160550. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-) (cisz- 1,2-epoxipropil)-foszfonsav és sói előállítására

160550 (+)(cisz-l ,2-epoxipropil)-foszfonsa v származékait egyidejűleg hidrolizálnánk. A (—) (dsz-1,2-epoxipropity-foszfonsav vagy sója elválasztható az észter vagy amid (+) enantiomér származé-1 kától. 5 A találmány egyik előnyös kiviteli módja szeriint a II. általános képletű vegyületek monoészter enantiomér keverékei és azok sói, mely képletben 10 R jelentése metil-, etil-, propil- vagy alliPcsopont, különösen hasznos kiindulási anyagok, mivel a (—) enamtiomér lényegében kvantitatíve hidrolizálható anélkül, hogy a (+) enantiomér egyide- 15 jűleg hidrolizálódnók. így a (—) (cisz-l,2-epoxipropity-foszfonsav és a •(+) monoészter keverékei könnyen elválaszthatók azért, hogy a kívánt (—) savat vagy sóját kapjuk meg. 20 Hasonlóan a III. általános képletű amidok enantiomér keverékei, vagy azok sói, mely képletben Rí és R2

jelentése az előbbiékben megadott csoportok és 25 Z jelentése NR1R2, vagy OH, szelektív« hidrolizálhatók a >(—){cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsavvá, míg a (+) amid lényegében változatlan marad. így a (—)!(cisz-l,2-epoxipropil)~£oszfomsav a kapott reakeiókeverékből 30 elválasztható a (+)(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav amidjától. Az előbbi III. álltalános képletű amid szerkezeti képletében az Rí és R2 helyettesítő alifás, 35 cifcloalifás, aralifás, aromás vagy heterociklikus csoport lehet, amely szükség szerint tovább helyettesíthető. így példától lehet alifás, mint helyettesített vagy nem helyettesített alkil, alkenil vagy alkinil. A megadott példákban az alkil le- 40 bet: metil, propil. izopropil, t-butil, hexil, öktil, decil, dodecil csoport, lehet haloailkil, pl. klóretil, fluorpropil, hrómmetil és diklóratil csoport, lehet aciilamidoialkil, mint pl. acetilaminoimetil és benzoilamiinoetil-csoport, lehet aciloxiialkil, pl. 45 aoetoximetil, propionoxietil és benzoiloxietil csoport, tehet más helyettesített alkil csoport, pl. hidroxipropil, piperidillmetil, aminometil és aminoetil-csoport, lehet alkilaminoalkil, pl. dimetilaminoimetil, dietilamiinopropil, lehet karbalkoxi- 50 metil, cianoetil, szulfonaimidoetil, ftálimidometil és metoximetil; lehet továbbá alkenil, pl. allil, metalül, vinilpropenil, hexenil, ofctadienil csoport, lehet alkinil, pl. propargil, etinil vagy klóretinil csoport; lehat cikloalkil, pl. oikűohexil, cik- 55 lohexenil vagy cükloproplil csoport. Amennyiben az Rí és R2 jelentése alifás csoport, úgy azok 1—6 széniatomszámú csoportok lehetnek. Azokban az esetekben, melyeknél az Rí és R2 példái aralifás csoportot jelentenek, úgy ezek benzil, fenetil, fenilpropil, p^halogénbenzil, o-, m-, p-alkoxibenzil, nitrabenzil, aminofenetil, piridiletil, furilimetil, tienilpropil és hasonló csoportok lehetnek. 65 Rí és R2 jelentése lelhet aril csoport, mint feni!, «íaftil vagy helyettesített feni!, pl. p-klórfenil, o-nitrofenil, o,p-diihalogénfenil, cianofenil, metoxifenil, aminofenil és tolil csoport, és előnyösen egy-gyűrűs aromás csoport. Ha Rt és R2 heterocSklikus csoportot jelent, akkor az lehet heteroaromás, pl. piridil, furil, tienii, tiazolil vagy pirazinil csoport, vagy jeleníthet még külön ill. együttesen valamely hidrogénezett heterogyűrűt, pl. tetrahidrofuril és piperaziinil csoportot lis. Amennyiben az Rí és/vagy R2 acil-csoport, akkor az előnyösen kis szénatomszámú alkanoilvagy aroil-csoport, pl. acetil, propionil, butiril, hexanoil, benzoil, halogénbenzoil, nitrofoenzoil vagy hasonló csoport. Azt találtuk, hogy különféle mikroorganizmusok képesek olyan enzimeket termelni, melyek a (—}(dsz-l,2-epoxipropil)^f oszf onsa v észtereit és amidjait szelektíve hidrolízálják. Ilyen mikroorganizmusok az Actiinomyceta-k rendjébe tartozó baktériumok, pl. a Nocardia corallina; az erre alkalmas Pemcillium-törzsek pl. a Penicillium frequentans és Penicillium vermiculaitum; Aspergillus-törzsek, pl. Aspergillus miger; Fungi im-, perfecti-törzsek, pl. Ashbya gossypii és Heliocostyluni piriforime, melyek alkalmasak a (—)(ciszl,2-epoxipropil)-ioszfonsav észtereit és amidjait szelektíve hidroüzáló enzimek termelésére. A találmány szerinti eljárás kivitelezésére alkalmas enzimek könnyen rendelkezésre állnak ismert mikroorganizmusoknak, vagy . nem ismert mikroorganizmusoknak {—)i(ciszdl ,2-epoxipropil)-£oszfonisav-jmonoészter, vagy -/amid jelenlétében végzett tenyésztése útján. Ezek a mikroorganizmusok talajból, vagy imás hasonló forrásból szaunázhatnak. A tenyészet erős kifejlődése után (erre általában 2—5 nap elegendő) a felülúszó folyadékrészből Proteus vulgaris próbával meghatározzuk a tenyészet aktivitását. Az eljárás másuk foganatosítási módja iszerint az enzimet tartalmazó nyugvó sejteket erre alkalmas tápoldatban pH 8-ra beállítva, pl. trisz-pufferben 2—4 napon át inkubáljuk, majd a folyadékbázist Proteus vulgaris próbával vizsgáljuk. Az ilyen vizsgálati módszer kivitelezésénél .ajánlatos az erre alkalmas táptalajt — mely monoésztert vagy ami dot nem tartalmaz — egyidejűleg a vizsgálandó mikroorganizmussal is )beolteni abból a célból, hogy megkülönböztessük azokat az organizmusokat, melyek az antibiotikumot közvetlenül termelik, és azokat, amelyek az észterek vagy amidok szelektív hidrolízisére képesek. A találmány kivitelezését a következő példák szemléltetik. 1. példa Desztillált vízben 0,8% húslevest (Difco), 0,2%, élesztő extraktot, 3% cellulózt ós 0,3% maláta extraiktot tartalmazó tápoldat pH-ját 7,0-ra állítjuk be. Ebből a tápoldatból 40 ml-t bemérünk egy 250 ml-es Erlenmeyer lombikba és 15 per-2