161023. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szervek, élő szövetek és élelmiszerek konzerválására biológiai proteáz-inhibitorok segítségével
5 adalékanyagot nem tartalmazó, ill. kallilkrein-tnipsziin-inhiibito'rt tartalmazó JkonyhasóaLdatibaa tároljiuk. A szövetek feldolgozását és vizsgálatát az 1. példáiban, leírt módon végezzük. Az inhibitort nem tartalmazó közegben' tá- 5 rolt szövet esetében 6 óna elteltével a lafctát-dehidrogenáz, NADH-citolkroim-e-irediuktáz és szulkcinoidéhidirogienáz enzimben foltszerű aktivitáscsöikkenés észlelhető. A glükóz-6-foisEfát-de-hidrogenáz sejtszerkezete rendellein.es lett, a 10 sejtmagok szerkezete azonban még nem sokat változott, és a sejitmagök 'nem festődnek, A nemspedif ikíus einzimaknél foltképződés tapasz-tailható. A savanyú foszfaitázok kapilliárásszerkezete nem különül el élesein, és aktivitásuk rendelte- 15 mes eloszlású. A kaEifcrerá-tripszin iinihibitort tartalmazó közegben tárolt szövet vizsgálata Borán a laktát-dahidrogenáz, NADH-ciitokrcim-c- . -reduktáz, szukcinodehidrogenáz és glükóz-O-foszfát-dehidragenáz enzimekben mem tapasz- 20 tataink változást. A nenwspacifilkus enzimek aktivitása kismértékben csokikén. A savanyú foszfatázak szenkezetie erősebben láitlható:, és szabályosabb eloszlással irandelkeznek, mint a konitrollszövet esetében. 25 Az inhibitort nem tartalmazó közíeigiben tárolt szövet szerkezete 24 óra elteltével flelhomlik, A lebenyek már nem határolhatók el élesen, az üregeik elhatárolása. rendellenes, és mély bevá- 30 gálsok; figyelhetők mag. A laktát-dahidrogenáz, NADH-citokrom-c-raiufctáz, szukdnoáehidirogíenáz, és elsősorban a glüfcóz-i6^foszfát-dehidiiogenáz aktivitása csökkent. A savanyú foszfatázok festése során jelentős aktivitasesökkenés, és 35 a hajiszálosöves írendiszer kezdeti fleil|bomlása figyelhető meg. A kaUilkirtín^ripszin-inihiilbiitor jielenlétében (tárolt szövet esetében a lebenyek és üregek 24 óra elítéltével is jól elhatárolhatók. A lakttat-dehiidrogenáz, /NADH-oitokroirn-e-reduk- 40 táz, szukcinodéhidrogenáz és glüfcóz-j6-foszfát-deMdiroglenáz enzimek aktivitása általában még elég erős. A savanyú foszfatázofc festése során a kontroH-szöVetfoen észleltnél erősehb aktivitást, és épebb hajszláksöves rendszert figyelhetünk 45 meg. A kallíkreinh-tiliplsziínHinihibitort nieim tartalmazó közegben (tárolt szövetben 5 map elteltével a laktáitHdehMlrögienázi, NADH-citokrom-c-reduktáz és szukcánodehidrogeraáz csekély, homogén 50 vagy foltszerű eloszlásban megjelenő aktivitással rendelkezik.. A savanyú foszf aitázok még elég nagy mértékben festhetőfc. A kalhlsrein-tripszin-inhibitor jelenlétében tárolt szöveteikben kismértékű szerkezetfelbomláis figyelhető 55 meg, a laktát^ehidrogénáz, NADH-ciitokrom-c-rediuktáz és szukcánodehidlrogienáE enzimek azarilhan még .jelentős aktivitással rendelkeznek. Á savanyú foszf:aitázok alkitivitása a kontrolliszövetekben mértnél lényegesen nagyobb. 60 3. példa: Emberi szegycsontból punkaióstűvel 2—4 ml csontvelőt távolítunk el. A csontvelőt kétszeres '65 6 térfogatú tyrode-oklatban szuszpanidáljiiik, és 15 mg/íml oldat mennyiségű kallikreinjtrdpszin-mhibitart adumk a szuszpanzióhoz. A szuszpenziót kb, —20 °C-oin tároljuk. 1 év elteltével a szuszpenziót megvizsgáljuk, és az eredményeiket az azonos körülmények között, azonban kallákirein-tripsain^inhibitor nélkül készáteitt szuszpenzió mérési adataival összehasonlítjuk. A konitrollszuiszpenzióban a tripántoék- vagy eozin-festék töhb elpusztult sejtett mutatott ki, mint a találmány szerint előállított elegyben, 4. példa: Átültetésre szánt emberi májba a Vena portae-n és az artéria hepatica^n keiresatül 10 mg/ /mii burgonya-inhibitort tartalmazó tyrode^oldatot áramoltatunk. A májszövet a kezelatlen májnál épebb marad, és a szövettanilag észlelhető autoliitikus elváltozások jelentősen visszaszorulnak. 5. példái: Hús konzerválása burgonya-inhibitorral (BI) 1500 g marhahús húsdarálóban megdarálunk és hozzáadunk 30 ml-nyi Pseudomonas putref acians pszichrofil törzset tartalmazó Bouillon-tenyészetet, amely kb. 2 x 106 számú csírát tartalmaz mlllilitarenikénit. E homiogén elegy 30—30 g-jához 70 g steril vizet (kontroli-kísérlet), illetve legfeljebb 2%-nyi burgonya inhibitor-oldatot adunk, majd steril körülmények között .Ulrtra-Tunrox gépen homogenizáljuk. A tenyészeteket 3 °C-on különböző időtartamon keresztül tároljuk és utána ellenőrizzük a csirák növekedését. Megvizsgáljuk minid az aerob, mind az anaerob csírákat, mivel a hús — eredeti flora lévén — különböző baktériumokat tartalmaz. Minit ahogy a táblázat adatai mutatják, a burgonya-inhibitor hatása gátolja mind az aerob, mind az anaerob baktériumok növekedését:. 1. táblázat Csírák száma/ml X106 Kísérlet „ fcezdlefbe 3. nap 8. nap 10. nap aenob csírák! 0,0% BI 5,0 20,0 . 3,000 20,000 •2,0% BI 5,0 4,5 4,0 5,0 anaerob csírák 0,00/01 BI 0,02 0,18 34,6 158,0 2,0% BI 0,01 0,02 0,08 0,3 BI = burgonya-inhibitor 3
