161475. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bradikinin szintézisére
9 dos-csővel és keverővel ellátott lombikba öntjük, hozzáadunk 2,17 g (2,7 mmól) Z-Arg(N02 )-Pro-Pro-OPCP-t és 0,38 ml (2,7 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet éjszakán át keverjük, majd az oldatot még egy napon át szobahőmér- 5 sékleten állni hagyjuk. Ezután az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot eldörzsöljük 1 mólos citromsav-oldattal, szűrjük, citromsav-oldattal és vízzel mossuk. A nyersterméket feloldjuk 3—4 ml etanolban és éterrel 10 kicsapjuk. A csapadékot szűrjük és éterrel alaposan kimossuk, majd szárítjuk, 2,52 g (65%) védett bradikinint kapunk. R * 0,15. Op.: 183— 185°. [a]?,0 — 47° (c = 2, metanol). 15 H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Arg-OH. 3 AcOH (XIX, bradikinin-triacetát) előállítása 2,32 g (1,62 mmól) védett bradikinint (XVIII) 50 ml 80%-os ecetsavban hidrogénezünk 1,0 g 20 palládiumos csontszén jelenlétében. A hidrogenolízis előrehaladását elektroforézissel követjük (a részben védett termékek kevésbé mozdulnak el, a teljesen védett bradikinin az origóban marad). A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, 25 az oldatot vákuumban bepároljuk (kb. 1—2 mire), majd acetonnal hígítjuk. A kivált anyagot kiszűrjük, acetonnal kimossuk és szárítjuk. 1,88 g bradikinin-triacetátot kapunk (96%). R^ 0,5 {n-propanol-víz 2:1 elegyben). E'4'' 8 0,62 (0,1 mó- 30 los piridin-acetát, pH 5, feszültség 35 V/cm). Mű— 65° ( c=1 > 1 N ecetsavban). Minimális hipotenzív dózis 2,5 y/kg; dietilstilbösztrollal szenzibilizált patkányuteruszon a standard készítményhez viszonyított relatív hatékonysága 35 100%. 2. példa Z-Arg/N02 (-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe- 40 -Arg/N02 )-ONB (XVIII, védett bradikinin) előállítása Kalcium-kloridos-csővel ellátott 100 ml-es lombikban 2,65 g (2,7 mmól) BOC-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg/N02 )-ONB-t (X) leöntünk kb. 15 45 ml trifluorecetsavval és 15 percig rázogatjuk. A teljes oldódás után és a pezsgés megszűntével a trifluoracetátot éterrel (kb. 50 ml) kicsapjuk, szűrjük, éterrel mossuk és kálium-hidroxid és kénsav mellett szárítjuk. A száraz trifluor-ace- 50 A kiadásért felel: a Közgazdasági 10 tatot feloldjuk 10 ml absz. dimetil-formamidban, kalcium-kloridos-csővel és keverővel ellátott lombikba öntjük, hozzáadunk 0,38 ml (2,7 mmól) trietil-amint, 1,48 g (2,7 mmól) Z-Arg (N02 )-Pro-Pro-OH-t (XVI), és 2,15 g (8,1 mmól) pentaklórfenolt. Ezután a reakcióelegyet sós jéggel 0° alá hűtjük, és 0,67 g (3,24 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, majd szobahőmérsékleten keverjük másnapig. A diciklohexil-karbamidot másnap kiszűrjük, átmossuk dimetilformamiddal. A szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 1 N citromsavoldattal eldörzsöljük, szűrjük, 1 N citromsavoldattal és vízzel mossuk. A nyersterméket 4 ml etanolban feloldjuk és éterrel kicsapjuk a védett nonapeptidet. A csapadékot kiszűrjük, alaposan kimossuk éterrel, majd szárítjuk. 2,7 g (70,5%) védett bradikinint kapunk. R4 0,15—0,2. Op: 181—184°, [a] 2 °— 45,8° (c = 2; metanolban). Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás bradikinin szintézisére, azzal jellemezve, hogy a szintézist a szekvencia védett 1—3 és 4—9 fragmensének kapcsolásával végezzük, majd a védőcsoportokat eltávolítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kapcsolást aktív észter módszerrel hajtjuk végre. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kapcsolást valamilyen karbodiimid, előnyösen diciklohexil-karbodiimid és egy aktív észter komponens, előnyösen pentaklórfenol együttes alkalmazásával végezzük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az alfa-aminocsoport átmeneti védésére szolgáló védőcsoportként a C-terminális észtercsoporttól és a guanidin védőcsoportjáról szelektíven eltávolítható védőcsoportot, előnyösen terc.butiloxikarbonil-csoportot használunk. 5. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a védett bradikinin védőcsoportjainak eltávolítását egy lépésben végezzük. Jogi Könyvkiadó igazgatója. 73-2813 Pécsi Szikra Nyomda — F. v.: Melles Rezső
