162074. lajstromszámú szabadalom • Detergens enzimet tartalmazó mikrokapszula és eljárás ennek előállítására
162074 Ian Company, Franciaország cég terméke). A felsorolt, kereskedelemben kapható készítmények•ben levő proteáz optimális aktivitása a 8—10 pH-tartománybain és az 55—60 °C-os hőméirséklettartoimányban jelentkezik, az enzim azonban széles pH- és hőmérséklettartományban aktív. Ezek az enzimeik különösen előnyösen alkalmazhatók detergems céljaira. Vízoldható szervetlen sóként a kötőanyaggal nem reagáló, és az enzimiet nem dezaktiiváiő vegyületeket alkalmazhatunk. • A sók a vízzel érintkezve fizikai átalakulást szenvednek, pl. oldódnak, duzzadnak, váziadszonpció következtében kiterjednek, bomlanak istb. A szervetlen sók közé tartoznak a vízben oldódó sók, pl. nátriumszulfát, ammóniumszulifát, magnéziurnszulfát, nátriumfoszfát, káliumfoszfát, nátriuimíklorid, káMumklorid, kaiciumkknid, ammóniumklorid és hasonló vegyületek. Kötőanyagként olyan anyagokat alkaimazhatumk, lamelyefcet a kapszuláiban tevő enzim nem bont le. A kötőanyagok közül példaként a vízben oldható terraésaates kötőanyagokéit, így gumi anabieuim-ot, dexitrint és dextaánt, víaber; oldódó cellulóz-i&záratíazékoteait, így metikellulózt, baflboximetilcellujlóat és hidroxietiloellulózt, valamint a vázban oldódó szintetikus kötőanyagokat, így poláakolamiidott és az akrilsiav vagy malemsajvanhiárM kopoMimerjeit említjük meg. A következőkben a detergens enzimet tartalmazó mikrokapszulák előállítását ismertetjük. A detergens enzimet termelő mikroorganizmus szűrt fermentlevében, he.töményíitett fenmenitlevében, vagy a por alakú enzim, vizes oldataiban 'wízoldihíató szervetlen sőt és vízbein oldódó kötőanyagot oldunk- vagy szusapendákunk, és az így kapott oldatot vagy szuszpenziót az enzimet nem károsító hőmérsékleten .porlasztva szárítjuk. A detergens enzimet • vizes oldata formaijában használjuk fel. A felhasznált vizes oldat proteáz-akitivitáslban kifejeaett enzimíakitivltása kb. 10 000—4iOÖ O00 egység/ml labet. Ha a detergens enzimet termelő imrikroorgairíizm'us szűrt fermentlevének enzimakitivítása túl kis érték, a fermenitlevet megfelelően betctaényítj.ük. Ha por .alakú enzimből • indulunk, ki, az enzimből megfelelő enziimiaktiwtáaű vizes oldatot állítunk elő. A vizes- enaimoldlat eozimiakitivitásáit a mikrokapszüläk és ,a detergens elegyítésével kapott mosószereknek megfelelő mzámakitivitásit biztosító értékre állatjuk be. A .porlasztva szárításra kerülő oldathoz a telítettség eléréséhez szükséges mennyiség 20— 90%-ámak megfelelő mennyiségű vízoldható szervetlen sót adunk. A kötőanyagot a porlasztva szárításra kerülő oldat térfogatára számított 1—10 vegyes % mennyiségben, és az összes szilárd .anyag '(azaz enzim + szervetlen só ~f- kötőanyag) súlyára számított 3—35%hbän adjuk az elegyhez. Az adalékanyagok mennyiségének megfelelő megválasztásával 20—'60 vegyes % szárazanyagot tartalmazó oldatot vagy szuszpenziót állítunk elő. .Ez a koncentráció a por10 15 20 lasztó-szárító berendezéstől, és a porlasztva szárítás hőmérsékletétől függően változhat. Víziben • gyorsan felnyíló kapszulák előállítása érdekében a lehető legkisebb mennyiségű kötőanyagot ad-1 juk .a .porlasztva szárításra kerülő oldathoz. Más szavakkal, a -mdkrokapszula annál könnyebben nyílik fel víziben, minél nagyobb mennyiségű vízoldható szervetlen sót tartalmaz, ezzel egyidejűleg azonban a kapszula szilárdsága csökken. A kapszula kötőanyag-tartalmának növelésével a kapszula .szilárdsága is növekszik, ugyanakkor azonban vízben nehezebben felnyíló kapszulákat kapunk. Ha a kötőanyag viszkozitása túl nagy érték, a porlasztva szárítás, egyes esetekben lehetetlenné válik. Megfelelő minőségű terméket rendszerint kis viszkozitású kötőanyagok felhasználásával állíthatunk elő. A porlasztva szárításihoz bánmilyen erre alkalmas berendezést, pl. centrifugális .porlasztót vagy porlasztófejet használhatunk. Tekintettel arra, hogy az enzimek nagy része általában. 60 °C körüli, vagy annál magasabb hőmérsékleten denaiturálódik, a szárítást rendszerint szobahőmérséklet körüli 'hőmérsékletien végezzük. A nrikrakapszulát azoniban bármely olyan hőmérsékleten szánthatjuk, amelyen a benne levő enzim lényegében nem denaiturálódik. Az így kapott makrokiapsizulákban az enzimet a vízoldható szervetlen só párásnak és a kötőanyagnak a keveréke vonja fee. A kötőanyag elsősorban a -bevont külső .részén halmozódik fel, míg a vízoldható szervetlen sók legnagyobb része a mikrokapszula centrális részén található. A kapszuláik gőmtoailakiúak, átmérőjük kb. 1-5—1130 jx. A kapszulák összetétele pl. a következő lehet: enzim i0,ö—-40 aűiy^/s Na2 S0 4 20—i50 súly% gumi arabicum 3—85 &úly% ' A má'krokiapszula felületét a kötőanyag, védi, így a kötőanyag megóvja az enzimet a nedvesség hatásától. Tekintettel arra, hogy a detergens egyéb komponensei nem • érintkeznek közvetlenül 'a kapszulába zárt enzimmel, a kapszulába zárt enzim hosszú ideig megtartja aktivitásait. Amirat a mikifokapsaula. vízzel érintkezik, a -benne levő vízaldíhaífcó szervetlen sók hatására azonnal felnyílik és szétbomlik, ós a detergens enzim könnyen feloldódik a vízben. A találmány szerinti mikrokaipszulákat és előállításukat az alábbi példákban részletesen ismertetjük. A 'példákban megadott enzimaktíviitós-értékeket a következő módszerekkel határoztuk meg: •I. meghatározás: Rroteáz-akitiviitás meghatározása : Valamennyi termék pjxxteáz-aktrvitását Kuoiítz módszerével határoztuk meg [Kunitz: M.. J, Gan. Physiol. 30, 29 I(I1947)1. Az'enzimet az aktivitás kifejezése szempontjaiból optimális pílértéken {pH = 8,0 .vagy ,10,0) 37 °C-on, 20 percig 1%-os kazein-oldattal hoztuk érintkezésbe. 30 35 40 50 3