158344. lajstromszámú szabadalom • Eljárás W847-antibiotikumok előállítására
158344 ugyanazok a makroszkopikus jellemzők érvényesek, mint az előző törzsre, kivéve a színt. A telep felszínének színe fekete. Mikroszkópon a telep hosszú elágazó, kb. 0,6 fi átmérőjű filamentekből álló szabályos micéliumot mutat. 5 Ebben a törzsben azonban a spórázás igen bőséges, a spórák statisztikusán oszlanak el az égés mieéliumban. A spórák tojásdadok vagy gömbölyűk, 0,7—1,0 JX átmérővel, és érett állapotban sötétbarnák. 10 A Micromonospora sp. W847 telepekre jellemző továbbá szaporodásuk jellege aerób körülmények között különféle táptalajokon. Az 1. táblázatban összefoglaljuk a Micromonospora sp. W847 szaporodási jellegzetességeit néhány gya- 15 koribb táptalajon. A telepeket általában 14 napon korukban (24—26 C°-on) figyeltük meg. 1. táblázat Micromonospora sp. W847 telepek jellege különféle táptalajokon glukózos-aszparaginos agar Bennett-féle agar Emerson agar paradiosompépeszablisztes agar glukózos-élesztőkivonatos agar burgonyaszelet szadharózos-nitrátos agar (Czapek-féle agar) tirozinos agar 2, 7 és 14 nap után megfigyelve Gordon és Smith: J. Bacterol. 69, 147) gyengén fejlett gyengén fejlett gyengén fejlett gyengén fejlett jól fejlett, kiemelkedő, finoman ráncos gyengén fejlett jól fejlett, kiemelkedő, ráncos elég fejlett, részben oldódott kristályok közvetlenül a telep alatt, barna színű diffúzív pigmentképződés 3 hét alatt, a diffúzív pigment nem fekete és tirozin-pozitívra nem tipikus, mint a Streptomyces által termelt. A Micromonospora sp. W847 különösen jól szaporodik 26 és 37 C° között, de nem mutatkozik növekedés 50 C°-on. Aerób, és a nitrátot nem redukálja nitritté. Nem folyósítja el a zselatint, nem hidrolizálja a tejet, és nem bontja el a cellulózt. Nem termel diffúzív pigmentet pepton-vas agáron. A Micromonospora sp. W847 jól szaporodik 0;5% élesztőkivonatot és 1% l-arabinózt, glukózt, keményítőt és szacharózt tartalmazó táptalajon, de csak mérsékelten szénhidrátforrásként 1'% xilózt tartalmazó táptalajon. Gyengén szaporodik olyan táptalajokon, amelyekben az egyetlen szénhidrátforrás 1% d-arabinóz, cellulóz, dulcit, galaktóz, glicerin, laktóz, fruktóz, 20 25 30 35 40 45 50 55 60 melibióz, melecitóz, raffinóz, ramnóz, ribóz, inozit, vagy mannit. A Micromonospora. sp. W847 további jellegzetessége nitragénforrásokat hasznosító képessége. Jellegzetes nitrogénforrásokon és 1% glukózon tenyésztett telepek 14 napi szaporítás után (24—26 C°-on) az alábbi 2. táblázatban közölt jellegzetességeket mutatják. 2. táblázat Nitrogénforrások hasznosítása Nitrogénforrások A telep jellege 0,5% Difco-Yeast (élesztő) kivonat 1,0% NZ amin A típus* 1 % aszparagin 1 % glutaminsav 1 % ammóniumnitrát jól fejlett, kiemelkedő, finoman ráncos elég fejlett gyengén fejlett gyengén fejlett gyengén fejlett * gyártja a Sheffield Chemical Co., Norwich, N. Y. A következőkben ismertetett új antibiotikum komplex termelhető a Micromonospora sp. W847 var. NRRL 3274 és/vagy var. NRRL 3275 és/vagy ennék a fajnak egy másik törzse (mutánsa vagy változata) felhasználásával, amelynek ugyanaz á biológiai jellege atekintetben, hogy ugyanabba a komplexumba tartozó antibiotikumokat termel. Jelen találmány tehát nem értelmezendő oly módon, hogy ki van "belőle zárva a Micromonospora sp. W847 faj különféle változatainak és az e mikroorganizmusból mutánsképző behatásokkal vagy szerekkel, pl. nagyfrekvenciás sugárzással, mint a röntgen- és az ultraibolya sugárzás, aktinofágokkal és nitrogénmustárral termelt mutánsoknak az alkalmazása. Az antibiotikumot termelő eljárást részleteiben ismertető alábbi leírásban a Micromonospora sp. W847 elnevezést olyan értelemben használjuk, hogy az felöleli a fent leírt színváltozatokat, továbbá ennek a fajnak valamennyi egyéb teljesen egyenértékű változatát és mutánsát. Az antibiotikum 1. A W847 antibiotikum-komplex előállítása A Micromonospora sp. W847 faj, különösen az alább leírt szabályozott fermentációs eljárással tenyésztve, egy komplex antibiotikum keveréket termel, amelyet az alábbiakban W847 antibiotikum-komplexnek nevezünk. A további fermentáció számára alkalmas oltóanyag előállítására a Micromonospora sp. W847-et előnyösen aerób körülmények között süly-65 lyesztve (szubmerz módon) szaporítjuk állandó 2