161732. lajstromszámú szabadalom • Eljárás korrinvázas vegyületek fenol-formaldehid gyantakomplexeiből történő kinyerésére

161732 13 14 dehid gyantával leválasztott szulfitOHkofoalamin-fenol-formaldehid gyantakomplexhez, mely öszszesen 158 mg szulfito-kobalamint tartalmaz, fénytől védett körülmények között 240 ml leoldó folyadékot adunk. A leoldó folyadékot úgy készítjük el, hogy 400 ml 0,1% NáHS03-at tartalmazó vizes oldat pH értékét jégecettel 4,2-re állítjuk, majd 100 ml acetont öntünk hozzá. Ebből 240 ml-t öntünk a rózsaszínű csapadékhoz. Két óráig tartó keverés után szívószűrőre öntjük és a szűrőn maradt anyagot a maradék oldószereleggyel gondosan átmossuk. A szűrletként nyert sötétvörös oldathoz 40 súly%, kb. 200 g ammonszulfátot adunk és a továbbiakban a 9, példában megadott módon járunk el. A nyert tömény oldat szulfito-kobalamin tartalma összesen 121 mg. Azonosságát papírlkromatográíiásan, cianidmentes közegben, szulfito-kobalamin standarddal kapott egyező elmozdulása alapján igazoljuk, tartalmi meghatározását pedig a British Pharmacopoeia 1968 "Hydroxocobalamin" c. cikkelyében (475. oldal) szereplő „Coloured impurities" cím alatt leírt módszer szerint végezzük. 12. példa 63,5 g száraz és porított, kromatográfiás elválasztásból fenol-formaldehid gyantával leválasztott • szulf ito-koibalaimin-f enol-f ormaldehid gyantakomplexhez, mely összesen 9,398 g szulfito-kobalamint tartalmaz, fénytől védett körülmények között 200 ml 1:2 térfogatarányú, előzőleg vízmentesített krezol-széntetraklorid elegyet adunk. Fél óráig tartó keverés közben a komplex a krezolj

széntetraklorid elegyben túlnyomórészt feloldódik. A keveréket szűrőpapírral fedett szívószűrőre öntjük, majd a visszamaradó szilárd anyagot leszívátás után újból elkeverjük 200 ml 1:2 térfogatarányú, előzőleg vízmentesített krezol-széntetraklorid eleggyel. Leszívátás után a szűrési maradékot 100 ml 1:4 térfogatarányú, ugyancsak vízmentesített krezoLszéntetraíklorid eleggyel mossuk ki. A szűrleteket egyesítve rázótölcsénbe öntjük, majd a szűrőről és a szívópalackból 250 ml vízmentes széntetrakloriddal a,maradék színezéket a rázótölcsénbe mossuk. A mintegy 750 ml 1:4 térfogatarányú krezolszéntetrafclorid oldatot- összerázzuk 250 ml 0,3% NaHS03-at tartalmazó, jégecettel pH

5 értékre állított vizes mosófolyadékikal. Az alsó, sötétzöldesibarna színű szerves oldószeres fázist leengedjük, inajd a piros színű vizes fázist 50 ml 1:4 térfogatarányú krezol-széntetraklorid eleggyel öszszerázzuk, hogy a visszamaradt színezéket a vizes fázisból eltávolítsuk. Az egyesített krezol-széntetrakloridos oldathoz 300 ml széntetrakloridot, 600 ml acetont és 200 ml deszt. vizet adunk. Összerázás után az elegy két fázisra válik szét. A felső sötétvörös színű vizes fázis töményen tartalmazza a hatóanyagot. A két fázis elválasztása után az alsó szerves oldószeres fázist újból kivonatoljuk 100 ml deszt. vízzel. Az egyesített tömény vizes oldatot szálmentes-5 re szűrjük és kétszeres térfogat acetont öntünk hozzá. Ezután keverés közben addig adagolunk hozzá cseppenként tömény ammóniát, míg az oldat meggyvörös színűvé nem válik. Ez kb. p#8 értéknél következik be. A további hatszoros tér-10 fogatú acetont ezután úgy ladagoljuk, hogy azt a zavarosodás kezdetéig öntjük, majd a többit kis részletekben, az újabb zavarosodás megjelenéséig adjuk hozzá. Az oldatot ezután 10 C°-ot meg nem haladó 15 hőmérsékleten fénytől védett helyen «másnapig állni hagyjuk. A kivált kristályokat zsugorított üvegszűrőn összegyűjtjük, majd aoetonnal mossuk és levegő átszívatásávail szárítjuk. A kristályokat 60 ml deszt. vízben enyhe me-20 legítés közben feloldjuk és az átkristályosítást 480 ml acetonnal végezzük el. A kristályos anyag nedvességtartalmát 12%-ot meg nem haladó értékre állítjuk be. 25 Nyeredék: 7,9 g kristályos szulfito-kobalamin. Azonosságát papírkromatográfiásan, cianidmentes közegben, szulfito-kobalamin standarddal kapott egyező elmozdulása alapján igazoljuk, tartalmi 'meghatározását pedig a Britisch Phar-30 macopoeia 1968 „Hydroxocobalamin" c. cikkelyében (475. oldal) szereplő „Coloured impurities" cím alatt leírt módszer szerint végezzük. 35 13. példa 7,6 g száraz és porított, összesen 119 mg rodanáto-kobalamint tartalmazó, kobamid származékok kromatografálásából fenol-formaldehid 40 gyantával leválasztott rodanáto-kobalamin-fenol-formaldeihid gyantakomplexhez 21 ml 1:2 térfogatarányú, előzőleg vízmentesített xilenolkloroform elegyet adunk. Fél óráig tartó keverés közben a komplex a xilenol-klorof orm elegy-45 ben túlnyomórészt feloldódik. A keveréket szűrőpapírral fedett szívószűrőre öntjük, majd a visszamaradó szilárd anyagot leszívátás után újból elkeverjük 21 ml 1:2 térfogatarányú előzőleg vízmentesített xilenol-kloroform eleggyel. 50 Leszívátás után a szűrési maradékot 12 ml 1:4 térfogatarányú, ugyancsak vízmentesített xilenol-kloroform eleggyel mossuk át. A szűrletet egyesítve rázótölcsénbe öntjük, majd a szűrőről és a szívópalackból 56 ml víz-55 mentes kloroformmal a maradék színezéket rázótölcsérben mossuk át. Ezután 60 ml acetont és 25 ml deszt. vizet adunk az elegyhez és összerázzuk. Rövid idő múlva az elegy két fázisra válilk szét, A felső 60 vizes fázis töményen tartalmazza a hatóanyagot. A két fázis elválasztása után az alsó szerves oldószeres fázist újból 25 ml deszt. vízzel kivonatoljuk. Az egyesített vizes fázist fél térfogat kloro-65 farmmal kirázzuk, az elvált vizes oldatot 2 n 7