161526. lajstromszámú szabadalom • Enzimtartalmú készítmény és eljárás előállításukra

161526 13 14 0,016 mólos TRIS pufferben o-nitrofenil-béta-D-galaktopiranoz szubsztrátum felhasználásával (pH = 7,6) határoztuk meg. A szálba beépített enzim katalitikus aktivitása „rj%" kb. 25% az enzimoldat aktivitásához képest. 9. példa: Ureázt tartalmazó szálat az alábbi módszerrel készítünk: 58 g „Urease active meal B. D. H." vizes kivonatát állítjuk elő az 1. példa szerint és azt 290 g, 25%-os VAGH elnevezésű vinilgyanta (Union Carbide gyártmánya, 90% vinilklorid, 10% vinilacetát kopolimerje, amely 70%-ban élszappanosított) metilénkloridos oldatához adjuk. Az emulziót 80 mikron átmérőjű, 48 nyílású fonófejen keresztül megfonjuk, amelyet petrolétert tartalmazó koaguláló fürdőbe (a petroléter foírpontja 40—70 °C) merítünk. A képződött szálat koagulálása után 11 méter/perc sebességgel összegyűjtjük, másfélszeresére nyújtjuk, majd egy keresztcsévelőgépen összegyűjtjük. A szálba beépített enzim katalitikus aktivitása kisebb mint az 1. példa szerint előállított terméké. 10. példa: Ureáztartalmú szálat állítunk elő, szerkezeti alapként etil-cellulóz polimer (Ethocel Medium Dow) felhasználásával. A szálat az alábbi módon készítjük: 50 g 1. és 9. példa szerint elkészített ureáz vizes kivonatát 100 g 5%-os metilénkloridos Ethocel-oldathaz adjuk. Az így kapott emulziót 294 g, 15% Ethocel koncentrációjú metilénklorid-oldathoz adagoljuk. A képződött keveréket 80 mikron átmérőjű 10 nyílással rendelkező fonófejen nedvesen megfonjuk, koaguláló fürdőként petrolétert (forrpontja 40—70 °C) használunk. Az előállított szál katalitikus aktivitása kb. 16%-os az ureázoldathoz képest. 11. példa: Papaintartalmú háromfajta cellulóz-triacetát szálat különböző enzimkoncentrációkkal az alábbi módszerrel készítünk: „Papain" enzimatikus készítmény (Worthington Biochemical Co.) 20 ml vizes oldatát 200 g, 5%-os metilénkloridos cellulóz-triacetát-oldathoz adjuk. Az egyes szálaknál alkalmazott enzimkoncentrációt az alábbi 4. táblázatban tüntetjük fel. Az így kapott emulziót 354 g, 14%-os metilénkloridos cellulóz-triacetát oldathoz keverjük. A keverék emulgálásának elősegítése céljából azt 1 óra hosszat mechanikailag keverjük, majd 2 óra hosszat állni hagyjuk. A kapott emulzió optikai mikroszkóppal meghatározva kellő diszperzitású. A fenti módszerek szerint nedves megfonásnak vetjük alá, kicsapó fürdőként szobahőmérsékleten tpluolt használunk. Az egyes szálfajtákba beépített enzim katalitikus aktivitását a szabad enzimmel a következő 4. táblázatban összehasonlítjuk. 10 15 4. táblázat mg enzim/g szál Aktivitás % 0,5 16,7 1,33 12,4 11,7 8,1 Az aktivitást benzoil-arginin-etilészter szubsztrátum felhasználásával és a képződött sav potenciometrikus titrálása útján határozzuk meg. 20 12r

példa: A 11. példa szerinti műveleti körülmények mellett cellulóz-triacetát szálakat készítünk különböző enzimek felhasználásával. A kapott ered-25 menyeket az alábbi 5. táblázatban ismertetjük: 5. táblázat 35 40 45 50 Enzim mg enzim/g szál Gluko-amiláz (Diasyme por, Takamine Miles Chemical Co. 10 Karboxi-peptidáz A („Carboxy Peptidase" Worthington Bio- 0,42 chemical Co.) Aktivitás %' (szabad enzimhez képest) 11 (10 s% térfogat maltózszubsztrátum) 10 (0,01 mólos hippuril-L-fenilalanin szubsztrátum, TRIS pufferben, 7,5 pH) 13. példa: Poli-gamma-etil-L-glutamátból kloroformban 55 8%-os oldatot készítünk. 50 g oldathoz erős mechanikai keverés közben 1 ml „Invertase concentrate B. D. H." enzimatikus készítményt adunk. Az így kapott emulziót 80 mikron átmérőjű 60 10 nyílással rendelkező fonófejen nedves megfonásnak vetjük alá, koaguláló fürdőként 20—30 °C közötti hőmérsékleten n-hexánt használunk. A kapott szálak enzimatikus aktivitása vákuumban történő szárítás után 18% a szabad enzim-65 hez képest. 7