160875. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidrofil antibiotikumok, (cefaloszporin C) izolálására

160875 8 XAD—2-eluátumbál pedig 50 litert adszorbeálunk. Az adszorpciós'és mosásira használt perkolátumok a bevitt oefaloszporin C 5,9%-át és az adszorpciós oldatban jelenlevő szennyezések kb. 40—45%-iát tartalmazzák. A cefaloszporin C-t a 3. példa szerint piridinacetátos puff érrel eluáljük. A bevitt cefaloszporin C mennyiségének 75,4%-a 4 liter eluátumfőfrakcióban található, amely literenként 12,05 g cefaloszporin C-t tartalmaz. További 9,5% hatóanyag van a 2,75 liter térfogatú mellékfrakcióban. A fő&akcíokat 400 ml-re betöményítjük és a koncentrátuimot keverés közben 4,8 liter izopropanolfoan becsepegtetjük. A kivált nagy terjedelmű csapadékot lenuccsoljuk, 200 ml izopropanollal és 200 ml acetónnal mossuk, végül 40°on vákuumban szárítjuk. 45 g halványdrapp színű port kapunk, amely biológiai próba alapján 84,3%-ban cefaloszporin C-ből áll. Az izopropanolos kicsapásnál* elért termelés 56%. Az anyalúgból a maradék cefaloszporin C besűrítés és ismételt kicsapás után főtömegében kinyerhető. 5. példa: 2,5 cm átmérőjű üvegoszlopba 200 ml „Ambeiüite" XAD—2-t töltünk be víz jelenlétében. 200 ml 1. példa szerint kapott és literenként 1,96 g cefaloszporin C-t tartalmazó szűrt fermentlevet kénsavval 2 pH-értékre megsavanyítunk, majd 400 ml/óra sebességgel „Amberlite" XAD—2 oszlopon perkolálunk. A szűrletet 100 ml ionmentes vízzel az oszlopról kiszorítjuk, majd a oefaloszporin C-t 10%-os vizes izopropanollal eluáljük. Az oszlopot a 2. példa szerinti eljárással regeneráljuk és isimét adszorpcióhoz felhasználjuk. A perkolálásra és mosásra használt frakciókban cefaloszporin C nincsen. A még szervetlen anionokat tartalmazó első eluátuim-frakioiókiban 8%, a további eluátumfrakciókban a szűrt fermentlében jelenlevő cefaloszporin C összmennyiségének 90%-a van jelen. 6. példa: 30 liter 2. példa szerinti eljárással előállított és literenként 2jl2 g oefaloszporin C-t és kb. 34 g szennyezéseket tartalmazó szűrt fermentlevet ellenáramú extrakeiós berendezésben 15 liter 5%-os „Amberlite" LA—2 (szabad bázis) etilhexanolos oldatával extraiháJunk. Az extrahált szűrt fermentlében feloldott komponensek kb. 3,6%-ról 3,35%-ra csökkennek. 12 liter extrahált, szűrt fermentlevet 50%r-os kénsavval 2,7 pH-értékre állítunk be, majd 6 liter/óra sebességgel 6 liter „Amberlite" XAD—2 segítségével perkolákink. A fermentlevet 3 liter ionmentes vízzel szorítjuk ki az oszlopból. A perkolált oldatok antibiotikumot nem tartalmaznak. Az adszorbeált oefaloszporin C-t összesen 12 liter 10%-os vizes izopropanolial eluáljük. Az eluátum a szűrt fermentlében jelenlevő oefaloszporin C 97%-át tartalmazza (kb. 2P/o sótartalmú előfrakciókiban található). Az eluátum a szűrt 9 fermentlében jelenlevő szennyeződéseidből még 15%,-ot tartalmaz. Az „Amberlite" XAD—i2-t a 2. példa szerinti módon regeneráljuk és pótlólagosan még 3 liter 1:1 arányú aceton-víz eleggyel perkoláljuk. Az 10 acetont az oszlopról vízzel kiszorítjuk, így a.% oszlop ismét alkalmas adszorpció lefolytatására. Szabadalmi igénypontok: 15 1. Eljárás cafaloszporin C izolálására olyan oldatokból, amelyekben az antibiotikuim a fermentációból származó szennyezésekkel együtt van jelen, azzal jellemezve, hogy az oldatokat 20 vagy adott esetben a pH 2,8—3-ra savanyított oldatok szűrletét, adott esetben lipofil oldószerekkel és/vagy kb. 2—7 pH-tartományiban folyékony ioncserélőkkel végzett éxtrakoiós előtisztítás után 1—4 pH értéken makroporózus, nem-25 ionos, nagy fajlagos felületű adszorpciós gyantákkal kezeljük, majd gyantáról való leoldás után adott esetben a gyantát regeneráljuk, majd a hatóanyag-tartalmú oldatot ioncserélőkkel ismert módon továbbtisztítjuk, majd izoláljuk. 30 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy adszorpciós gyantaként 100—1000 m2

/g fajlagos felületű gyantát használunk. 35 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy adszorpciós gyantaként 7—ilO mm átlagos pórusátmérőjű gyantát használunk. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti 40 eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy adszorpciós gyantaként aromás alapgázzal rendelkező térhálósított gyantát használunk. 5. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti . eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy adszorpciós gyantaként divinilbenzollal térhálósított, makroporózus sztirol-poliimerizátumot használunk. V • • 6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti 50 eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az adszoirpciós gyantákkal való kezelést 1—4 pH-értékű oldatokkal végezzük. 7. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárások foganatosítási módja, azzal jellemezve, " hogy az adszorpciós .gyantákkal való kezelést 2—4 pH-értékű oldatokkal végezzük. 8. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási oldataként a szükséges pH-értékre megsavanyított fermentációs lé szűrletét használjuk. 9. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, 65 hogy kiindulási oldatként kénsavval vagy oxál-4