158956. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-halogén-7-dexoxi-1'-demetil-linkomicinek előállítására
11 158956 (3. táblázat folytatása) 12 Táptalaj Felület Fonák Egyéb Húsleves táptalajok: Nitrátos tenyésztési Szintetikus nitrát Lakmuszos tej Enyhén rózsaszínes fehér légmicéliium a kultúra felületének pereimén Szürkés rózsaszínű léganicélátuim, vastag szürkészöld felületi gyűrűn Sárga-sárgásbarna pigment. Alul pelyhes növekedés A nitrátot nitritté redukálja Alul tömött tenyészet A nitrátot nitritté redukálja Nem paptanizál Nem redukál A szín kékesszürke, pH 7 A jelen találmány szerinti foiokoiwetrziós eljárást előnyös módon olyan műveleti körülmények között és oly reakiciólépésekbel valósítjuk meg, melynek a biokonverziókfcal foglalkozó szakmabeliek' számára ismertek, lásd pl. Murray és mások: 2 ©02 769 ós 2 735 800 számú USA szabadalmának leírását. A találmány gyakorlati megvalósítása során a foiokonverziót elvégezhetjük a mikroorganizmus növekedő Vagy nyugalomban levő tenyészetével, spórákkal,' mosott sejtekkel vagy a mikroorganizmus enzimjeivel. A jelen találmány céljaira és annak gyakorlati megvalósítására a mikroorganizmust olyan táptalajon vagy táptalajíban tenyésztjük, amely fejlődésének kedvez. A táptalajban nitrogénforrások és szénforrások lehetnek jelen és a konverzió folyamán a szükséges mennyiségű steril levegőt a szokásos módszerekkel, így pl. a táptalaj nagy szabad felületével, vagy a szubmerz kultúrán keresztül vezetett levegővel biztosítjoik. Az asszimilálható formában levő nitrogént az ilyen eljiárásokban rendesen alkalmazott forrásokból biztosítjuk; ilyenek pl. a kukoricalekvár, gyapotrnagiliszt, szójaliszt, élesztőkivonatok, peptan, oldható vagy oldhatatlan növényi vagy állati protein, laktalbumin, kazein, tejsava, szeszdesztillációs maradék, aminosavak, nitrátok és anamóniuímvegyületek, mint pl. ammóniumJtartarát, -nitrát, ^szulfát és hasonlók. A szenet ugyancsak a biokonverziós eljárásokban szokásosan, használt forrásokból biztosítjuk, ilyenek a .szénhidrátok mint pl. a glükóz, íruktóz, szacharóz, laktőz, maltóz, dexttrinek, keményítők; továbbá a húskivonatok, peptonok, aminosavak, proteinek, zsírsavak, glicerin, és hasonlók.' Ezeket az anyagokat használhatjuk ^tisztított állapotban koncenttrátumok formájában, mint pl. savókoncentrátum, kukoricalekvár, gabonaosirizek, gyapotmagliszt és 25 30 35 hasonlók, vagy pedig alkalmazhatjuk a fentiek keverékét is. Az előbbi szénforrások közül sok nitrogénforrásként is szolgál. A táptalaj pH-ija a beoltás előtt a kívánalmaknak megfelelően 4—'8 pH között lehet, azonban ennél nagyobb' vagy kisebb pH-t is alkalmazhatunk. A mikroorganizmus növekedése szempontjából előnyös a 215—>3Í2 C° közötti hőmérséklettartomány, de ennél magasabb vagy alacsonyabb hőmérséklet is alkalmas egy viszonylag széles tartományon belül. Az I bépletű szubsztrátuimot hozzáadhatjuk egyszerre a tenyészethez a mikroorganizmus növekedési szakaszában, vagy részletekben a konverziós szakaszban, vagy pedig adhatjuk a táptalajhoz a sterilizálás vagy a beoltás előtt 40 vagy után, mimellett a pH-nak és/vagy a hőmérsékletnek beállítására szükséges intézkedéseket foganatosítjuk, az alkalmazott szuibsztrátum stabilitásától függően. Előnyösen, de ez nem feltétlenül szükséges, a szubsztrátum kon-45 centrációja a táptalajban kíb. 50—1500 mg/liter. A találmány gyakorlati megvalósítása során kényelmesnek bizonyult, ha a szulbsztrátumot a táptalajhoz vízben oldható savaddiiciós só formájában adjuk. 50 A hőmérséklet a fermentáció alatt ugyanaz lehet, mint amelyet a mikroorganizmus aktív növekedéséhez vagy enzimjének aktivitásához az életfenntartási körülményeket csak az em-55 lített határokon belül kell fenntartani. A 20— 35 C° közötti hőmérséklettartomány előnyös. Kb. 6—8 pH általában előnyös a mikroorganizmus növekedéséhez a biokonverzió alatt. A levegőztetést megvalósíthatjuk felületi tenyész-60 téssel, vagy pedig előnyösen szubmerz fermentációs körülményeket alkalmazunk levegőbefúvatással, a szakmában jól ismert módszereknek megfelelően. Jelentős mértékben változó idő szükséges az alkalmazott mikroorganizmus g5 enzimrendszere által okozott demetílezéshez. A 6