159853. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmusok tenyésztésére
159853 6 Nocardia rubropertincta Streptomyces griseolus Streptomyces rimosus Streptomyces sp. Ezek a baktériumok a következő összetételű vizes tápközeg jelenlétében növekednek: NH4C1 0,5 g NaCl 4 g MgS04 0,5 g Na2 HP0 4 0,5 g KH9PO4 0,5 g vízzel kiegészítve 1000 ml-re. Ennek á közegnek a pH-ját előnyösen 7-en tartjuk. Élesztők és penészek számára alkalmas a következő összetételű tápközeg: (NH4 ) 2 HP0 4 KCl MgS04 -7H 2 0 ZnS04 MnS04 -H 2 0 FeS04 -7H 2 0 csapvíz • élesztőkivonat desztillált vízzel kiegészítve 10 15 20 2 g 1,15 g 0,65 g 0,17 g 0,045 g 25 0,068 g 200 g 0,025 g 1000 ml-re. 30 A mikroorganzimus növekedését elősegíthet jük, ha a táptalajhoz igen kevés élesztőkivonatot (élesztő hidrolízise révén (kapott, a B vitamincsoportban gazdag ipari termék) vagy még általánosabban az esszenciális élesztő táp- 35 elemeiket adjuk hozzá. Az esszenciális élesztő^ tápelemek biotin, tiamin, inozit, nikotinsav, pantoténsav és piridoxin. A szükséges élesztőkivonat mennyisége a vizes fermentációs közegre vonatkoztatva 25 mg/kg nagyságrendű. 40 Az egyes tápelemek mennyisége 0,1 mg/kg (a biotin esetében) és 10 mg/kg (az inozit esetében) között változik. A vizes tápközeg pH-ját előnyösen nagy pH-értékű vizes oldatok szakaszos vagy foly- 45 tonos hozzáadásával tartjuk a kívánt értéken. Penészek vagy élesztők és különösen Candida tropicalis; használata esetén a táptalaj pH ját 3 és 6, előnyösen 4 és 5 között tartjuk. Baktériumok nagyobb pH-t kívánnak, rendszerint 50 6,5 és 8 közöttit, A tenyészethez adásra alkalmas lúgos anyagok például nátriumhidroxid, káliumhidroxid, dinátriumhidrogénfoszfát és ammónia, akár magukban, akár vizes oldatban. 55 A táptalaj optimális hőmérséklete változik a mikroorganizmus szerint, és rendszerint 25 és 35 °C között van. Candida tropicalis használata esetén az előnyös hőmérséklettartomány 28— 32 °C. 60 Oxigén felvétele nélkülözhetetlen a mikroorganizmus növekedéséhez. Az oxigént rendszerint a levegő szolgáltatja. Gyors növekedés elérésére az oxigént szolgáltató levegőnek finom g5 buborékok alakjában kell jelen lennie keverés közben. A levegőt zsugorított kerámiai felületen át juttatjuk a táptalajba. Alkalmazható azonban örvénylő levegőztetés is. A vizes tápközegből lehetőleg minél többet dékantálással választunk el a mikroorganizmustól. Ezen felül vagy ezen kívül cenitrifugálás is alkalmazható az elválasztásra. A kapott mikroorganizmustartalmú részt ezután vízzel mossuk, és ismét elválasztjuk centrifugálással. A mosást és elválasztást addig ismételjük, míg a visszamaradt tápanyagot a kívánt mértékben eltávolítottuk a mikroorganizmust tartalmazó részből. A mosófolyadékok, esetleg további kezelés után, visszavezethetők a tenyésztési műveletbe. A mikroorganizmust előnyösen megszárítjuk, és oldószerrel extraháljuk. Az oldószeres extrakciót célszerűen szénhidrogénből álló vagy azt tartalmazó oldószerrel végezzük. A szénhidrogén előnyösen molekulánként 4—7 szénatomot tartalmazó paraffinszénhidrogén, előnyösen egyenesláncú paraffinszénhidrogén. Alkalmas oldószerek a n-pentán és n-hexán. Kívánság esetén a szénhidrogéneknek szénhidrogénes oldószerrel való extrahálását megelőzheti egy alkohollal, előnyösen etanollal vagy izopropanollal végzett extrakció. Kívánság esetén oldószerként egy szénhidrogén és például etanol vagy izopropanol elegyét alkalmazhatjuk. Alkalmas például egy 80 s% hexánból és 20 s% etanolból vagy izopropanolból álló oldószer. Az oldószeres extrakció során extrahált szénhidrogének, ha asszimilálható, visszakeringtethetők a mikroorganizmust tenyésztő műveletbe. A lipidjeitől és a szennyező szénhidrogénektől a fent leírt módszerek szerint teljesen vagy részben megszabadított, javított ízű élesztő emberi táplálkozásra alkalmas új ipari termék. A találmány előnyös megvalósítási módja szerint egy mikroorganizmust a fentebb leírt módon tenyésztünk egy részben egyenesláncú szénhidrogénekből álló és molekulánként legalább 10 szénatomnak megfelelő közepes molekulasúlyú ásványolajpárlat, egy vizes tápközeg és szabad oxigént tartalmazó gáz jelenlétében, és a kapott keverékből elkülönítjük egyrészt a mikroorganizmust, másrészt egy egyenesláncú szénhidrogénektől mentes vagy azokat csökkent mennyiségben tartalmazó ásványolajfrakciót, majd a mikroorganizmust a fentebb leírt módon kezeljük. A találmány szerinti eljárás különösen előnyösen alkalmazható egyenesláncú szénhidrogéneket szilárd paraffin alakjában tartalmazó gázolajpárlatok kezelésére, mert a találmány szerinti eljárással alacsonyabb dermedéspontú gázolajat állíthatunk elő, a paraffin pedig értékes termékké alakul át. A kiindulási anyagban az egyenesláncú szénhidrogének rendszerint paraffinszénhidrogénekként vannak jelen, azonban olefinek alakjában 3
