158174. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 19 042 RP enziminhibitor és összetevői előállítására
158174 2. táblázat Antienaimatiikus hatások Vizsgált reakciók a) 50%-ra inhibitáló koncentrációk' (ing/Mter) 21053 RP aprotinin szójakivonat «-anninokapronaav B. A. E. E. észterolízise ikallikreinmel 29 0,09 1100 >25 000 tripszkinel 0,43 0,22 0,85 >25 000 Kazein proteolízise tripszinnel 0,15 0,20 0,77 >25 000 kimotripszinnel 185 0,40 0,9 ' >25 000 Hemoglobin proteolízise pepszinnel >400 300 >300 >25 000 Fibrinolízis sztreptokinázzal 9 1,60 6,4 6 urokinázzal 21 0,14 4,6 25 Fibrinogen koagulálása trombinnal 35 >3500 >500 >1300 a) a reakciókörülmények azonosak a leírásban közöltökkel. A 19 042 RP enziminhibitor előállítható a Streptomyoes nemzetségbe tartozó, „Streptomyces ihygroscopicus DS 10 408" elnevezésű mikroorganizmus mesterséges táptalajon való tenyész- ao tésével, és adott esetben szétválasztható össze- . tevőire fizikai-kémiai módszerékkel. A találmány szerinti eljárással készült 19 042 RP enzim-inhibitor több összetevő keveréke, 35 ezek közül egyesek ásványi savakkal alkotott soils, nevezetesen hidrdkldridjailk és szulfátjaik alakjában vannak jelen. A 19 042 RP enziminhibitor és két fő össze- 40 tevője, a 21 052 RP és a 21053 RP szulfát és hidrokllorid alakban nagyon jól oldhatók vízben és híg savakban, oldhatok vizes alkoholban (vizes metanolban és etanolban) és vizes acetonban, igen rosszul oldhatók semleges sók 45 (nátriumklorid, ammóniumszulfat) tömény vizes 'Oldatában, vízmentes alkoholokban, acetanban, hexánban, etilaoetátban, éterben és klórozott szénhidrogénekben (pl. kloroformban). 50 A 19 042 RP, 21052 RP és 21053 RP enziminhibitordk pozitívan reagálnak a következő reagensékkel: biuret, Folm-*eagens, Reindeireagens (hipaktorit és o-*olidin), Ehrliich^reagens (p-dimetílamtaobenzaldehid, sárga színeződés), 55 Sakaguchj-reagens (hipobromit és a-naftol), Milko-Johés-reagens [nitraprusszidát és hexacianoferrát(III)], Loring-reagens (pikirinsav lúgos közegben, narancs színeződés), Wolfrom-Miller-reagens (perjódsav, permianganát és 60 benzidin), Grönwall ós Koiw-féle reagens (perjódsav és fufeszin), minhidrin hidrolízis után. Negatív a reakció a következőkkel: Gerngrossreagens (a-nitrozo-/?-.naftol és salétromsav), Pauly-reagens (diazotált szulfanilsav), Toenniés- 65 Kolb-reagens (jodoplatinát vagy nitroprusszidát), Sanger-Tuppy-reagens (p-anizidin), Bialreagens. (őreitől), Partridge-reagans (naftorezorcin) és Morgan-Elson-reagens (acetilaceton és p-dimetilarninobenz aldehid). A 12 042 RP enziminhibitoir savas hidroliizátumában a következő aminosavakat lehet kimutatni: arginin, feniilalanin, proliin és valin, továbbá hét guanidin. A 21 052 RP szulfát alakja szenet, hidrogént, oxigént, nitrogént és lként tartalmaz. Elemi öszszetótele megközelítőleg 48,3% C, 6,0% H, 18,2 % O, 21,20/0l N és 4,5% S. A szulfát báriumkloiriddal átalakítható a hidrokloriddá. A 21 053 RP hidrokloridja szeneit, hidrogént, oxigént, nitrogént és klórt tartalmaz. Elemi öszszetétele megközelítőleg: 49,5% C, 7,1% H, 17,5% O, 21,:8«/0l N és 4,9% Cl. A hidrdklorid ezüstszulfalttal átalakítható a szulfáttá. 21 052 RP-.t és 21 053 RP-t hidrolizálva kitűnik az arginin, fenilalanin, proliim és vaun aminosavaik 1:1:1:5 molekulairányú jelenléte, továbbá hét guanidin jelenléte. Azonkívül a 21 052 RP módosított Siphonelli-reaikcióban az ß-diolokra jellemző színeződést mutat. A 21 052 RP szulfát alakja és a 21 053 RP hidroiklorid alakja a következő fizikai tulajdonságokkal rendelkezik: Külső megjelenés: fehér amorf por. Ultraibolya színkép (meghatározva 0,05%-os vizes oldatból): 2
