161849. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A16886 antibiotikumok előállítására

161849 15 7. példa: Az egyik meghatározási módszer szerint az A16886 antibiotikumot egyszeri dózisban adagoltuk, két-két, Aspiculuris tetraiptera-val. és Syphacia ovelata-val (tűférgekkel) fertőzött egérbe. Az adagolt mennyiség 500 mg volt, az egyes állatok 1 kg testsúlyára számítva, melyet szuszpendálószerként 0,125% metilcellulózt tartalmazó fiziológiás sóoldatban adtunk be. A mérés során hat Aspiculuris tetraptera-val és Syphacia obvelata-val fertőzött egeret használunk. Mindkét csoportot az adagolás után 48 órán át normál laboratóriumi körülményék között tartjuk. Ezután minden egeret felboncolunlk és megállapítottuk a jelenlevő tűférgek jelenlétét és számát, melyet a következő táblázatban ismertetünk. IX. táblázat A tűférgek száma állatonként (átlagos érték) Aspiculuris Syphacia tetraptera obvelata Kontroll A1688 6 antibiotikummal kezelt (dózis 500 mg/kg) 8. példa: 35 41 4j5 0,5 Egy másik kísérlet során az A16886 antibiotikumot standard egértáplálékkal keverve kezelt eleségsorozatot állítunk elő, amely az A16886 antibiotikumot 0,005, 0,01 és 0,05 súlyszázaléknyi mennyiségben tartalmazta. A táplálékot különálló egércsoportok etetésére használtuk, mindegyik csoportban 5 egér volt. Körülbelül 24 órával a táplálás kezdete után az egereket Ascaris lumbricoides var. suum-mal fertőztük meg. Egy másik, 5 tagú. egércsoportot nem kezelt táplálékkal etettünk, ezek szolgáltak kontrollként, és ezeket az állatokat ugyanúgy és ugyanabban az időben fertőztük, mint az előző csoportot. Minden csoportot saját megfelelő táplálékával etettünk, és 10 napig normál laboratóriumi körülmények között tartottuk, majd felboncoltuk azokat, tüdejüket megvizsgáltuk és megállapítjuk az (Ascaria lumbricoides var. suum által okozott sérüléseket, és, ha találhatók, azok számát. A táplálékok A16886 antibiotikum szintjét és az egyes csoportok állatonként! tüdőelváltozásainak átlagos számát a következő táblázatban adjuk meg: X. táblázat Csoport A tüdőelváltozások átlagos száma csoportonként 10 20 25 35 40 50 1*6 Csoport A tüdőelváltozások átlagos száma csoportonként A16886 antibiotikum 0,005% koncentrációban A16886 antibiotikum 0,01% koncentrációban A16886 antibiotikum 0,05% koncentrációban 15 9. példa: 0,166 0.33 0,0 Egy másik kísérletet végzünk, melynek során a 8. példával leírt eljárást követtük, csak az értékeket változtattuk meg. A következő eredményeket kaptuk: XI. táblázat Csoport A tüdőelváltozások átlagos száma csoportonként Kontroll 30 A16886 antibiotikum 0,0005% koncentrációban A16886 antibiotikum 0,001% koncentrációban A16886 antibiotikum 0,1% koncentrációban 2,2 1,2 0,7 0,2 Kontroll 2,0 Az A16886 antibiotikumot egy újonnan izolált és eddig le nem írt törzzsel állítjuk elő, melyet Dél-Amerikából származó talajmintából nyertünk. A törzset a fenti talajmintákból úgy izoláltuk, hogy a talajmintákat steril desztillált víz-45 ben szuszpendáltuk. és a szuszpenziót agar táptalajra oltottuk le. Az agarlemezeket több napig 25—35 °C hőmérsékleten inkubáltuk. Az inkubációs periódus végén az A16886 antibiotikumot termelő törzs telepeit steril platinakaccsal ferde agárra oltottuk át. Az agar csöveket inkubálva elegendő mennyiségű inokulumot állítottunk elő az A16888 antibiotikum termeléséhez. A találmány szerint A16886 antibiotikum 55 termelésére használt Actinomyces-t nehéz volt osztályozni a Streptomyees rendbe, atipikus sporofór morfológiája miatt. A sejtfal analízise azonban kimutatta, hogy a tenyészet a Streptomyees nemzetség valamilyen faja lehet. Ennek oo megfelelően a törzset újként kezeltük és a Streptomyees clavuligerus nevet adtuk neki. A törzs jellemzően rövid, szimpodiálisan elágazó, léghifákból álló hálózatot képez, amely adott esetben spórákká osztódik. Rövid, bunkó«s szerű oldalelágazások keletkeznek, melyek rend-8