160109. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lipáz előállítására
160109 10 majd 30>—40 perc állás után az oldatlan részt centrifugálással elkülönítjük, az enzimet tartalmazó 'oldathoz pedig 3 tf hideg alkoholt adunk állandó keverés mellett. A kicsapódó enzimet centrifugálással elkülönítjük és hideg acetonnal szárítjuk. Enzimaktivitás: A termék súlya 37,5 g. E/mg. Termelés 49,3%. Enzimaíktivitás: 32 2. példa: 4,7 liter pH 6,5-re állított 6,4 E/ml aktivitású Afosidia orchidis 409 szűrt fermentlevéhez 25 °C-on állandó keverés mellett 0,3 liter 10 súly/ /tf%-os vizes tannin-oldatot adunk és a továbbiakban az 1. példa szerinti módon járunk el. A termék súlya 7,0 g. Enzimaktivitás: 1,2 E/mg. Termelés: 27,9%. 3. példa: Sertés hasnyálmirigy 0,02 M CaCl2 -dal készült vizes kivonatának 4,5 liter mennyiségéhez (1000 E/ml lipáz-tartalom) — a vegyhatás pH 6,3-ra állítása után — 25 g Hyflo Supereell-t (0,5 súly/tf%-ig), majd állandó keverés mellett 0,5 liter 10 súly/tf%-os vizes tannin-oldatot adunk. A továbbiakban az 1. példában leírt módon járunk el azzal a különbséggel, hogy kétszeres mennyiségű mólos vizes piridin-oldattal végezzük az enzim kivonását. A termék súlya 32,7 g. Enzimaktivitás: 28 E/mg. Termelés: 20,8%. 4. példa: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a mólos piridin vizes oldatával végzett kivonás után a szuszpenzió vegyhatását sósavval pH 6,8-ra állítjuk. A termék súlya 30.0 g. Enzimaktivitás: 20 E/ /mg. Termelés: 24,6%. IV 5. példa: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a mólos piridin vizes oldatával végzett kivonás után a szuszpenzió vegyhatását AlCl-i 10 súly/tf%-os vizes oldatával állítjuk be pH 6-ra. A termék súlya 20,8 g. Enzimaktivitás: 38 E/mg. Termelés: 32,5%. 6. példa: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a mólos piridin vizes oldatával végzett kivonás után a szuszpenzió vegyhatását 10 tf%-os kénsawal állítjuk 10 25 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 pH 6-ra. A termék súlya 34,0 26 E/mg. Termelés: 37%. 1. ellenpélda az 1. példához: Mindenben az 1. példában leírt rnódon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tanninos kicsapást pH 4,8 értékre állított szűrt fermentlében végezzük el. A termék súlya 42,8 g. Enzimaktivitás: 6 E/mg. Termelés: 10,5%. 2. ellenpélda az 1. példához: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy az enzim kivonását piridin 0,3 mólos vizes oldatával végezzük el. A termék súlya 12,2 g. Enzimaktivitás: 5 E/mg. Termelés: 2,5%i. 3. ellenpélda az 1. példához: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tanninos csapadékból az enzim kivonását pH 5,9-es mólos nátriumacetát-pufferrel végezzük. A termék súlya 3 g. Enzimaktivitás: 0 E/mg. Termelés: 0%. 4. ellenpélda az 1. példához: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tanninos csapadékból az enzim kivonását 50 tf%-os vizes acetonnal végezzük el, és az enzimet tartalmazó oldatból 4 tf. hideg aceton hozzáadásával csapjuk ki az enzimet. A termék súlya 120 g. Enzimaktivitás: 3,7 E/mg. Termelés: 18,2%. 5. ellenpélda az 1. példához: Mindenben az 1. példában leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tanninos csapadékból az enzim kivonását mólos trietilamin vizes oldatával végezzük. A termék súlya 36 g. Enzimaktivitás: 0 E/mg. Termelés: 0%. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás lipáz enzim előállítására ferment levekből vagy állati szervkivonatból kicsapás, a csapadék elkülönítése, az elkülönített csapadékból az enzim kivonása, majd a kivonatból az enzim kicsapása útján, azzal jellemezve, hogy a lipázt tartalmazó vizes oldatból az enzim kicsapását pH 6 és 7,5 között, előnyösen pH 6,3 és 6,8 között 0,4^3,0 súly/tf%-os vizes tanninoldattal végezzük, és az elkülönített csapadékból a lipázt piridin 0,5—3,0 mólos, előnyösen 0,8—1,5 mólos vizes oldatával 5,5 és 7,5 között vonjuk ki, majd a kivonatból az enzimet kicsapjuk.
