158381. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillin-vegyületek előállítására
13 158381 14 percig —10 C°-on keverjük, majd —40 C°^ra hűtjük és a kicsapódott nátriumkloridot szűréssel eltávolítjuk. A —<15 C°-on erősen kevert, vegyes anhidridet tartalmazó szűrlethez egyszerre előre hűtött (0 C°) 2,16 g (0,01 mól) 6- 5 aminopeniicillánsav és 1,68 g (0,02 mól) NaHC03 50 ml vizes oldatát adjuk. Kb. 5 percig erős széndioxid fejlődés jelentkezik. A hőmérsékletet 20 percig —10 C°-on vagy az alatt tartjuk, majd hagyjuk, hogy 30 perc alatt a hőmérsék- 10 let szobahőmérsékletre (22 C°) emelkedjék. Az oldathoz 50 ml vizet adunk és az acetont 20 C°-on csökkentett nyomáson lepároljuk. Kétszer 200 ml éterrel extrahálunk, majd ezeket eldobjuk. A vizes fázis pH-ját 6 N HCl-val 2-re 15 állítjuk be, és annyi acetont adunk hozzá, hogy az egész anyagot oldatban tartsuk. Az oldatot 30 percig 22 C°-on állni hagyjuk, majd kétszer 3Ö0 ml éterrel extraháljuk és ezeket eldobjuk. A pH-t 20%-os NaOH-dal 4,7-re állítjuk be és 20 az oldatot 20 C°-on csökkentett nyomáson 25 rhl-re pároljuk be. Kis mennyiségű oldhatatlan anyagot leszűrünk, és a szűrlethez 25 ml acetont adunk. A pH-t ezután 20%-os NaOH-dal 8,8-ra, majd 3 óra múlva 40<y0-os H 3 P0 4 -val 25 3-ra állítjuk be, ezután kétszer 100 ml etilacetáttal extrahálunk. Az egyesített etilacetátos fázisokat egyszer 20 ml vízzel mossuk, majd szűrjük és 15 C°-os csökkentett nyomáson bepárolj uk kb. 20 ml-ire. A kristályos terméket 30 leszűrjük, (1 : 1 tf.) aceton-víz elegyben felszuszpendáljuk 10 percen át és ismét szűrjük. Termelés 280 mg, a termék 102 C°-on bomlik. • A meghatározott infra-sávok és funkciós csoportok a következők: A sávok Funkciós csoportok: frekveneiáj a: savas OH— 4 3600=2400 aromás OH— aromás CHss és NH= CH3 — és CH = 2990 és 2950 /3-laktám karbonil 1870 savas karbonil 1730 imidazolidinil karbonil 1710 35 40 45 50 1610, 1516 1735 Az NMR kémiai eltolódásai (p. p. m-ben "kifejezve a következők voltak: aromás protonok 7,7—6,6 /J-laktám hidrogének 5,6 ; 5,15 a benzolgyűrűtől távoli karbonil^csoporttal szomszédos. CH:^4,7 a többi karbonilcsoporttal szomszédos CH= 4,4 geminális dimetilek 1,7 1,6 1,55 Ezek az értékek megegyeznek a feltételezett szerkezettel. Összetétel Clg H 22 CIN s i0 5 -re: Számított: C: 51,82%, H: 5,04%; Talált: C: 48,39%, H: 5,28%. Megállapítottuk, hogy a termék a Staphylococcus aureus Smith-t 0,063 mcg/ml koncentrációban, a Streptococcus pyogenes-t 0,004 meg/ 'ml koncentrációban, a Staphylococcus aureus BX—1633-2-t (benziüpenieillin rezisztens törzs) 63 mcg/ml, az Escherichia coli Juhl-t 2 meg/ /ml, a Salmonella enteritidis-t 0,125 mcg/ml, a Diplococcus pneumoniae-t pedig 0,008 meg/ ml koncentrációban inhibitálja, egerekbe orálisan adagolva Staph, aureus Smith-re 0,5 mg/ /kg CD50 értéket mutat. 5. példa: 600 mg 6-[D-(—)-2,2-dimetil-4-(3-kló.r-4-hidroxi-fenil)^5-oxo-imidazolidinüppeniciriánsav 5 ml térfogatú kevert vizes szuszpenziójához addig adunk 20%-os NaOH oldatot, míg a pH 7 lesz. A pH-t 4 órán át 1 N HCl időnkénti adagolásával 7 körül tartjuk, majd 1 N HCl-val 4,5-re állítjuk be és további egy órán át ezen az értéken tartjuk. A keletkezett kristályos csapadékot leszűrjük, vízzel mossuk és vákuumban P20 5 felett szárítjuk. Így 10:2 mg 6-[D-(—)-a-ammo-a-(3-klór-4-hidroxi^fenil)-aoetamido]-penicillánsav keletkezik. Ez ER sávokat mutat 1770, 1680 és 1600, cm_1-nél, melyek sorrendben a ß-laktamnak, az amidnaík és a kariboxilát^ösoportnak felelnek meg. NMR kémiai eltolódások: 5,48 ppm (/?-laktam), 1,4 ppm (geminális dimetilek) és 7,7— 6,6 ppm (három aromás proton). Ezek az értékek megegyeznek a feltételezett szerkezettel. A termék Staphylococcus aureus Smith-t 0,032 mcg/ml koncentrációban, Streptococcus pyogenes-t 0,004 mcg/ml, Staphylococcus aureus BX—1633-2-t (benzilpenicillin rezisztens törzs) 63 mcg/ml, Escherichia coli Juhl-t 4 mcg/ml, Salmonella enteritidis-t 0,125 mcg/ml, Diplococcus pneumoniae-t pedig 0,004 mcg/ml koncentrációban inhibitál, egerekbe orálisan adagolva Staph, aureus Smith-tel szemben 0,5 mg/kg CD50 értéket mutat. A találmányt a fentiékiben előnyös eljárási változatok kapcsán példaképpen ismertettük. Szakemberek számára magától értetődő, hogy számos egyéb változat is lehetséges anélkül, hogy túllépnénk az igényelt oltalmi kört. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az I képletű vegyület a II képletű aceton addukt, valamint ezek nem mérgező, gyógyászatilag alkalmazható sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy ,ra ,űrt, 35 a: 40 3 45 50 55 60 65 aromás C = C aromás OH— 7
