158314. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmányozási célokra alkalmas fehérjehidrolizátum előállítására
9 158314 10 fa hűtjük és lQO-iäS SA szitán kiszűrjük a le nem hidrolizált rostokat. A rostokat a következő hidrolízislhez adjuk. A szűredéket foszforsavval 6,0—6,2 pH értékre állítjuk be, hozzáadunk 15 g MgCl2-t, 35 g FeCl 2 -t és 3,5 g MnS04 -et, majd vákuumban harmadára sűrítjük és a sűrítményt porítva beszárítjuk 160/120 C°-os levegővel. A kapott termék 24 kg, a szárítási veszteség 3%> szulfáthamu tartalom 17%, össznitrogéntartalom 10,1%, nyersfehérjeérték 66%, összesíraszámi 2400, coliszám 0. 3. példa: 100 kg vegyes szervhulladékot gyorsfordulatú késes finom őrlőn (Kari SchnelMéle Zerkleinerungsmaschine. 0 300 mm) ledarálunk, 1000 1 csapvízzel elkeverjük és keverés közben gőzköpeny fűtéssel 1000 C°-ra melegítjük. 10 perces forralás után a hőfokot 45 C°-ra hűtjük és az elegyhez adagolunk 5,5 kg CaCl2-t és a rendszer pH-ját adagolt 3,5 kg CaO-val 8,5-re állítjuk, hozzákeverünk továbbá 5 liter toluolt és 3 liter kloroformot. 10 perces keverés után 6 liter, szűrt és bepárlással tizedére sűrített Bacillus subtilis fermentlevet adunk az elegyhez. A fermentlé-«űrítményben 5000 E/ml proteáz aktivitás van. Az elegyet 6 órán át 45 C°-on és pH 8,5 értéken hidrolizáljuk. A pH-esést CaO adagolással ellensúlyozzuk. 6 óra után az elegyet felforraljuk; 10 perces forralás után köpenyhűtéssel 60 C°-ra csökkentjük a hőfokot, a pH értékét technikai minőségű, 20%-os foszforsavval 4,5— 5,5 közé állítjuk. Ezután ellenőrizzük a beállítást, mert a szervőrleményhez adott CaCl2 is leválik Ca-foszfát alakjában. A meleg oldatot fenti gyorsfordulatú őrlőn átengedjük, karborundum őrlőfejet alkalmazva. A kapott szuszpenzióból 200 litert kiemelünk és a Bacillus subtilis törzs fermentációs táptalajához felhasználjuk fehérjeforrásként. Az 1800 liter finom szuszpenziót porító szárítón leszárítjuk. 200 kg barnás-szürke finom port kapunk végtermékként. A termék Ca-tartalma 3,5%, CaO-ban kifejezve. Össznitrogéntartalom 9,8%, amino-nitrogéntartalma 1,5%. Összcsíraszám 6000, Coliszám 0. 4. példa: A 2. példában megadott összetételben 100 kg vegyes szervhulladékot a 3. példában megadott módon" finomra őrölünk. Hozzákeverünk 60 liter csapvizet, jól elkeverjük az őrleménnyel és 10 percig forraljuk az elegyet keverés közben. Ezután a hőmérsékletet 28 C°-ra csökkentjük, és ezen a hőfokon hozzákeverünk annyi glükózszörpöt, hogy az oldat cukortartalma 4,5% legyen, a pH értéket tömény foszforsavval 5-re állítjuk be, majd inökulumkónt 40 liter Aspergillus oryzae kultúrát adunk a keverékhez. A keveréket olyan horgonykeverős autoklávfoan helyezzük el, melynek aljára levegőt nyomatunk megfelelő szórófejen át. 24 órán át pH = 5 5 értéken, 28 G°-on a fermentlével bevitt mikrobák elszaporodnak. Ekkor 40 l-t a keverékből átmérünk a következő, hasonló módon előkészített gyártáshoz és azzal fermentálunk 24 órán át. 10 Az első gyártásból maradó 160 liter keveréket 40 C°-ra melegítjük, a pH értéket 8-ra állítjuk Ca(OH)2 oldat segítségével. A fermentációs ciklusban elszaporodott mikrobák exoenzimjeivel a pH optimumon 6 órán át elhidrolizáljuk 15 a szerv őrleményt. Az elfolyósodott keveréket pH 8-on felforraljuk, 15 perces forralás után vagy az 1. vagy a 2. példa szerint dolgozzuk fel. A második menet fermentációját befejezve 40 literrel beindítjuk a harmaduk gyártást, míg a 20 második gyártásból maradó 160 liter keveréket az elsőhöz hasonlóan dolgozzuk fel. A gyártások fermentációs és hidrolízises fázisai így egymást követően haladnak tovább. 25 Az őrölt szervhulladék így a fermentációs ciklusban táptalajként szolgál, majd a hidrolízises ciklusban a keletkezett enzimek segítségével a szervőrleményt, illetve annak fehérjetartalmát lehidrolizáljuk. 30 A kitermelés és a kapott termék minősége ugyanolyan, mint az 1., ill. 2. példa esetében. Szabadalmi igénypontok: 35 1. Eljárás takarmányozási célokra alkalmas fehérje hidroMzátum előállítására állati szervekből és/vagy szervhulladéfcofcból proteolitikus enzimes hidrolízissel az állati szervek és/vagy 40 szervhulladékok finomra őrlése, majd vízzel történő elkeverése útján, azzal jellemezve, hogy az enzim működéséhez szükséges pH érték beállítására és fenntartására kalciumhidroxidot vagy kalciumoxidot adunk az elegyhez, majd 45 7—32 órai hidrolízis után az elegyet felforraljuk, a hozzáadott kalciumhidroxidot foszforsavval semlegesítjük és/vagy kalciumfoszfátot és/vagy más szervetlen sókat vagy más takarmányozási szempontból előnyös adalékot adunk 50 hozzá és az elegyet ismert módon dolgozzuk fel száraz készítménnyé. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy proteoliti-55 kus enzimet termelő mikroorganizmus-tenyészetként a hidrolizálandó állati szerv- és/vagy szeryhulladék-szuszpenzióhoz Bacillus subtilis inokulum-kultúrát és szükség esetén a mikroorganizmus szaporodásához szükséges jelenlevő „0 fehérje mellett még egyéb tápanyagot is adunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a proteolitikus enzimet termelő mikroorganizmus-tenyé-63 szetként valamely ilyen mikroorganizmussal ka-5
