161074. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szerves oldószerekben oldható cefalosporin-C-származékok előállítására
5 161074 6 analízis szerint 12,8 g aktív anyagot tartalmaz. 41 ml kinolint adunk hozzá, két körülbelül egyforma adagban és a reakcióelegyet beoltjuk. Egy hétvégén át hűtőszekrényben tartjuk, majd leszűrjük. A szilárd anyagot acetonnal mosva és 35 C°-on vákuumszekrényben szárítva 20,6 g N-diklóracetilcefalosporin C kinolinsó keletkezik. 3. példa A 2. példa szerinti eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy diklóracetilklorid helyett 2-klórpropionilkloridot használunk. A hőmérséklet az adagolás során, eléri a 40 C°-ot, és a pH nehezen ellenőrizhető, 7,5 és 9,3 közötti érték. A reakció terméke az N-(2-klórpropionil)-cefalosporin C kinolinsója. 4. példa A 2. példa szerinti eljárást követve, 4400 ml fermentlevet, amely UV-analízis szerint 145 g aktív anyagot tartalmaz és 133 ml klóracetilkloridot használva 11800 ml etilacetátos extraktum keletkezik, amely 123,4 g N-klóracetil-cefasporin C-t tartalmaz. 5. példa 4 liter, 4,4 pH-értékű, 5,77 mg/ml cefalosporin C-tartalmú (nikotinamid-analízissel mérve) szűrt fermentlevet jégfürdőn lehűtünk. A hideg táptalajhoz 20 g nátriumborát dekahidrátot és 1200 ml acetont adunk. Az elegy pH-ját 25%-os nátriumhidroxidoldattal 8,5 értékre állítjuk. A hűtött elegyhez lassan 74 ml klóracetilklorid 600 ml acetonos oldatát adjuk, miközben a pH-t 8,5-en tartjuk. Az adagolás befejeztével az elegyet még további 30 percig keverjük, a pH-t 8,5-en tartva. Ezután 25%-ós kénsavval pH 4,5-re savanyítunk, 6800 ml etilacetátot adunk hozzá és további kénsavadagolással a pH-t 2,0 értékre állítjuk; 15 perces keverés után emulzió keletkezik, és a fázisok nem szeparálhatók. Ezért az elegyhez 200 ml acetont és 150 ml kereskedelmi de-emulgeálószert adunk. A fázisokat elválasztjuk és a vizes fázist mégegyszer 1 liter etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített etilacetátos fázisok össztérfogata 9,6 liter. Ezt 4,5 literre pároljuk be, és két edénybe osztjuk szét. Mindkettőhöz 70 ml kinolint adunk és az elegyet egy éjszakán át keverjük. Az egyik edényben kristályok keletkeznek, míg a másikban olaj válik el. Az olajról a felülúszót dekantáljuk, és a maradékot beoltjuk. Az oldatot ezután bekoncentráljuk, míg szilárd anyag kezd kiválni. Az elegyet az előzőleg kristályos alakban képződött anyag felével kombináljuk. Az elegyet egy járán át keverjük hűtés közben, majd leszűrjük. A szilárd N-klóracetilcefalosporin C kinolinsót kevés acetonnal mossuk, és 40 C°-on vákuumban szárítva 15,3 g anyag keletkezik. 10 liter szűrt fermentlevet 6,2 pH-ra állítunk és „flash" bepárlón 1,8 literre pároljuk. Az UV-analízis alapján a koncentrált fermentlé 46,5 g cefalosporin C-t tartalmaz literenként. A bekoncentrált és szűrt táptalajt jégfürdőn lehűtjük, és 18 g nátriumborát dekahidrátot és 540 ml acetont adunk hozzá. A pH-t 25%-os nátriumhidroxidoldattal 8,5-re állítjuk be, majd 56,5 ml 5 klóracetilklorid 4085 ml acetonos oldatát adjuk lassan hozzá, miközben a pH-t 25lo /o-os nátriumhidroxid adagolásával 8,5 és 9,0 között tartjuk. Az elegyet az adagolás befejezése után 15 percig keverjük, majd 1530 ml etilacetátot adunk hozzá 10 és a pH-t 25%-os kénsavval 2,0 értékre állítjuk. Az elegyet 15 percig keverjük, és a fázisokat centrifugálással elválasztjuk. Még egyszer 1500 ml etilacetáttal extrahálunk, és a két etilacetátos extraktumot egyesítve 3825 ml oldatot kapunk. 15 Ezt 750 ml-re töményítjük be, 1 liter, vízzel telített etilacetátot adunk hozzá. 100 ml kinolinnal reagáltatjuk, az elegyet hűtőszekrényben lehűtjük, szűrjük, a szilárd anyagot 200 ml acetonnal mossuk és 40 C°-on vákuumban egy éjszakán át 20 szárítjuk. Így 51,8 g N-klóracetilcefalosporin C kinolinsót kapunk. 7. példa 4,6 g 89%-os tisztaságú cefalosporin C nát-25 riumsó 30 ml vizes oldatát 20! %-os nátriumhidroxidoldattal 9,0-re állítjuk be. Ezután 1,3 ml klóracetilklorid 8,7 ml acetonos oldatát csepegtetjük hozzá, miközben a pH értéket 8,0 és 9,3 között tartjuk 10%-os nátriumhidroxidoldattal. 30 Az adagolás kb. 15 percig tart, majd az elegyet még 5 percig keverjük. A pH-t ezután 6 N sósavval 6,5-re állítjuk, 80 ml etilacetátot adunk hozzá, és pH 2,0-ig savanyítunk 6 N sósavval. 5 percig keverjük, majd a fázisokat elválaszt-35 juk, és az etilacetátos fázist nátriumszulfát felett szárítjuk. Ehhez telített metanolos nátriumacetátoldatot adunk 7,2 pH-ig, amely keverés során 7,7-re emelkedik. A kivált fehér szilárd anyagot leszűrjük, lehűtjük és exszikkátorban 40 egy éjszakán át szárítva 2,5 g N-klórácetil-cefalosporin C nátriumsó keletkezik. A cefalosporin C szerves oldószerben oldható származékai az I képletnek felelnek meg, mely képletben R 2—4 szénatomot tartalmazó a-halo-45 gén- vagy a,a-dihalogén-alkanoilcsoport. Az előnyös halogén a klórátom és az előnyös halogénalkanoilcsoport a klóracetilgyök. Azonkívül, hogy az I képletű szabad savakat 50 állítjuk elő, ugyancsak képezhetjük azokat sóikként is. Ilyen sók pl. a karbonsavnak alkálifémmel, alkáliföldfémmel vagy aminokkal alkotott sói lehetnek. A sóképzésére alkalmas amin pl. a kinolin, ciklohéxilamin, 5-etil-2-metilipiridin, 2-55 -pikolin, 3-pikolin, 4-pikolin, N-etilmorfolin, N-metilmorfolin, 2,6-lutidin, N,N-dietilciklohexilamin, hexametiléntetramin, N,N-dimetilbenzilamin vagy az N,N'-dibenziletiléndiamin. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás cefalosporin C szerves oldószerben oldható származékává történő átalakítására, az-65 zal jellemezve, hogy a cefalosporin C adipoil-3
