160456. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neoaaamicin tartalmú vizes oldatok hatóanyagának dúsítására egy harmadik fázist létrehozó extrakcióval, valamint gyógyászati tisztaságú neomicinsók előállítására

s zük és a kívánt pH-értéket sikkor fogadjuk el (véglegesen beállítottalak, ha két 5 perces időköziben végzett mérés azonos eredményt ad.) Az elegyet ezután 10 percig folyamatosan keverjük, majd megszüntetjük a keverést és a fázisokat 5 szétválni hagyjuk. Három fázis jön létre. Legalul helyezkedik el a vizes fázis, e fölött az un. , „komplex" fázis, legfelül pedig az n-iburtálacetátos fázis. Leeresztjük a vizes fázist (esetleges másodszőri extrakció céljából eltesszük), a komplex fázist és az n-butilacetátáos fázist rázótölcsérben összerázzuk 110 ml 10 n-kénsav és 150 ml desztillált víz elegyével. Alapos összerázás után szétválni hagyjuk az elegyet. E művelet hatásara eltűnik a komplex fázis, vagyis a szétváláskor két fázis alakul ki. A neomicin (szulfát formájában) a vizes fázisban, a mono-n-oktilftalát a butilacetátos fázisban helyezkedik el. A vizes oldat kémhatása üvegelektródás pH~ mérés szerint = 2. Amennyiben a mért pH-érték ennél több volna, úgy további 10 n kénsavat adagolunk. A butilacetátos fázist még kétszer kirázzuk 150 és 100 ml desztiEált vízben. 25 Az egyesített 2-es pH-jú vizes frakciók kémhatását dietilaminnal beállítjuk 2,5-ös pH-ra, ezután belekeverünk 5 g aktív szenet és szűrünk. Az ily módon 750 ml-re csökkent reextrahált lében 90 g neomicinszulfátot találunk az cndinos-modszer szerdnit (az extrakció hatásfoka ennek alapján 0,805-nek adódik). Az oldatot ezután derítés céljából átengedjük 250 ml aktívált Wofatit EZ adszorbciós gyantát tartalmazó kromatográfiás oszlopon, melynek hatására eltávozik az oldatból a szí- 3Ö néző anyagok 75%-a. Az oszlopot desztillált vízzel átmossuk és a kapott 1,2 l-nyi vizes oldatból ezután hidroxil-formában levő Varion AD gyantával eltávolítjuk az anionokat, e célra 1,4 1 gyantát alkalmazva. A gyanta-oszlopot *° desztillált vízzel átmossuk és így 2,5 1 neomicin-bázis-tartalmú oldathoz jutunk, melynek neomicinszulfát tartalma, orcinos elemzés szerint 68,8 g. 45 Az anion-mentesített oldathoz 100 ml koncentrált lammónia-oldaitoit adunk és a szervetlen kationok megkötése céljából átfolyatjuk 100 ml ammónium formában levő Wofatit CP—300-as kationoserélő gyantán és az így kapott oldatot 50 vákuumban 30 °C-on bepároljuk 100 ml-re. (Ennek az oldatnak a neomicinszulfát tartalma, orcinos elemzés szerint 68,6 g.) A bepárolt neomicinbázis-oldathoz jeges hűtés közben hozzáadunk 45 ml 10 n kénsavat, 55 az oldat pH-ja ekkor 2-re áll be. A pH-4; dietilaminnal 4-re emeljük, ezután hozzáadunk 15 ml forómos Vizet, majd 30 perc múlva 3 g aktív szenet és végül leszűrjük a szenet. A fenti forómozást és szemezést még két- 60 A kiadásért felel: a Közgazdasági 7307093. Zrínyi (T) Nyomda, Budapi 10 szer megismételjük. Az ily módon tisztított neomácinszulfát-oldatot állandó keverés közben 1200 ml metanolba csurgatjuk, a kicsapódott terméket kiszűrjük, mossuk és 00 °C-os vákuumszekrényben szárítjuk. A kapott termék súlya 59,3 g, mely az orcinos elemzés szerint 56,8 g {95,9%) neomicinszulfátot, ia ihiológiai mérés szerint pedig 57,2 g (96,5%) hatóanyagot tartalmaz. A neomicinszulíá't minősége megfelel az angol gyógyszerkönyv előírásainak. Az össztermelés, a szűrt fermentlé hatóanyag tartalmára vonatkoztatva 51,0%-os. Nehézfém- és egyéb fém-szennyezéseket, spelktrál analízis szerint csak nyomokiban találtunk, ami azt jelenti, hogy a szennyezések csak törtrészét képviselik a gyógyszerkönyvben megengedett mennyiségnek. A szulfáthamu-startalom ugyancsak 'sokkal kevesebb a megengedettnél, nevezetesen annak tized részié: 0,1-8%. A specifikus forgatóképesség pedig 90,0°, ami megfelel a gyógyszerkönyvi előírásnak (50—68°). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás neomicintantalmú vizes oldatok hatóanyagának dúsítására egy harmadik fázist létrehozó extrakcióval, valamint gyógyászati tisztaságú, gyógyászatilag elfogadható savval képezett neomicinsó előállítására, azzal jellemezve, hogy a szűrt fermentlevet vagy a neomicintarfeűanú vizes oldatot 7—9 közötti pH-értéken összerázzuk valamely kétbázisú kisszénatóraszámú aromás szerves sav félészteriének maximálisan 15%-os rövidszénláncú alifás alkohol rövidszénláncú karbonsawail képezett észteres oldatával, +5 — +25 °C, előnyösen 20 °C-os hőmérsékleten, a középső „ikomplex-tfázist" és a felső észteres fázist elválasztjuk az alsó vizes fázistól, a szerves fázisokat összerázzuk valamely ásványi sav híg vizes oldatával, s ezzel a vizes fázist pH=12-re láUítjuk be, a vizes fázisba átoldódott hatóanyagot ionicserélőgyanta segítségével anian-menitesítjük, a ibázikus kísérőanyagokat eltávolítjuk a vizes fázis vákuiumibepárlásával 20—60 °C-on, ezután gyógyászatilag elfogadható sav hozzáadásával sóvá alakítjuk a neomicinbázist, ibrómos vízzel elroncsoljuk a még jelenlevő színes szennyeződéseket és a tiszta neoxniicinsót rövidszénláncú alifás alkohollal, célszerűen metanollal kicsapjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a neomicintartalmú vizes oldatok hatóanyag-tartalmának dúsítását kétbázisú kisszénatomszámú aromás szerves savak célszerűen inommál- vagy izo-oktilalkohollal képezett félésztereinek 5—10%-os n-butilacetátos oldatával végezzük, 1 :5 — 1:3 oldószer :víz térfogat-arány mellett. és Jogi Könyvkiadó igazgatója, it V., Balassi Bálint utca 21—23. 5