160547. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-)-(cisz-1,2-epoxipropil)-pirofoszfonsav és sói előállítására
5 160547 l/liter őrölt zabliszt 10 Hidrolizált élesztő 10 MgS04 .7H 2 0 0,05 Foszfátpuff er"* 2 ml Víz q. s. végtérfogatig +91 g KH2 P0 4 + 95 g Na 2 HP0 4 , desztillált vízzel 1 literre kiegészítve. A közeg pH-ját sterilizálás előtt 6^5-re állítjuk. A beoltott lombikot rázógépen 28 C°-on 24 órán át inkubáljuk. 10 ml így kapott közeggel újabb 250 ml-es Erlenmeyer lombikban levő 50 ml, fenti összetételű steril közeget oltunk be. A lombikot rázógépen 28 C°-on 24 órán át inkubáljuk, majd a kapott fermentiével 5 literes fermentoriban levő 5 liter steril táptalajt oltunk be. A táptalaj összetétele a következő: g/liter őrölt zabliszt 30 Oldható cefre 10 Szójababliszt 25 Nátriumcitrát 4 Nátniumaszkorbát 0,5 Víz q. s. vég térfogatig A közeg pH-ját sterilizálás előtt 6,5-re állítjuk. A beoltott közeget 4 napon át 28 C°-on inkubáljuk, miközben a fermentlevet keverjük és 3 liter/perc mennyiségű levegővel levegőztetjük. A fermentléhez a fölös mértékű habzás meiggátlására 3 ml fcb. 2000-es molekulasúlyú propilénpoliglikol-polimert (a Dow Chemical Company által Polyglycol P—2000 néven forgalomba hozott termék) adunk. A kapott fermentlé aktivitása Proteus vulgaris-sal végzett standard meghatározás szerint 5,9 egység/ml. Ugyanezzel az eljárással végzett második fermentációban. 6,75 egység/ml aktivitású fermentlevet kapunk. A két fermentlevet egyesítjük és szűrjük. A kapott szűrt fermentlé 20 mg/ml mennyiségű szilárd anyagot tartalmaz és a módosított vizs-10 15 20 25 30 35 40 45 50 gálaiti módszer szerint 1 :32-es hágításban Proteus vulgárissal szemben 25 mm-es gátló zónát képez. 95 ml fenti módon kapott fermentlevet 40 percig 2,Í5 g savval kimosott alumíniumoxiddal keverünk. Az elegyet szűrjük. A szűrlet aktivitása az eredeti érték 20%-a. A kiszűrt alumíniumoxid-adßzorbatumot pH 11,^2 értéken vizes ammóniával mossuk és eluáljuk. Az eluátum bepárlásával az ammóniát eltávolítjuk. A maradék a módosított vizsgálati módszer szerint 0,125mg/ ml-es higításfoan 25 mm-es gátló zónát képez. 10 ml, 200 mg szilárd anyagot tartalmazó vizes ammónium-(—)-j(cisz-l,2-epoxipropil)-foszfonát oldathoz (teljes aktivitás: 54.000 egység) 100 mg nátriumhidroxidot adunk és a kapott oldatot vízzel 20 ml-re 'hígítjuk, majd szűrjük. A szűrletet melegítés közben vákuumban kb. 8^5 ml-re betöményítjük. A kapott koneentrátumot állni hagyjuk, amíg a (—)^(oisz-l,2-epoxipropil)-foszfonsav-nátriumsó kristályosodni nem kezd, majd az elegyet éjszakán át (17 óra) keverés közben tovább kristályosítjuk. A kristályos terméket kiszűrjük, kismennyiségű 50%-os vizes metanollal, majd kevés metanollal mossuk. A kristályos maradékot szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk. (—)-(cisz-l,2Hepoxipropil)foszfonsav-nátriumsót kapunk. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás (I) általános képletű vegyület — ahol R jelentése hidrogénatom — továbbá sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy (II) általános képletű vegyületet —, ahol R' jelentése hidrogénatom vagy fém-kation — rövidszénláncú alkánkarbonsavanhidriddel reagáltatunk, és adott esetben a kapott terméket sóvá alakítjuk. .2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy rövidszénláncú . alkánkarbonsavanhidridként eeetsavanhidridet alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként dinátrium-f(—)-Í(CÍSZ-J1 ,i2-epoxipropil)foszfonátot alkalmazunk. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás továbbfejlesztése antibakteriális készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely (I) általános képletű vegyületet vagy sóját gyógyászatilag alkalmazható hordozóanyagokkal elegyítünk. 1 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7307102. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V„ Balassi Bálint utca 21—23. 3
