158808. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oxitetraciklin tisztítására
5 158808 6 A találmányunk tárgyát képező eljárás segítségével igen kis, mindössze 3—5%-os veszteséggel kiváló minőségű oxitetraciklin-dihidrátot állíthatunk elő. Az oxitetraciklindihidrát biológiai aktivitása igen nagy, 963—980 BE/mg (Large plate módszerrel meghatározva). F. Kavanagh: Analytical Microbiology, 1963. (Academic Press, New-York, London) Eljárásunk előnye, hogy az oxitetraciklingyártásnál közvetlenül képződő oxitetraciklinklórhidrátból kiindulva, vizes közegben igen jó kitermeléssel nagytisztaságú oxitetraciklin-dihidrát előállítását teszi lehetővé. Eljárásunk további részleteit a példákban ismertetjük, anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk. Példák 1. 50 g 80%-os oxitetraciklin-klórhidrátot 3 ml jégecet jelenlétében 30 C°-on 50 ml desztillált vízben keverés közben oldunk. Oldódás után 20 ml formamidot adunk hozzá, m'koris exoterm reakcióban (a -Mmérséket 5 C°-al emelkedik) kristályosodás indul meg. A kiváló kristályokat tartalmazó elegyet sós jéggel lehűtjük, zsugorított üvegszűrőn szűrjük, kevés anyalúggal mossuk és 30 ml jéghideg acetonban szuszpendáljuk, majd vákuumban leszívatjuk és 2X20 ml acetonnal fedjük. Vákuumban 40 C-on történő szárítás után sárga 164 C°-on olvadó tűkristályok alakjában 40,6 g oxitetraciklin-klórhidrátformamid molekulavegyületet kapunk. (Az elméletinek 87,3%-a). 2. 40,0 g oxitetraciklin-klórhidrát-formamid molekulavegyületet 100 ml metanol és 100 ml desztillált víz elegyében oldunk. A. szennyezéseket szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet 30 g ammóniumacetát 50 ml desztillált vízzel képezett oldatához adjuk. Az elegyet 1 órán át keverjük, majd a kiváló kristályokat szűrjük, vízzel és acetonnal mossuk. Vákuumban 40 C°-on végrehajtott szárítás után 34,0 g oxitetraciklin-dihidrátot kapunk. O. p. 185 C° (bomlás). Biológiai aktivitás: a vízmentes bázisra számítva 969 BE/ mg. (Kitermelés: 96,3%) 3. 100,0 g nyers 84%-os oxitetraciklin-klórhidrátot 100 ml desztillált vízzel és 10 ml 85%-os hangyasavval néhány percen át 30 C°-on kezelünk. A reakcióelegyhez oldódás után 40 ml formamidot; majd 12 g vegytiszta konyhasót adunk. Az elegyet 15 percen át 30—35 C°-on keverjük, miközben a formamidos molekulavegyület kristályosodása megindul. Ezután az elegyet keverés közben 10 percen át 10 C°-on, majd 20 percen keresztül 0 C°-on hűtjük. A kiváló sárga kristályokat szűrjük, anyalúggal, majd 80 ml jéghideg acetonnal feliszapolva mossuk. A kapott molekulavegyület nedves súlya 110—140 g. A terméket 400 ml 25 g ammóniumacetátot tartalmazó metanolban oldjuk, az oldatot szűrjük és 40 ml 2,5 g ammóniumacetát-tartalmú metanollal mossuk. 0.2 g Selecton B2-t és 0,5 g aszkorbinsavat 5 1200 ml desztillált vízben oldunk és a molekulavegyület metanolos oldatát lassan beadagoljuk. A reakcióelegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a kiváló oxitetraciklindihidrátot szűrjük, előbb 2X50 ml desztillált vízben, majd 50 10 ml acetonban felszuszpendálva mossuk és 30 ml acetonnal fedjük. Vákuumban 40 C°-on történő szárítás után 82,0—86,0 g 187—188 C°-on olvadó (bomlás) oxitetraciklin-dihidrátot kapunk. Biológiai aktivitás: 963—970 BE/mg (vízmentes 15 bázisra számítva). (Kitermelés: 94,2—99,4%). 4. 150,0 g nyers 80%-os oxitetraciklin-klórhidrátot 300 ml 5%-os vizes-hangyasavban szobahőmérsékleten oldunk. Az oldatot 1,5 g csont-20 szénnel 15 percen át derítjük, majd szűrjük. A szürlethez 50 ml formamidot. adunk, 30—35 C°-ra melegítjük, majd keverés közben 50,0 g vegytiszta konyhasót adunk hozzá. Az elegy hőmérséklete 2—3 C°-al emelkedik és a konyhasó 25 oldódása után néhány perccel megindul a molekula vegyület kristályosodása. Az elegyet 15 percen át 35—38 C°-on keverjük, majd sós jéggel 0 C°-nál alacsonyabb hőmérsékletre hűtjük és 15 perces keverés után vákuumban leszívatjuk. 20 A kapott sárga kristályokat 40 ml 20%-os 0 C hőmérsékletű nátriumklorid-oldattal fedjük, 120 ml 0 C°-os acetonban szuszpendálva mossuk, majd 30 ml jéghideg acetonnal fedjük. A nedves termék súlya 212 g. A molekulavegyüle-35 tet 300 ml desztillált víz, 300 ml metanol és 10 ml 85%-os hangyasav elegyében oldjuk és szükség esetén szűrjük. 1000 ml jeges vízben 0,3 g Selecton B2 -t és 0,5 g aszkorbinsavat oldunk, majd 50 ml 85%-os 40 hangyasavat adunk hozzá. A molekulavegyület oldatát keverés közben hozzáadjuk és az oldat pH-ját 80—-100 ml tömény ammóniumhidroxid oldattal vagy 30—35 g ammóniumkarbonáttal 4—5-re állítjuk be, miközben az oxitetraciklin-45 dihidrát kiválik. Az elegyet egy órán át keyerjük, a kiváló terméket vákuumban leszívatjuk, 2X100 ml vízben, majd 100 ml acetonban szuszpendálva mossuk és 50 ml acetonnal fedjük. A terméket 40 C°-on 12 órán keresztül szárít-50 juk. Az ily módon kapott 123,3 g oxitetraciklindihidrát olvadáspontja 188 C° (bomlás); biológiai aktivitása 972 BE/mg. 55 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás oxitetraciklin tisztítására formamid és szerves sav felhasználásával azzal jellemezve, hogy az oxitetraciklin-klórhidrátot vizes kö-60 zegben reagáltatjuk a formamiddal és szerves savval előnyösen 30—40 C°-on, majd az ily módon kapott (I) képletű molekulavegyületet (ahol R jelentése hidrogénatom, vagy kis szénatomszámú alkilcsoport) izolálás után vizes vagy vi-65 zes alkanolos közegben megbontjuk. 3
