161849. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A16886 antibiotikumok előállítására
161849 Az A16886 antibiotikum és sói gátolják mind a gram-pozitív, mind a gram-negatív baktériumok növekedését. Azokat a szinteket, melyben az A16886 antibiotikum, mint az I és II faktor részben tisztított ammóniumsójának keveréke gátolja a példaként felhozott organizmusok növekedését, az I. táblázat mutatja. A gátló szinteket agar-hígításos vagy táptalaj-hígításos módszerrel állapítottuk meg, melyeket a táblázatban „a.h", illetve „t.h." rövidítéssel jelölünk. Az agarhígításos módszernél, a vizsgálandó organizmust olyan agar-lemezsorozatra szélesztettük, melyek az A16886 I és II faktorának monoammóniumsóit különböző koncentrációjában tartalmazták, és így határoztunk meg az 'agar-szubsztrátban azt a mcg/ml-Jben (inilkrogramm/ml-ben) kifejezett minimális koncentrációt, amely 48 órás időtartamban (növényekre patogén organizmusok esetén 72 óráig) meggátolta az organizmus növekedését. Táptalaj-hígításos vizsgálat során különböző koncentrációjú A16886 I és II faktor monoammóniumsót tartalmazó csősorozatot inkubáltunk a tesztorganizmussal, így állapítva meg azt a meg/ml-ben kifejezett minimális koncentrációt, amely kb. 20 órán át gátolja az organizmusok növekedését. 10 15 20 25 8 I. táblázat Tesztorganizmus Gátló koncentráció mcg/ml-ben Escherichia coli 0127 0,39 t.h. Proteus PR—6 0,78 a.h. Salmonella typhimurium S—4 0,78 a.h. Klebsiella sp. K—1 1,56 a.h. Pseudomonas sp. X239 >100 a.h. Salmonella typhosa T—63 0,78 t.h. Staphylococcus aureus 3055 25,00 a.h. Streptococcus pyogenes C203 6,25 a.h. Bacillus Vilbtilis X12.il 1,56 a.h. Staphylococcus aureus 3150 50,00 a.h. A fenti vizsgálatok során lószérumkötődés egy esetben sem volt észlelhető. Mint az a fenti táblázatból látható, az A16886 antibiotikum az I és II faktor monoammóniumsóinak keverékeként gram-pozitív és gram-negatív baktériumok ellen egyaránt aktív. II. táblázat Organizmus I faktor ^g/lemez 30 10 5 2,5 1,0 0,5 30 II faktor ,"g/lemez 10 5 2,5 1,0 0,5 Escherichia coli 0127 Escherichia coli EC 25 Proteus sp. PR6 Proteus sp. PR7 Salmonella typhosa SA 12 Salmonella typhosa SA 16 Klebsiella aerotacter KA 14 Klebsiella aerobacter KA 25 Pseudomonas sp. Ps 24 Pseudomonas sp. Ps 30 Staphylococcus aureus 3055 Staphylococcus aureus 3074 25,6 20,7 18,6 15,9 12,7 8,4 19,7 15,9 12,9 9,4 0 0 19,6 15,1 12,5 9,1 0 0 11,9 7,7 0 0 0 0 23,2 19,0 16,7 13,6 9,9 0 22,2 16,7 13,6 10,4 0 0 14,0 10,4 0 0 0 0 7,1 0 0 0 0 0 27,2 22,8 19,9 16,9 11,3 8,0 23,8 18,7 15,6 12,3 7,5 0 24,2 19,6 16,2 13,1 9,3 0 19,3 13,4 11,0 7,5 0 0 23,0 18,8 15,4 11,4 7,6 0 20,1 13,7 10,8 0 0 0 22,1 15,8 12,3 9,0 0 0 15,6 10,1 7,4 0 0 0 23,0 18,2 15,7 13,2 10.Í 0 20,2 15,4 12,3* 9,3* 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12,4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10,1 0 0 0 0 0 Telepek gátló zóna nélkül Meghatároztuk az A16886 antibiotikum baktériumellenes hatását Bauer—Kirby lemezdiffuziós módszerrel is. A mérést az elválasztott I és II faktorok monoammóniumsóira végeztük. A bizonyos antibiotikum-koncentrációknál keletkezett mm-ben kifejezett gátlási zónákat a 60 II. táblázatban tüntetjük fel. Az A16886 antibiotikum és sói in vivo is aktívak egy sor fenti organizmusra, ezért az ilyen organizmusok által háziállatokban okozott fer- 65 tőzések gyógyítására alkalmasak. Emlősökre toxicitása kicsi, az LD50 -érték 5 g/kg-nál nagyobb és 10 patkányba napi 350 mg/kg szubkután dózisban 14 napon át adagolva egyetlen elpusztulás vagy jelentéktelen toxicitásra utaló jel sem volt megfigyelhető. Az A16886 antibiotikum az I és II faktor monoammóniumsójának keverékeként a következő organizmusokkal fertőzött egereken a következő ED^-értéke^ ket mutatta: 4
