161653. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkalokus proteáz mikrobiológiai előállítására

7 161653 8 ammóniumszulfát-oldattal kevertük, és e keveréket kisózásnak és dialízisnek vetettük alá. A dializáit oldatot „Duolite A-2" gyantával (vagy anioncserélő gyantával) töltött oszlopon engedtük át, a színezőanyagok eltávolítása végett. A színtelenített oldatot oszlopkromatografálásnak vetettük alá, karboximetileellulózt és „DEAESephadexet" használva, majd gélszűréssel, Se» phadex-75 alkalmazásával elkülönítettük a nyers proteázt, ezután a nyers proteázt acetonos kicsapásos eljárással kezeltük, a tisztított proteáz kinyerése céljából. A tisztított proteázt szárítottuk és lemértük; 47 mg szárított proteázt kaptunk, amelynek aktivitása 4,110 egység/mg volt. 2. példa Bacillus licheniformist 7 pH-értékű tápoldat 1 literében inkubáltunk, amely szójababpogácsának 4%-os alkáli oldattal történő zsírtalanításakor kapott extraktumot, és 1% oldható keményítőt tartalmazott, és a Bacillus licheniformist 35 °C-on, 40 órán át, levegőztetés és kevertetés közben Jar-erjesztőedényben tenyésztettük. A kapott tápoldat tartalmazta az alkalikus proteázt, aktivitása 4,400 egység/milliliter volt. E tápoldatot az 1. példában leírt módon kezelve, 1,07 g tisztított proteázt kaptunk; a szárított proteáz aktivitása 4,110 egység/mg volt. 10 15 20 Szabadalmi igénypont Eljárás alkalikus proteáz mikrobiológiai előállítására, azzal jellemezve, hogy az American Type Culture Collection intézetnél ATCC 21471 sz. alatt letétbe helyezett Bacillus licheniformis törzshöz tartozó baktériumokat valamely szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó, célszerűen levegőztetett folyékony táptalajon tenyésztünk, és a közegben felgyülemlett alkalikus proteázt célszerűen a fermentációs ter-r mék szűrése vagy centrifugálása, betöményítése a hatóanyag-frakcionálással való elkülönítése és szárítása útján kinyerjük. < 2 lap rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. Győr-Sopron megyei Nyomdavállalat 74.337