160696. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tromboplasztin kinyerésére

5 160696 6 re mosunk, majd őrlés közben (Turmix) 1,5 liter olyan oldószerrel kivonatolunk, amely 0,5 mól/ liter guanidin-hidroklöridot és 0,06 mól kalciumkloridot tartalmaz. 5 percnyi őrlés után a kivonást lassú keverés közben folytatjuk 1 órán át, majd a kivonó elegyet 4 C° hőmérsékletű hűtőszobában tároljuk éjszakán át. Centrifugálás után a kivonatot félretesszük, a kivonást megismételjük, és a szervmaradék elkülönítését követően az egyesített kivonatból a tromboplasztint pH 4,8-on konyhasótelítéssel csapjuk ki. A kicsapási elegyből centrifugálással elkülönített tromboplasztint a továbbiakban az 1. példában megadottak szerint kezeljük, végül fagyasztott állapotból szárítjuk. A hozam: 25,5 g (12,75 g/kg tüdő) tromboplasztin, amelynek biológiai aktivitása jól megegyezik a standardként használt Geigy-féle trombokináz vagy a Nyegaard & Co. A/S féle „Thrombotest" aktivitásával; normál emberi citrát-plazmán egyszakos módszerrel 14—18 másodperces alvadási időt ad. A végtermék hozama 40—60%-kal nagyobb, mint az élettani konyhasós kivonással azonos kiindulási nyersanyagból élőállított készítményé. 3. példa Tromboplasztin liofilizátum Karboximetilkeményítő (Primojel) Burgonyakeményítő (Ph. Hg. VI.) Ultraamilopektin Tromboplasztin liofilizátum Ultraamilopektin Karboximetilkeményítő (Primojel) Karbamid (Ph. Hg. VI.) 20,0 g 25,0 g 21,5 g 3,5 g 70,0 g A tromboplasztin liofilizátum-ot DIN 40-es szitán átszitáljuk, az ultraamilopektint és karboximetilkeményítőt 105 C°-on 2 órán át szárítjuk, majd mindhárom segédanyagot DIN 20-as szitán külön-külön átszitáljuk és homogenizáljuk. A tromboplasztin-porhoz részletekben hozzáada^ góljuk a segédanyag keveréket, és a teljes menynyiség hozzáadása után keverőgépben 20 percen át keverjük. A porkeverékből 6 mm átmérőjű, 0,07 g átlagsúlyú, 2,5 kg szilárdságú (Erweka készülékkel mérve) tablettákat préselünk. 4. példa Az 1. vagy 2. példában megadott eljárás szerint előállított tromboplasztin tablettává történő préseléséhez a következő összetételű porkeveréket használjuk 1000 tablettára vonatkoztatva: 10 15 20 25 Az 1. vagy 2. példában megadott módon előállított tromboplasztin tablettává történő pré- 30 seléséhez 1000 tablettára vonatkoztatva az alábbi anyagmennyiségeket használjuk: 35 40 45 S0 55 20,0 g 25,0 g 20,0 g 5,0 g 70,0 g A tromboplasztin liofilizátum-ot porítás után DIN 40-es szitán átszitáljuk, a segédanyagokat 2 órán át 105 C°-on szárítjuk és DIN 20-as szitán külön-külön átszitáljuk, majd homogenizáljuk. A tromboplasztin-porhoz részletekben adagoljuk a segédanyag-keveréket, s a teljes menynyiség hozzáadása után 20 percen át keverük. A porkeverékből 6 mm átmérőjű bélyegzővel 0,07 g átlagsúlyú, 2 kg szilárdságú (Erweka) tablettákat préselünk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás tromboplasztin kinyerésére emlősök tromboplasztin-tartalmú parenchimás szöveteiből, melyre jellemző, hogy a tromboplasztin kivonását (karbamiddal és/vagy guanidinnal) kalcium-ionok jelenlétében végezzük, majd a tromboplasztint a kivonatból kicsapjuk és elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, mélyre jellemző, hogy a tromboplasztin kivonását 0,5—5,0 mól/liter töménységű karbamiddal és/vagy guanidinnal 0,02—0,5 mól/ liter kalcium-ionkoncentráció jelenlétében 0— 5 C° hőmérsékleten pH 6,0—8,0 határértékek között vizes közegben végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, melyre jellemző, hogy a szövetmaradéktól elkülönített kivonatból a tromboplasztint neutrális sóval, előnyösen konyhasó-telítéssel csapjuk ki, majd elkülönítjük és fagyasztott állapotból szárítjuk. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás továbbfejlesztése tromboplasztin tabletták előállítására, melyre jellemző, hogy a szárított tromboplasztin-port közvetlen tablettázásra alkalmas szemcseméretű töltő, szétesést elősegítő, szuszpenzió-stabilizáló, tapadást gátló anyagokkal és karbamiddal és/vagy guanidinnal homogenizáljuk, majd a porkeveréket granulálás nélküli eljárással tablettázzuk, illetve vízmentes granulálási eljárással tablettázasra alkalmas granulumokká alakítjuk, és súrlódás^ csökkentő anyagok hozzáadása után tablettákká préseljük. Á kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7307435. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.