158381. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillin-vegyületek előállítására
158381 8 nél a gasztrointesztinális traktusból a véráramba történő abszorpcióját hasonlítottuk össze vérszint meghatározással. A vizsgálatot 25 mg/kg penicillinnek 5%-os NaHC03 oldat alakjában egerekbe történő perorális adagolásával végeztük. Különböző időközönként a penicillin-adagolás után az egerekből vérmintákat, vettünk. Minden minta penicillintartalmát agarlemezes módszerrel határoztuk meg. Az átlagos vérszintek a következők voltak: Vérszintek mcg/mg A beadagolás után élteit idő (óra) 6-[D-(—)-i(z--amino-a-<(3--klór-4-hidroxi-fenil)-acetamido]-penicillánsav (hidroklorid) -aiminobenzilpenicillin (trihidrát) 1/2 1 2 3 1/2 3,68 . 2,21 0,7 (0—0,33) 2,2 1,82 0,56 (0—0,28) A fenti eredmények mutatják, hogy a találmány szerint előállított penicillinek jóval magasabb vérszintet eredményeznek. Ez az elért, előre nem látott, a terápiai aktivitásban és vérszintben az ismert penicillinekkel szemben jelentkező nagymérvű emelkedés legjobban bizonyítja a jelentős hatást. A kiindulási anyag előállítása: A találmány szerinti vegyületek előállításánál 4Q kiindulási anyagként használt D-<(—)-2-i(p-hidroxifenilj-glicint az (A) reakcióegyenletek alapján állítjuk elő. I. dl-2-(p-metoxifeml)-glicin 19,6 g (0,4 mól) NaON 80 ml kevert vizes oldatához 23,6 g (0,450 mól) NH4 CL-4 és 20 ml koncentrált NH4 OH-t, majd ezután 54,5 g (0,4 mól) ánizsaldehid 160 ml metanolos oldatát adjuk és a hőmérsékletet két órán át 37 C°-on tartjuk. A metanolt vákuumban lepároljuk és a maradék elegyet kétszer 150 ml metil-izobutiliketonnal (MIBK) extraháljuk és az extraktumokat egyesítjük. Az egyesített MIBK fázisokat egyszer 30 ml vízzel mossuk, majd 240 ml 6 N HCl-t adunk hozzá, jól összekeverjük és a MIBK-t vákuumban lepároljuk. A kapott maradékot két órán át visszafolyató hűtő alatt (oldatban) forraljuk. A forró oldathoz 100 ml vizet adunk, majd 8 g színtelenítő szenet; 10 perces enyhe reflux után a szenet leszűrjük és 50 ml forró vízzel mossuk. Az egyesített forró szűrleteket keverjük és koncentrált NH4OH-chl kezeljük, míg a pH 5—6 lesz (pH papír). Az elegyet ezután 5 C°-,ra hűtjük, egy óra múlva a kristályokat leszűrjük és kétszer 100 ml vízzel mossuk. A nyirkos anyagot ezután 250 ml 5 vízben felkeverjük és lassan 50%-os NaOH-t adunk hozzá, míg a termék fel nem oldódik. Ezután kétszer 300 ml éterrel extraháljuk és a kivonatokat eldobjuk. A pH-t hűtés közben 6 N HCl-val 5,5-re állítjuk be. Egy óra múlva 10 a terméket leszűrjük, háromszor 100 ml vízzel mossuk és levegőn szárítjuk. Termelés 40 g; bomlás 244 C°, 230 C°-on szublimálás közben. 15 II. dl-2-(p-metoxifenil)-N-(klóiraoetil)-glicin 36 g (0,2 mól) dl-2-(p-metoxifenil)-glicin kevert 500 ml vizes oldatához 8 g (0,2 mól) NaOH szemcsét adunk és amikor tiszta oldat keletkezett, az oldatot 5 C°->ra hűtjük és egyszerre élénk keverés közben 68,2 g (0,4 mól) meleg klóracetanhidridet adunk hozzá. Ezután 10—15 perc alatt 16 g (0,4 mól) NaOH 100 ml vizes oldatát adjuk hozzá. További 20%-os NaOH-ot adunk hozzá, ha szükséges, hogy a pH-t 1,5 órán át 9 értéken tartsuk. Ezután a pH-t 40%os H3 P0 4 -val 2-re állítjuk be. A termék azonnal kristályosodik, leszűrjük, vízzel mossuk és etanol-víz-elegyből átkristályosítjuk. Így 38 g terméket kapunk. Op.: 182—'183 C°. Összetétel CnHiaClNCVre: 20 25 30 35 45 50 55 60 65 Számított: C: Talált: C: 51,21 %, H: 4,69%; 51,49%, H: 4,90%. III. D-(—)-2-i(p-metoxifeinil)-N-(klóracetil)-glicin és L-(-r-)-2-(p-metoxi-íenil)-glicin 800 ml 37 C°-on kevert vízhez 38 g (0,148 •mól) dl-2-"(p-metoxifenil)-.N-í(klóraicetil)-glicint adunk, majd pH 7,8-ig NH^QH-t csepegtetünk hozzá. A keletkezett oldathoz 2 g Hog Kidney aeilázt (Sigma Chemical Company) adunk és a keverést 37 C°-on (belső) 21 órán át folytatjuk. A szilárd anyagot, amely nyers L-(+)-2-(p-metoxifenil)-glicint tartalmaz, leszűrjük, kétszer 100 ml vízzel mossuk, majd az egyesített szűrletek pH-ját jégecettel 4-—5-re állítjuk. Ezt az oldatot gőzfürdőn 30 percig 5 g színtelenítő szénnel melegítjük és szűrjük. A szenet 50 ml meleg vízzel mossuk és az egyesített szűrleteket lehűtjük, majd 40%^os H3PO.;val pH 2-re savanyítjuk. Egy órás 0 C°-os hűtés után a kristályos terméket leszűrjük és háromszor mossuk hideg vízzel, majd levegőn szárítjuk. Termelés 16 g. Egy második négyszeres mennyiségű anyagokat tartalmazó kísérlet 83 g-os (87%) termelést ad. Op.: 170—171 C°. [iC£ ]25 D = _i93° (c = lo/07 etanol). Összetétel C1 iH 12 ClN0 4 Jre számítva: Számított: C: 51,21%, H: 4,69%; Talált: C: 51,50%, H: 4,99%. 4
