161982. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy antibiotikus hatású vegyület, az axenomicin D előállítására

161982 1. Táblázat Glükóz koncentráció % axenomicin D y/iml Adagolás Vegyület mg/kg Gyógyulás % . 10 1350 12 2050 axenomicin D 2,6 65,0 axenointón D 5,0 100,0 Az axenomicin D akut toxáiciitása egereken, orálisan adagolva, LD50 értékben kifejezve 200 mg/kg. A következő példák a találmányt szemléltetik. 10 15 2. példa: A tenyésztést 5 Mteres fermenitorokban az 1. példáiban megadott körülmények közt folytatjuk le. A termelő tápoldat 12% glükózt és kis menynyiségű káláumditódrogénifoszf átot tartalmaz. Eredmények a következők: 1. példa: 500 ml tápoldatot 2000 ml-es lomlbikban, 120 °C-on, 20 percig sterilizálunk. Az előoltásra szolgáló tápközeg összetétele: Káliumdihidiriagén-foszfát % axenomicin D y/lml dextrin 4,0 % kalciuimkadbonát 0,5 % kukoricalekvár 1,0 % kazein lyO %, acmmómuiniszulfát 0,2 % cUkáli'Umfoszfáit 0,01% csapvízzel feltöltve ,100 %-ira. A lombikot IS napos buirgonya-glükóz-agar 4 ferde tenyészetének mosott ápóraszuszpenziójávai beoltjuk, 28 °C-on, fcjb. 48 óra hosszat, 120 ford/perc sebességgel rázva, rázógépen inkubáljuk. Ebből a tenyészeitből 50 ml-<t használunk az előbbi módon elkészített 3 1 fermentlevet tartalmazó 5 l-es üveg fermentor beoltására. A fermentlevet percenként 0,7 üter/liiter tápoldat levegőibevezetéssel, 24—08 óra hosszat, 27—>28 °CHon ihajlított lapátú tunbókeverővel 500 ford/ /perc sebességgel kevarjiük. 3 h tápoldatokait tartalmazó 5 l-es üveg fermentorokat annyi oltólével oltunk be, mely a termelő tápanyagoldat térfogatának 5%-t teszi ki. A vizsgálathoz két termelő tápoldatot készítünk, melyek összetétele a következő: glükóz (10, •••áll. 12% szójaliszt 3-0 % kukonicalakvár 2,0 % kaloiiumkartjonát 1,0 %i nátriuimklorid 0,25% szójaolaj 0,5 %! csapvízzel feltöltve 100 %-ra. 20 25 30 35 40 45 50 55 0 0,005 0,01 0,05 2060 2040 1485 1005 3. példa: Az 1. példában megadott eljárással 5 literes f errnentorokiban lt2i°/o glükózt tartalmazó termelő tápoldatban, 500 és 600 ford/perc keverési sebesség, {felvett teljesítmény 3,6, ill. 4 watt) és percenként 1 liter, ill. 1,7 liter/liter tápoldat levegőfoevezetés alkalmazásával végezve a tenyésztést, a következő eredményt kapjuk: Keverés Levegőbevezeités axenomicin D ford/perc Mter/liter/perc y/ml 500 1,0 2410 500 1,7 3050 350 Ifi 3630 650 1,7 4100 4. példa: 80 literes rozsdamentes acél fermentorban az 1. példa szerint készített, 50 liter eióoitásra szolgáló tápoldatot mérünk, melyet az 1. példa szerint 2000 ml-es lombikban elkészített 500 ml tenyészettel beoltunk. 24 óra hosszat tartó keveréssel és levegőztetéssel végzett inkubációval megfelelő mennyiségű micéMuan képződik. Ezzel a tenyészettel beoltjuk az 500 literes rozsdamentes acél fermentorban elkészített 300 liter alábbi összetételű tápoldatot: A fermentlevet két db 6 hajlított lapátú turbókeverővel 500 ford/perc sebességgel (felvett teljesítmény 3,5 watl/líter) és percenként 1 liter/ /liter tápoldat levegőbevezetéssel keverjük. A T?6 óra hosszat tartó fermentálás a következő termelést eredményezi: 60 65 glükóz ilS % szójalászt 3,0% kukariöalekivár 2,5 % kalciumka'rtbonát il,2 % nátriumklordd 0,25% szójaolaj 0,6 % csapvízzel feltöltve 100 %-ra. 2