja össze. E tulajdonságqk -7S szolgáltak alapul az egy morfológiai csoportba tartozó baktériumok különböző változatokba történő sorolására. Az I. és II. táblázatban leírt fajokat és törzseket proteolitikus enzim termelése céljából tenyésztettük. A tenyésztést rázóedénnyekben és félüzemi méretű mesterséges levegpztetésű tartályokban végeztük. A termelést a jól ismert Anson-féle hemoglobin-módszerrel határoztuk meg. [lásd. Journal of General Physiology, 22, 79-89 (1959)]. A továbbiakban egy Anson-egység azt a proteolitikus enzim 5