159338. lajstromszámú szabadalom • Eljárás helyettesített (N-p-halogénbenzoil-3-indolil)-ecetsavak előállítására
9 150338 10 A termék olvadáspontja 165 C° és ez az olvadáspontérték nem mutat olvadáspont-csökkenést akkor sem, ha a kapott terméket standard 1 -p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3--ecetsavval elkeverjük. A termék LR. és U.V. spektruma azonos a standard mintáéval. 9. példa: A: 2,0 g l-p-klórbenzoil-2-metil-5^metoxi-indol-3-etanol-benzilétert 50 ml etilacetátban feloldunk és az oldatot 0,4 g aktívszénre felvitt palládiumkatalizátor jelenlétében hidrogén légkörben hidrogénezzük. Az elméleti mennyiségű hidrogéngázt a reakcióelegy kb. fél óra leforgása alatt abszorbeálja, a használt katalizátort kiszűrjük és az elegyet vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot izopropanolból átkristályosítjuk. A kapott termék infravörös spektruma megegyezik az l-p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3-etanol standard mintáéval. B: 5,0 g l-ip-klórbenzoil-2^metil-5-rnetoxiindol-3-etanol-tritiléter és 1,0 g aktívszénre felvitt palládiumkatalizátor keverékét szobahőmérsékleten hidrogéngázzal kevéssel az atmoszférikus nyomás feletti értéken rázogatunk. A számított mennyiségű hidrogén abszorpciója után (ez kb. 3 óra hosszat vesz igénybe) a katalizátort kiszűrjük és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A vákuum-desztilláció maradékát izopropanolból átkristályosítjuk. Az átkristályosított termék analitikai adatai megegyeznek az l-p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3--etanol standard mintáéval. C: 2,0 g l-p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3-etainol-t-foutilétert 8 ml vízmentes trifluorecetsaviban 1 óra hosszat 10 C°-on állni hagyunk. A felhasznált reagenst a 6. példa szerint 4-ketopentanol t-'butiléterének felhasználásával vagy a 8.B példa szerint nátrium-p-butoxiddal készítjük. A reagens oldatát állás után 30 ml jeges vízre öntjük és a reakcióelegyet kloroformmal extraháljuk. A kloroformos kivonatokat vízzel, telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. Vízmentes nátriumszulfát felett történő szárítás után az oldószert vákuumban ledesztillálj'ük és a maradékot izopropanolból átkristályosítjuk. A kapott termék infravörös spektruma megegyezik az l-p-klórbenzoil-2-metil-5--metoxiindol-3-etanol standard minta analízisértékeivel. D: 5,0 g l-p-klórbenzoil-2-métil-5-metoxiindol-3-etanol-tritilétert 50 ml ciklohexánban félholdunk és hideg vízzel való hűtés közben vízmentes sósavgázt vezetünk az oldatba. A sósav bevezetés után a reakciókeveréket 25 C°-on 3 óra hosszat állni hagyjuk, majd 250 ml kloroformot adunk hozzá. A kloroformos kivonatot vízzel, telített nátriumhidrogérikarbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A desztillációs maradékot 100 ml forró petroléterben felvesszük. Az oldatot 10 Cc -ra hűtjük le és a kikristályosodott terméket 5 szűréssel elkülönítjük. A petrolétert vákuumban ledesztillájuk és a desztillációs maradékot izopropanolból átkristályosítjuk. A kapott termék infravörös spektruma megegyezik az 1-p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3-etanol 10 standard mintáéval. E: 28,4 g l--p-klórbenzoil-2-metil-5-metoxiindol-3-etanolt 100 ml ecetsavban feloldunk és keverés közben másfél óra leforgása alatt 5 15 C°-on 80 ml krómsavas oldatot adunk hozzá. (A krómsavas oldatot úgy készítjük, hogy 20,1 g krómsavat 20 ml vízben feloldunk, majd az oldatot 80 ml ecetsavval hígítjuk.) Az oxidációs reakcióelegyet szobahőmérsékleten éjjelen 20 át állni hagyjuk, 300 ml vizet adunk hozzá és a kivált szilárd anyagot leszűrjük, majd t-butanolból átkristályosítjuk. A termék infravörös spektruma megegyezik az l-p-klórbenzoiI-2--metil-5-imetoxi-indol-3-ecetsav standard min-25 táéval. 10. példa: 30 A: 46 g 5.A példa szerinti N|-p-klórbenzoil-p-metoxifenil^hidrazin-hidrogénklorid és 20 g levulinsavnitril keverékének 250 ml 2 n etanolos. sósavban készített oldatát gőzfürdőn pár percig melegítjük. Ekkor exaterm reakció kö-35 vetkezik be, eközben pedig ammóniumklorid válik ki. A reakciókeveréket hevítés nélkül visszafolyató hűtő alatt gyengén forraljuk, míg az exoterm reakció lezajlik. Ezután visszafolyató hűtő alatt 30 percig melegítjük, végül 40 vákuumban kb. 80 ml-re bepároljük. Bepárlás után 400 ml vízzel hígítjuk és éterrel extraháljuk. Az éteres kivonatot először telített vizes nátriumhidrogénkarbonát^oldattal, majd vízzel mossuk, végül szárítjuk. A vízmentes olda-45 tat leszűrjük, majd sötétszínű sziruppá betöményítjük. A kapott szirupot savval mosott alumíniumoxidos adszorbensen kromatografáljuk és fokozatosan 1 : 9—1 : 1 arányban hígított éter^petroiléter-eleggyel eluáljuk. Az eluálás 50 eredményeképpen nyers l-ípnklárbenzoil-S^metü-5-metoxiindol^3^aoejtonitrilt kapunk. B: A példában használt niitriláz-enzimet zab (Avenia) leveleiből, árpából :(Hordeium), Brassi-55 ca-törzshöz tartozó növényekből vagy Musacede-ből 0,1 mólos foszfátpufferrel 7,5 pH-értéken extraháljuk. Az extrakciónál 10—50 g anyagot 100 ml puffer el extralhálunk. l-p-)k;lórbenzail-2^m'etil-5j metoxi-3 , -indolil-iace-60 tonitrilt olyan mennyiségű metanolban oldunk, hogy az enziim-szubsztrátum-elegyben a metanol végső konícentraciójia 10—i30fl / 0 legyen. A végső szubisztrátuim-k'oinoenitrálciót 0,1—10% közötti értékre állítjuk be. A hidrolízisit 25—37 C5 C° hőmérsékleten 1—6 óra hosszat végezzük. 5
