159651. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12-vitamin termelésének fokozására
159651 összetételű táptalajt sterilizáltunk és 2% külön sterilizált glükózt adtunk hozzá. Beoltottuk 1 liter azonos táptalajon készült 6 napos Propionibacterium Shermanii tenyészettel, 24 óra múlva 130 g NaHCOsr-t adtunk hozzá szubsz- 5 tanciában a pH stabilizálása végett (a 155 421 sz. magyar szabadalom leírása szerint) és a 63. órában, miután a glükóz elfogyott, 40 ml 50%os Al2i(S0 4 )3-!l8iH2iO oldatot, majd keverés közben 24 ml vízüveget adtunk a tenyészethez. io Pelyhes alumínium-szilikát csapadék vált ki, amely a baktériumtömeget magával ragadta. 4 órai állás után dekantáltuk és elöntöttük a csapadékról leszívott folyadékot. Ez enyhén zavaros volt és 0,6 pg/ml B^-vitamin-aktivi- 15 tásnak megfelelő kobinamidot tartalmazott E. coli 113-mal, agar lemezen mérve. Az üledékhez 5 liter steril vizet töltöttünk, felráztuk, majd 3 órai ülepítés után a mosóvizet is leszívtuk. Ezután az előzővel azonos összetételű 20 táptalajjal feltöltöttük a lombikot az eredeti térfogatra (7 liter) és annyi glükóz oldatot adtunk hozzá, hogy a glükóz-ikoncentráció 2% legyen, majd tovább fermentáltuk a tenyészetet. Egy nap múlva 130 g NaHC03-t adtunk 25 hozzá, a következő napon 5 /Ag/rnl 5,6-dimetilbenzimidazölt adagoltunk és további 48 óra múlva a tenyészet Bi2 -; vitamin-tartalmát 31,6 /xg/ml-nek találtuk. 6 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás B12 -vitamin termelésére Propionibacterium shermaniival, azzal jellemezve, hogy a fermentáció során keletkezett, a baktériumokra nézve toxikus ecetsavat és propionsavat, illetőleg acetát- és propionát-ionokat a toxikus koncentráció elérése előtt a baktérium-tömegtől a baktériumoknak a fermentléből steril körülmények között való kiülepítése által elkülönítjük, majd a fermentációt friss táptalaj hozzáadásával folytatjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a baktériumok kiülepítését centrifugálással végezzük. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a baktériumokat alumínium-szilikát csapadékhoz adszorbeáltatva ülepítjük. 4. Az 1—3. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kiülepítést egyazon fermentáció során egy vagy több ízben hajtjuk végre. 5. Az 1—4. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a baktériumokat tartalmazó üledéket a friss táptalaj hozzáadása előtt vízzel átmossuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 72D7543. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 3
