159633. lajstromszámú szabadalom • Fermentációs eljárás citromsav előállítására

159633 13 1 = Humphrey Chemical Co., North Haven, Conn, termékei. 2 = a fermentáció végén. A III. táblázatban felsorolt szénhidrogéneken kívül kitűnő citromsavhozamot értünk el az 5 alábbiakban felsorolt szénhidrogénekkel is: 14 (IV. táblázat folytatása) n-nonadekán 1-nonén 1-nonadecén 1-tridecén 1-pentadecén. 4. példa: Az 1. példa szerinti fermentációs közeget használjuk, amelyből sorozatkísérletben 300 mles Erlenmeyer lombikokban 25—25 ml-t készítünk be sterilezés után (amelyet szintén az 1. példa szerint kivitelezünk), majd különböző mennyiségű n^hexadekánt (amelyet előzetesen Seitz féle szűréssel sterilezünk) adunk a lombikokhoz. A lombikokat burgonya-dextróz ferde agárról származó Candida lipolytica AT.CC—8661 sejtszuszpenzióval beoltjuk,' és a fermentációt körrázó berendezésben 28 C°-on különböző ideig végezzük. Az előállított citromsav mennyiségét az előzőekben ismertetett elemzési technikával határozzuk meg. A kapott eredményeket az alábbi IV. táblázatban soroljuk fel. 10 15 20 25 30 35 VízBeFermenVízmentes adagolt tációs Fermentmentes citromsav n-hexaidő, Fermentcitromsav g/l bedekán napoklé pH1 hozam adagolt súly0/0 ban lé pH1 súlyo/o vizes térfogat 28,6 9 2,5 19,5 78,0 13 2,5 25 100,0 33,3 9 2,6 18,5 92,8 13 2j5 20,8 104,0 50,0 9 2,5 9,5 95,2 13 2,5 11,0 110,4 1 = fermentáció végén. 5. példa: Fermentációs sorozatkísérletekben citromsavat állítunk elő különböző szénihidrogének és Candida lijpolytica felhasználásával, ahol vizes közegként az 1. példa szerinti összetételt állítjuk be. Az aerob fermentációt keverés közben 28 C°-on 9 napiig végezzük ((körrázó berendezésben) 210 fordulatszám/perc sebességgel. A citromsav jelenlétét kvalitatív úton az előzőekben ismertetett papírkromatográfiás módszerrel állapítjuk meg. Citromsav jelenléte esetén a pontos mennyiséget szintén az előzőekben leírt piridin-ecetsavarthidriides módszerrel határozzuk meg. A kapott eredményeket az alábbi V. tábla-IV. táblázat 40 zatfoan részletezzük. V. táblázat BeFermenVízVízmentes 40 zatfoan részletezzük. V. táblázat adagolt n-tfiexatációd Fer-mentes citromsav citromsav g/l beadagolt n-tfiexaidő, mentlé pHi mentes citromsav citromsav g/l beTenyészet Candida lipolytica1 dekán napokmentlé pHi hozam adagolt ATCC 8661 súly% ban mentlé pHi sulyo/o vizes térSzubsztrátum3 Vízmentes citromsav fogat 45 Fermentlé pH2 gA súlyo/o 2 7,0 0 0 Fermentlé pH2 gA hozam 0,99 2 7,0 0 0 4 7,0 62 6,2 1-tetradecén 3,7 12,0 19,4 1,96 3 7,0 0 0 50 1-deeén 6,0 2,6 4,4 5 3,« 70 14,0 1-hexadecén 3,6 16,4 26,2 3,85 5 4,2 26 10,4 1-olktadecén 3,5 21,0 33,2 7 3,1 9,2,5 37;0 n-oktadékén 2,7 51,i2 82,2 5,66 9 2,8 818 52,8 1-dodecén 3,8 13,8 22,6 11 2,7 94,5 56,8 55 n-dodekán 3,0 37,0 66,1 7,4 9 2,8 71 56,8 55 n-tridekán 3,1 35,6 58,7 11 2,6 78 62,4 n-ihexadekán 2,8 48,0 77,4 9,1 9 2,7 56 56,0 n-dekán 3,0 44,0 75,2 11 2,7 64,8 64,8 nnheptadekán 3,0 53,2 85,5 13 2,6 81,6 81,6 Conoco 16,7 9 2,6 36,8 73,6 60 Cl 0-4316* 3,0 36,0 75,5 11 2fi 38 76,0 Conoco 13 2,5 43,2 86,4 G12—C14* 2,9 42,4 70,0 23,2 9 2,5 24,3 72,8 Conoco 13 2,5 28,8 86,4 65 C14—iGl-64 2,9 56,0 90,0 7