159720. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 204 és A 204 II antibiotikumok előállítására és ilyen hatóanyagot tartalmazó kártevőirtószerek
159720 állítjuk elő, asszimilálható szent, nitrogént és szervetlen sókat tartalmazó tenyész-közegben. A mikroorganizmust először Perry helységben (Florida, USA) vett talajmintákból izoláltuk oly módon, hogy a talajminta egy részét steril desztillált vízben szuszpandáltuk, majd a szuszpenziót agarlemezeken szélesztettük. A beoltott tápagarlemezeket több napon keresztül 30 C°-on inikubáltuk. Az inkubáció végén az A204 vegyületet termelő mikroorganizmust tartalmazó telepeket steril platánakacs segítségével ferde agárra vittük át. A beoltott ferdeakart azután inkubáltuk, hogy nagyobb mennyiségű oltóanyagot nyerjünk az A204 antibiotikum gyártásához. A talajmintából izolált A204 antibiotikum termelésére alkalmas mikroorganizmust a Northern Utilization Research and Development Division, Agricultural Research Service, U. S. Department of Agriculture (azelőtt Northern Regional Research. Laboratories, Peoria, Illinois,) intézménynél korlátozás nélkül állandó letétbe helyeztük és NRRL 3384 azonosítási szám alatt hozzáférhető. A Streptomyces csoportbeli mikroorganizmusok rendszertani tanulmányozásánál mindig némi bizonytalansággal kell számolni az újonnan felfedezett mikroorganizmusok osztályozásánál. Az A204 antibiotikumot termelő mikroorganizmus azonban legfontosabb tulajdonságait illetően a Streptomyoes albus, Streptomyces albidoflavus és Streptomyces flaveolus mikroorganizmusokihoz áll legközelebb. Ennek megfelelően a tenyészet a S. albus csoporthoz (Rossia Doria) Waksman és Henriéi szerzők) tartozik, amelyet Lyons és Pridiham szerzők [J. Bacteriol. 83, 370—380 (1962)] S. albus ATOC 3004 elnevezéssel, valamint Waksman [The Actinomycetes, Vol. II. „Classification, Identification and Description of Genera and Species, „Williams and Wilkins Co., Baltimore (1901)] S. albus IMRU 3005 elnevezéssel közelebbről ismertet. A fennálló hasonló tulajdonságok ellenére azonban számos eltérés is tapasztalható, amelynek alapján az új mikroorganizmus megkülönböztethető az összes eddig ismert S. albus csoportbeli törzsektől. Ennek folytán a találmány tárgyát képező mikroorganizmust NRRL 3384 azonosítási szám alatt a Streptornyces albus csoport egy mikroorganizmusának tekintjük. A találmány részletes ismertetése mindenkor az újonnan felfedezett NRRL 3384 mikroorganizmusra vonatkozik. A mikroorganizmus fogalma azonban magában foglalja az A204 mikroorganizmust termelő törzsek variánsait is. Ilyen variációk ismert eljárásokkal állíthatók elő, ha például az előbbi törzset röntgensugárzásnak, ibolyántúli besugárzásnak, vagy kémiai vegyszerek, mint pl. nitrogénmustár hatásának tesszük ki. Az új A204 antibiotikumot termelő S. albus törzs rendszertani tanulmányozásánál azokat az azonosítási eljárásokat használtuk kiegészítő vizsgálatokkal együtt, amelyeket Shirling és Gottlieb ,Methods for Characterization of Streptomyces Species", Intern. Bull. Systematic Bacteriol 16, 313—340 (1966) ismertet és amelyeket az International Streptomyces Project intézmény ajánl. A szénforráshasznosítási kísér-5 leteket a Pridhiam és Gottlieb szerzők által leírt módszerrel [J. Bac. 56, 107 (1948)] végeztük. A rendszertani vizsgálatoknál kapott adatokat az alábbiakban táblázatos formában ismertetjük. A szín-elnevezéseket az ISCC—NBS 10 módszer szerint (Kelly és Judd, „The ISCC— —-NBS Method of Designating Colors and a Dicitonary of Color Names", Ü. S. Dept. of. Commerce Circ. 553, Washington, D. C.) adjuk meg. A kerek zárójelbe tett számadatok a Tresis ner és Backus féle színsorozatra (Tresner és Backus „System of Color Wheels for Streptomyces Taxonomy", Appl. Microbiol, 11. 335— 338, (1966) vonatkoznak. A Maerz és Paul színblokkokra vonatkozó adatok kapcsos zárójelben vannak megadva (Maerz és Paul, 1950, Dictionary of Color, McGraw-Hill, New York). I. táblázat 25 so 35 40 45 50 55 60 65 Az NRRL 3384 tenyészet ismertetése Tapasztalt tulajdonságok Jellemző adatok Morfológia Lánconként 3—50, rendszerint 10—50 ovális-hosszúkás alakot felvevő spórát tartalmazó spirális alakú, kalapos gombás termőtesték; 1,9 /AX1,3 f, elektromikrográfon sima spórafelület állapítható meg-A tenyészet jellemzői a következő reagensekkel szemben: Kalcíum-malát Bőséges szaporodás, halványsárga, zöld szín (reverse pale yellow green), [10B1], spóraképződés és micélium képződés bőséges, (7), halványsárga, 2iba [HCl], oldható pigment nincs, a közeg gyengén kiülepedett. Paradicsompaszta-zaibliszt ICP No. 2. (Elesztcwnaláta agar) Bőséges szaporodás, szürkéssárga szín (grayish yellow reverse) [11B2], spóraképződés bőséges (W), fehér, a; oldható pigment nincs. Bőséges szaporodás, szürkéssárga szín (grayish yellow reverse) [11B2] snórakéoződés és micéliumkéDződés bőséges (Y), halványsárga, 2ba [HCl] oldható pigment nincs. 2