158690. lajstromszámú szabadalom • Eljárás száj- és körömfájás elleni oltóanyag előállítására
158690 6 Az első tenyésztés végén kapott folyadék: Komplementer anyag rögzítés: 1/4 Fertőzöttség foka: 108 > 4 DECP 50/ml DVC 50 = 0,20 ml A második tenyésztés végén kapott folyadék: Komplementer anyag rögzítés: 1/2 Fertőzöttség foka: 109 -1 DECP 50/ml DVC 50 = 0,11 ml Egyesített folyadékelegy: Komplementer anyag rögzítés: 1/4 Fertőzöttség foka: 109 -1 DECP 50/ml DVC 50 = 0,08 ml A DVC 50 megjelölésen a megfertőzött tengerimalacok 50%-át vakcin aló oltóanyag-dózist értjük (M. Roumiantzefif, J. Fontaine, C. Stellmann és C. Macikowiak: Ext. Rev. Med. Vet., 1905 augusztus-szeptember, 116, 597—607 oldal). A komplementer-anyag rögzítést a hígítása határok megjelölésével adtuk meg, ahol Kolmei félikvantitaitív módszere szerint (Etude sérologique des types et vaniiantes du virus aphteux par la reaction de fixation diu complement — állatorvosi doktori disszertáció, R. Camand, Lyon, 1953, Bőse. edit.) a komplementer anyag teljes rögzítése bekövetkezik. Megállapítható, hogy a második tenyésztés során kapott folyadék felhasználhatóság tekintetében az első tenyészetből származó folyadéknál jobb, és hogy az egyesített folyadékelegy tulajdonságai az első tenyésztés során kapott oldaténál kedvezőbbek. A találmány szerinti és a hagyományos eljárás összehasonlítására, és az új eljárás előnyeinek igazolására az előbbiekben megadott körülmények között 18 órán át „O Flandre 47'' vírust tenyésztettünk. Az egyetlen tenyésztés befejeztével a nyelvhámszövetet pufferoldattal extraháltuk, majd a hámszövetet szétdörzsöltük. A következő eredményéket kaptuk: Tenyészoldat Komplementer anyag rögzítés: 1/8 Fertőzöttség foka: 108 > 3 DECP 50/ml DVC 50 = 0,3 ml Tenyészoldat + extraktum Komplementer anyag rögzítés: 1/8 Fertőzöttség foka: 108 > 2 DECP 50/ml DVC '50 = 0,15 ml Megállapítható, hogy az első tenyészetből kapott folyadékot a nyeivfhámszövet-extrafcítummal elegyítve a virusszuszpenzáó tulajdonságai romlanak. Ezzel ellentétben, az első tenyésztés során kapott folyadékot a második, a találmány szerint végrehajtott tenyésztés táptalajával elegyítve az elegy tulajdonságai javulnak. A találmány szerinti eljárással kapott viru-5 lens folyadékot klb. 4 C°Hra hűtjük, előnyösen .kloroformmal elegyítjük, és 12:—24 órán át keverjük. A csapadékot centrifugálással választhatjuk el, majd a virust „C 5" szűrőlemezen kiszűrjük. 10 A szűrletet az oltóanyag előállítása céljából inalktíváljuk. A szűirlet inaktiválását önmagában ismert módon végezhetjük. Eljárhatunk pl. úgy, hogy a vírusokat alumíniumhidroxidon adszorbeáljuk, 15 és az inaktiválást formaldehid és melegítés együttes alkalmazásával végezzük. Nyilvánvaló, hogy a találmány szerinti eljárás alkalmazásával a száj- és körömfájás elleni oltóanyag előállításának kapacitása jellen-20 tősen megnövelhető. Az új eljárással azonos mennyiségű nyelvhámszövet felhasználásával legalább kétszeres mennyiségű oltóanyag állítható elő, s a kapott oltóanyag a hagyományos úton előállított ter-25 mékkel összehasonlítva kedvezőbb tulajdonságokkal rendelkezik. Szabadalmi igény-pontok,: r(. 1. Eljárás száj- és körömfájás ellenei oltóanyag előállítására, amely eljárás során száj-és köröimlfájás elleni virust marthanyelv-hámszövetet tartalmazó táptalajban tenyésztünk, azzal jellemezve, hogy miután a virus segítségével egy első beoltást végeztünk, a virust tenyésztjük, majd az első tápoldatot elkülönítjük, ezt követően ugyanazt a nyelvhámszövetet egy második táptalajjal hozzuk érintkezésbe, a virust ismét tenyésztjük, a második táptalajt elkülönítjük, adott esetben új táptalajokkal további tenyésztéseket végzünk, majd a virus-szuszpenziókat tartalmazó táptalajokat inaktíváljuk, és így oltóianyagot állítunk elő. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás fogánatosítási módja, ázzál jellemezve, hogy a virus 45 tenyésztést az első lépésben 15—20 órán át végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítása módja, azzal jellemezve, hogy a vírus tenyésztését a második táptalajban 3—13 50 órán át végezzük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganato-_ sítési módja, azzal jellemezve, hogy a különböző tenyésztések lefolytatására használt tápoldatokat az oltóanyagot eredményező inalktí-55 válás előtt egyesítjük. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás fogánatosítási módja, azzal jellemezve, hogy táptalajként Frenkel-táptaÜBljt használunk. 6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti 60 eljárás fogánatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyésztést 37 C° hőmérsékleten végezzük. 35 40 A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7108181. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23.
