159745. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 13béta-rövidszénláncú alkil-3-metoxi-17béta-hidroxi-8,14 szekogona-1,3,5(10),9(11)-tetraén-14-on vegyületek előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGALATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1970. ¥111. 26. (GO—1141) 159745 Közzététel napja: 1971. VII. 02. Megjelent: 1972. X. 30. Nemzetközi osztályozás: C 07 c 167/00 isii?«* Feltalálók: Dr. Szentirmai Attila biológus, 60%, Dr. Tömörkényi Endre vegyész, 30%, Tölgyesi László vegyésztechnikus, 10%, Budapest Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Eljárás lS/S-rövidszénláncú alkil-3-metoxi-17/3 -hidroxi-8,14 szekogona-l,3,5(10),9(ll)-tetraén-14-on vegyületek előállítására A • találmány tárgya: új eljárás 13/J-rovidszénláncú alkil-3-metoxi-17!/?-hidroxi-8,14HSzekagona-l,3,5(10),9(ll)-tetraén-14-«n vegyületek előállítására fermentációs úton élesztő tenyészettel. Közel öt év óta ismeretes, hogy a biológiailag aktív ösztradiol-3-metiléter totálszintézissel történő gazdaságos előállítása egy optikailag aktív vegyület, a 3-metoxi-8,14-szeko«-l,3,5(10),-9(ll)-ösztratetraén-17/?-ol-14-on intermedieren keresztül történhet. Az a tény már régóta ismert, hogy optikailag aktív vegyület előállítása lehetséges enzimatikus úton, a mi esetünkben a szteroid molekula 17-oxo-csopoirtjának sztereospecifikus redukciója által akár magasábbrendű élőlényekből nyert preparátummal, akár mikroorganizmusokban előforduló enzimékkel, az ép sejteket vagy sejtmentes kivonatot használva. A fentemlített totálszintézishez felhasználható intermedier vegyület előállítására, azaz a 3-metoxi-8,14-szeko-l,3,5(10),-9(1 l)-öszt!ratetraén-14,l 7-dión szétereospecifikus redukciójára az irodalmi adatok szerint számos mikroorganizmus alkalmas a valódi gombák, actinomycesek, élesztők és baktériumok közül (Tetrahedron Letters 1966, 2321; NSzK 1493 171, 1965; Liebigs Ann. Cham. 701, 199, 1967; Tetrahedron Letters 1967, 4673). Kémiai úton osak a dl-ösztronhoz vezető vegyületpár állítható elő. (Chem. Ind. 1966, 1340.) Egyszerű és iparilag könnyen megvalósítható technológiája miatt az élesztők, ezen belül a Saceharomyces uvarum átalakító képességét vizsgáltuk részletesen. 5 A Saceharomyces uvarum (M'NG 55) (A Mikroorganizmusok Nemzeti Gyűjteményében letétbe helyezve) törzs a kukorioalekvár-glükózos táptalajon 28 C°~on levegőztetett és kevertetett tenyészetben jól fejlődik. A logaritmikus 10 fázisban szaporodó tenyészethez adott 3-metoxi-8,14-szeko-l,3,5(10),!9(lil)-öisztratetraén-14,-17-dionból a további inkübálás során különböző redukciós termékek keletkeznek. A korai időben főleg a 17i/^hidroxi-származék szaporo-15 dik fel, kevés 14a4hidroxi-származék mellett. Később a fermentáció során jelentős mennyiségű 14;a,17|/?-dihidroxi-szárrnazék felszaporodását tapasztaltuk. Rétegkromatográfiával kimutatható volt a 14ctJ hidroxi vegyületekből kelet-20 kező 9a-14a-oxido vegyület is. Az enzimatikus folyamat részletes vizsgálata során azt a meglepő megfigyelést tettük, hogy csökkentve az élesztő tenyészet anyagcsere se-25 bességét, (alacsonyabb hőmérsékleten, minimális levegőztetés mellett malátakivonatot és szaharózt tartalmazó táptalajon) csökken a nem kívánatos 14a-hidroxi-származék keletkezési sebessége. Tehát 24 C°-on minimális levegő gőztetés mellett, malatanszaharoz tartalmú táp-159745
